帕金森病是最常見的神經(jīng)退行性疾病之一，晚期病理改變?yōu)槠湓\斷金標(biāo)準(zhǔn)。目前，臨床上亟需能夠用于診斷 PD 的生物學(xué)標(biāo)志物，尤其適用于疾病早 期診斷的指標(biāo)。近日，J Neurol Neurosurg Psychiatry 雜志上發(fā)表的最新綜述針對這一問題，列舉并探討了目前最具前景的腦脊液候選標(biāo)志物。具體內(nèi)容如下：
背景：
原發(fā)性帕金森?。╥PD）是一種進(jìn)展性神經(jīng)退行性疾病，最初由英國醫(yī)生 James Parkinson 描述為一種臨床實(shí)體，隨后由 Charcot 等科學(xué)家，對概念進(jìn)行了修飾完善。PD 主要臨床特征為，運(yùn)動(dòng)遲緩伴至少一種其它特征（靜止性震顫、肌肉強(qiáng)直、姿勢反射障礙）的存在，疾病癥狀與體征常為不對稱性，并且通常對左旋多巴治療敏感。
帕金森疊加綜合征或非典型性帕金森綜合征，為一組異質(zhì)性神經(jīng)退行性疾病，在疾病早期階段可能誤讀為 PD。而“疊加”或“非典型”的描述，提示疾病存在不常見于 iPD 患者的附加癥狀，如早期姿勢不穩(wěn)、易跌倒。
另外，多系統(tǒng)萎縮（MSA）患者早期具有自主神經(jīng)損害、錐體束征等特征；進(jìn)行性核上行麻痹（PSP）患者具有核上性眼球運(yùn)動(dòng)障礙及額葉綜合征等特征；皮質(zhì)基底節(jié)變性（CBD）患者具有肌張力障礙、肌陣攣等的特征。其它可以歸為非典型帕金森綜合征的疾病，如路易體癡呆（DLB），癡呆發(fā)作前，出現(xiàn)椎體外系癥狀。DLB 癡呆出現(xiàn)較早，與帕金森病癡呆（PDD）有所區(qū)別。
非典型帕金森綜合征，約占帕金森綜合征的 10%，并且通常對左旋多巴治療不敏感。相比于 iPD，非典型帕金森綜合征病情常更加嚴(yán)重，并以皮質(zhì)、皮質(zhì)下萎縮為特征。另外，非典型帕金森樣病，可以見于其它情況，如阿爾茨海默?。ˋD）及額顳葉癡呆（FTD）。
病理學(xué)：
許多神經(jīng)退行性疾病，出現(xiàn)蛋白錯(cuò)誤折疊與積聚。以病理學(xué)發(fā)現(xiàn)為基礎(chǔ)，帕金森綜合征可以分為α突觸核蛋白?。≒D、DLB、MSA）以及 tau 蛋白?。≒SP、CBD），見于圖一。
α突觸核蛋白 (α-Syn) 主要積聚于路易小體、路易突起（PD、DLB 的病理標(biāo)志物）及神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞胞漿（MSA）內(nèi)。而 tau 蛋白異常積聚形成的神經(jīng)纖維纏結(jié)，是 PSP 的診斷 標(biāo)準(zhǔn)，tau（＋）包涵體，為 CBD 患者的神經(jīng)病理學(xué)改變。另外，在 AD 中，神經(jīng)纖維纏結(jié)是一種與 Aβ淀粉樣斑塊，緊密相關(guān)的原發(fā)性病變過程；因此，AD 被認(rèn)為是一種繼發(fā)性 tau 蛋白病。FTD 也可出現(xiàn) tau 蛋白病變。
α突觸核蛋白病與 tau 蛋白病，常出現(xiàn)重疊。 AD、PD、DLB 患者的神經(jīng)元及少突膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)，可出現(xiàn) tau 蛋白、α突觸核蛋白病變共存現(xiàn)象。α突觸核蛋白與 tau 蛋白間，有復(fù)雜而又動(dòng)態(tài)的相互作用。一種蛋白異常積聚，可以使另一種蛋白傾向于聚集。例如，α-Syn 可以誘導(dǎo) tau 蛋白積聚，形成淀粉樣 tau 蛋白包涵體。
圖一：在 PD 中，有神經(jīng)元到黑質(zhì)的色素脫失，并且存活神經(jīng)元可能較為稀疏（A）。路易小體可以見于剩余神經(jīng)元中（A，右下角插圖）；并且通過α突觸核蛋白免 疫化學(xué)染色顯現(xiàn)（B）。路易小體，及路易突起可能見于新皮層（C，額葉皮層）。在多系統(tǒng)萎縮中（MSA），α突觸核蛋白主要沉積于少突膠質(zhì)細(xì)胞胞漿內(nèi)涵體 中（D，殼核），并且可見于神經(jīng)元胞漿內(nèi)涵體中（E，腦橋核，箭頭）。
進(jìn)行性核上行麻痹患者，tau 蛋白積聚于神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞中，形成叢 狀星形細(xì)胞（F，尾狀核）以及神經(jīng)纖維纏結(jié)（G，腦橋核）。皮質(zhì)基底節(jié)變性（CBD）以星形膠質(zhì)細(xì)胞斑為特征，由星形膠質(zhì)細(xì)胞遠(yuǎn)端 tau 蛋白積聚形成 （H，頂葉）。在 CBD 中，tau 還會以纖維纏結(jié)形式累積于神經(jīng)元內(nèi)（H，左下角ａ圖）；并且在少突膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)形成卷曲小體（H，右下角ｂ圖）。
（A）：常規(guī) HE 染色； （B-D）：α突觸核蛋白免疫化學(xué)染色； （F-H）tau 蛋白免疫化學(xué)染色。
遺傳學(xué)：
近期，遺傳學(xué)上的進(jìn)展，推動(dòng)了疾病病理生理學(xué)機(jī)制的闡明，因?yàn)殄e(cuò)誤折疊蛋白基因的突變，可以產(chǎn)生相關(guān)遺傳性神經(jīng)退行性病變。例如罕見遺傳性 PD，由 SNCA 基因突變影響α-Syn 的編碼。另外，PD 及 MSA 較輕患者的人口學(xué)研究顯示，疾病風(fēng)險(xiǎn)與 SNCA 單核苷酸片段多態(tài)性間具有相關(guān)性。
DJ-1（PARK7）突變，可以導(dǎo)致罕見的常染色體顯性遺傳性帕金森病，提示由線粒體損傷 / 氧化壓力通路驅(qū)動(dòng)的發(fā)病機(jī)制。即使 PD 不是“tau 蛋白病”，人群 研究仍顯示出 tau 基因（MAPT）突變現(xiàn)象，尤其在 H1 單倍型中，作為 PD 另一種風(fēng)險(xiǎn)因素。一些 tau 蛋白病變與 MAPT 變異相關(guān)，包括 CBD、17 號 染色體病相關(guān)的額顳葉癡呆（FTDP-17T）及 PSP。實(shí)際上，MAPT/tau 單倍型與 PD 間的相關(guān)性，強(qiáng)烈提示 tau 蛋白病的級聯(lián)病變可能與α突觸 核蛋白病相關(guān)。
診斷面臨的挑戰(zhàn)：
目前帕金森綜合征的診斷，很大程度上依賴臨床洞察度，盡管一些情況下，影像學(xué)及輔助手段可能有所幫助。在一系列尸檢研究中，24% 有生之年由神經(jīng)科醫(yī)生診斷為 iPD 患者，其實(shí)為另一種診斷結(jié)果。
腦脊液標(biāo)志物：
標(biāo)志物，即一項(xiàng)可以評估正常生物進(jìn)程、病理改變及對干預(yù)治療藥理反應(yīng)的客觀檢測指標(biāo)。理想的生物標(biāo)志物，應(yīng)該具有敏感性高、重現(xiàn)性好、與疾病過程密切相關(guān)、廉價(jià)、非侵入性等特征。
相 比于其他體液，腦脊液（CSF）與大腦具有更多的相關(guān)性，因此代表一種潛在的、可靠的生物標(biāo)志物來源。不同于血漿，血腦屏障并不會將 CSF 與大腦隔離。能夠直接反應(yīng)大腦特異性活動(dòng)及病理改變的蛋白 / 多肽，大多能夠擴(kuò)散至 CSF 中。另外，CSF 可以進(jìn)行連續(xù)測試，從而研究涉及病理過程的蛋白改變。因此，其優(yōu)于病理學(xué)方法，后者只能在幾十年后，反應(yīng)疾病晚期改變。
（一）歷史背景
目前，CSF 被廣泛用于帕金森綜合征的研究，并認(rèn)為是最具前景的診斷疾病進(jìn)程的方法。從歷史角度來看，由于帕金森綜合征主要為多巴胺異常，首次用于研究的蛋白標(biāo)志物為多巴 胺、單胺類及他們的代謝物。二十世紀(jì)六、七十年代研究發(fā)現(xiàn)，帕金森綜合征及癡呆患者中，CSF 內(nèi)單胺濃度降低（高香草酸及 5- 羥基吲哚乙酸）。
繼而，倫敦國立醫(yī)院，開展了一項(xiàng)通過 CSF 內(nèi)高香草酸濃度，評估 PD 患者中左旋多巴療效的研究。在左旋多巴治療前，高香草酸濃度在所有患者中較低，但經(jīng)過治療后，高香草酸水平升高，并且與左旋多巴劑量顯著相關(guān)。
因?yàn)檫@些代謝結(jié)果，容易受到許多因素的影響，未來需要進(jìn)一步鑒定α-Syn、tau 等化合物。即使目前存在一些具有前景的候選標(biāo)志物，但仍沒有可靠的指標(biāo)。
（二）方法
本篇綜述，作者回顧了帕金森綜合征中，可能潛在作為生物標(biāo)志物的 CSF 蛋白，主要包括：α-Syn、神經(jīng)元損傷標(biāo)志及 Aβ42。另外，作者簡要的回顧了最新的生物標(biāo)志物及“組學(xué)”標(biāo)志物。
作者通過搜索 PubMed/Medline 數(shù)據(jù)庫內(nèi) 2006 年后的相關(guān)文章，包括尸檢、人類、CSF 研究；所有研究至少包括一個(gè)帕金森綜合征隊(duì)列，以及健康或非神經(jīng)退行性病變的其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病對照組。
使 用的檢索關(guān)鍵詞為：“帕金森病”、“進(jìn)行性核上行麻痹”、“多系統(tǒng)萎縮”、“皮質(zhì)基底節(jié)綜合征”、“皮質(zhì)基底節(jié)變性”、“帕金森病癡呆”、“路易體癡呆” “帕金森綜合征”“突觸核蛋白病變”“tau 病變”“神經(jīng)退行性病變”聯(lián)合“腦脊液標(biāo)志物”以及特殊生物標(biāo)志物（“α-Syn”、“tau”、“磷酸化 tau 蛋白”、“ Aβ42”、“ 神經(jīng)細(xì)絲”、“神經(jīng)損傷標(biāo)志物”、“炎性”、“代謝”、“氧化壓力標(biāo)志物”），并且進(jìn)一步開展鑒定出版物的人工搜索。
（三）帕金森綜合癥 CSF 候選生物標(biāo)志物
1.Aβ42： 一種 42 個(gè)氨基酸長度的多肽、傾向于積聚成淀粉樣蛋白，是淀粉樣蛋白前體 (APP) 經(jīng)蛋白水解酶作用后的底物，也是阿爾茨默海病腦內(nèi)主要病理標(biāo)志性蛋白之一。相比于正常群體，認(rèn)知障礙及癡呆更常見于帕金森綜合征患者，對生活質(zhì)量及預(yù)期壽命有不利影響。Aβ42 與 PD、癡呆間的關(guān)系已被廣泛研究。
在大多研究中，與對照組相比，PD 患者 Aβ42 顯著降低，并且與更差的認(rèn)知表現(xiàn)相關(guān)。然而，其它研究沒有發(fā)現(xiàn)，PD 組及對照組患者中 Aβ42 的區(qū)別。Compta 等研究者，從 27 名非癡呆的 PD 患者中收集腦脊液，并對他們進(jìn)行多年隨訪。與未罹患癡呆的患者相比，在 18 個(gè)月內(nèi)轉(zhuǎn)化為癡呆的患者，CSF 內(nèi) Aβ42 明顯更低。
在帕金森綜合征患者隊(duì)列中，DLB 組腦脊液內(nèi) Aβ42 最低。一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，近一半 DLB 患者，腦脊液生物標(biāo)志物與 AD 患者一致，提示 DLB 過程中有 Aβ（淀粉樣蛋白）相關(guān)的病理改變。有證據(jù)提示，低 Aβ42 水平，為 Aβ斑塊的病理標(biāo)志物，可以預(yù)測 PD 患者認(rèn)知下降的過程， 但是未來需要基于更大隊(duì)列的縱向研究。
2.α突觸核蛋白／α-Syn：一種 140 個(gè)氨基酸長的蛋白質(zhì)，定位于突 觸前神經(jīng)末梢，并在腦內(nèi)廣泛分布。在突觸前神經(jīng)末梢中，α-Syn 接近突觸小泡。目前，尚未弄清α-Syn 的具體功能，但是高度懷疑其參與神經(jīng)遞質(zhì)釋放調(diào)節(jié)中。盡管α-Syn 被認(rèn)為是一種細(xì)胞內(nèi)蛋白，但它能夠在細(xì)胞間轉(zhuǎn) 移，導(dǎo)致 PD 病理改變。
α 突觸核蛋白能夠被截?cái)唷⒁阴；?、磷酸化、氧化、糖基化等過程修飾。路易小體，主要由翻譯后修飾的α-Syn 構(gòu)成。α-Syn 沉淀是突觸核蛋白病變的關(guān)鍵致病機(jī)制。在體外，與 AD 相似，α-Syn 纖維化對培養(yǎng)的神經(jīng)元細(xì)胞具有毒性。
3. 總α 突觸核蛋白／t-α-Syn：帕金森綜合征研究的結(jié)果并不一致，提示一些神經(jīng)退行性病變具有 t-α-Syn 的重疊。最近，逐漸形成一種共識，即近期大多研究（主要應(yīng)用 ELISA 技術(shù)）顯 示，相比于對照組，PD 組患者 t-α-Syn 水平降低。另外，其它突觸核蛋白病變，如 MSA、DLB 也有 t-α-Syn 水平的降低。
Mollenhauer 等研究者，評估了突觸核蛋白病變、tau 蛋白病變及其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病對照組中，t-α-Syn 水平的改變。有研究顯示，突觸核蛋白病變患者 t-α- Syn、t-tau（總 tau 蛋白）及年齡與其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病對照組及 AD 組患者有所區(qū)別。只有 t-α-Syn 水平能夠區(qū)分對照組與 PD、MSA 患者，而 t-tau 或 Aβ42 無此作用。
Parnetti 等研究者，調(diào)查了 t-tau、p-tau（磷酸化 tau 蛋白） 及 t-α-Syn 的組合，能否區(qū)分 PD 與 DLB、AD、FTD 及對照組患者。研究發(fā)現(xiàn)，t-α-Syn 與總 tau 蛋白間有反向相關(guān)性，并且單獨(dú)使用腦脊液 內(nèi) t-α-Syn，作為突觸核蛋白病變標(biāo)志物缺少特異性（敏感性 94%、特異性 25%）。然而，t-tau/t-α-Syn 及 p-tau/t-α-Syn 比率，或許能夠作為 PD 的生物標(biāo)志物（敏感性 89%、特異性 61%）。
其它研究者也發(fā)現(xiàn)，當(dāng)排除血液樣本污染后，聯(lián)合 t-α-Syn 及 p- tau/t-tau 能夠區(qū)分 PD 及 MSA（敏感性 90%、特異性 71%）。相比于對照組，t-α-Syn 在 PD 及 MSA 患者中降低。大多研究，沒有針對 t-α-Syn 與疾病病程或疾病嚴(yán)重度間的關(guān)系。有趣的是，有報(bào)道顯示 t-α-Syn 水平具有性別特異性。Mollenhauer 及 Kang 等研究者，開 展了兩項(xiàng)針對藥物初治 PD 患者的研究，結(jié)果仍發(fā)現(xiàn) t-α-Syn 水平的降低，提示這種現(xiàn)象與多巴胺能藥物治療無關(guān)。
4.α-Syn 的低聚化與磷酸化：Tokuda 等研究者，評估了可溶性 α-Syn 低聚物作為 PD 患者早期標(biāo)志物的效果，結(jié)果發(fā)現(xiàn)相比于健康對照組及其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病對照組，α-Syn 低聚物水平及低聚物 /t-α-Syn 比率，在 PD 患者中升高（包括輕度及疾病早期）。CSF 內(nèi)低聚物 /t-α-Syn 比率，鑒定 PD 的敏感性為 89.3%，特異性為 90.6%。
同時(shí)，這些結(jié)果在 2 項(xiàng)獨(dú)立驗(yàn)證研究中，具有重復(fù)性。尸檢測得的低聚物及磷酸化低聚體形式的α-Syn，可用于區(qū)分 PD、DLB 及 MSA。這些結(jié)果，需要進(jìn)一步在更大規(guī)模 的幸存患者中進(jìn)行重復(fù)。
（四）神經(jīng)元損傷標(biāo)志物
1.Tau 蛋白：它對軸突內(nèi)微管功能至關(guān)重要，并且對神經(jīng)元及軸突結(jié)構(gòu)完整性中起重要作用。當(dāng)過度磷酸化時(shí)，微管結(jié)合親和力下降，導(dǎo)致障礙。同時(shí)，異常構(gòu)象，導(dǎo)致蛋白積聚及包涵體的形成。
2. 總 tau 蛋白（t-tau）與磷酸化 tau 蛋白（p-tau）：過去，對帕金森綜合征患者腦脊液內(nèi) tau 蛋白水平的評估結(jié)果，并不明確。在 PD 患者中，大多研究顯示 tau 蛋白水平正常，但是也有報(bào)道顯示其水平下降。在非 典型帕金森綜合征中，DLB 患者顯示有 t-tau 蛋白水平的升高；另外與 PD 相比，MSA、PSP 患者 p-tau/t-tau 比率更低。然而，其它研究沒有發(fā)現(xiàn)帕金森綜合征間具有差異。尤其，PSP 患者并未發(fā)現(xiàn)顯著改善。年齡，被認(rèn)為是與 t-tau 蛋白水平關(guān)系最密切的影響因素。
總 tau 蛋白與磷酸化 tau 蛋白，可能有助于區(qū)分 AD 及 PD 患者；另外，當(dāng)聯(lián)合其它標(biāo)志物后，診斷準(zhǔn)確性優(yōu)于單獨(dú)指標(biāo)。
3.Tau 蛋白異構(gòu)體：Tau 蛋白異構(gòu)體間的失衡，與微管結(jié)合的結(jié)構(gòu)域重復(fù)三次（3R-tau）或四次（4R-tau），對神經(jīng)退行性病變發(fā)病機(jī)制很重要。正常人腦表達(dá)等量的 3R- tau 和 4R-tau，但在 PSP、CBD、FTDP-17 病例中，神經(jīng)纖維纏結(jié)、膠質(zhì)細(xì)胞包涵體主要為 4R，而額顳葉變性中 Pick 小體主要為 3R；AD 患者神經(jīng)纖維纏結(jié)含有 3R、4R 異構(gòu)體。
Luk 博士及其同事，之前開發(fā)了選擇性針對兩種亞型的抗體，并且通過免疫 -PCR 技術(shù)， 來檢測 CSF 內(nèi)異構(gòu)體數(shù)量。相比于 CBS（皮質(zhì)基底節(jié)綜合征）、PDD、及對照組，PSP、AD 患者 4R-tau 異構(gòu)體減少。而 3R-tau 異構(gòu)體間沒有 區(qū)別。因此，作者認(rèn)為 4R-tau 能夠用作 PSP 疾病進(jìn)展的標(biāo)志物之一，但未來需要大規(guī)模樣本及縱向研究來進(jìn)一步驗(yàn)證。
4. 截?cái)?Tau 蛋白：Borroni 等研究者，探索了一些神經(jīng)退行性疾病中，全長（55kDa）及截?cái)?tau 蛋白（33kDa）形式。相比于健康對照組，PSP 組患者，截?cái)?tau/ 全長 tau 蛋白（33kDa/55kDa 形式）比率，顯著降低（PSP 與 PD 或 DLB 相比，敏感性為 96%、特異性為 85%；PSP 與 CBD 相比，敏感性 90%、特異性 76.2%）。這些片段為 tau 蛋白水解產(chǎn)物，可以通過免疫沉淀技術(shù)檢測，但比 ELISA 技術(shù)更加費(fèi)時(shí)。
上述研究結(jié)果，在另一隊(duì)列患者的研究中具有重現(xiàn)性。然而，其它課題組并沒有得出重復(fù)性結(jié)果，在獨(dú)立性 PSP 患者隊(duì)列中，沒能發(fā)現(xiàn) tau 蛋白比率的降低，懷疑 33/55kDa 條帶見于 IgG 的重鏈與輕鏈上。近期針對其它腦脊液內(nèi)源性 tau 片段的研究提示，可以開發(fā)針對這些片段的特異性實(shí)驗(yàn)，并且評估不同 tau 蛋白病變間的相關(guān)性。
5. 神經(jīng)絲蛋白輕鏈（NF-L）：神經(jīng)絲蛋白，是維持軸突管徑及神經(jīng)元大小、形狀的主要結(jié)構(gòu)單元。因此，它們對神經(jīng)元形態(tài)完整及神經(jīng)沖動(dòng)的傳導(dǎo)異常重要。它們主要由 3 種不同分子量蛋白組成：輕鏈、中間鏈、重鏈。
重鏈神經(jīng)絲蛋白（NF-H）是細(xì)胞骨架的重要組成部分。相比于 PD、CBD 及其他神經(jīng)系統(tǒng)病變對照組，PSP 及 MSA 患者腦脊液內(nèi) NF-H 水平更高。輕鏈神經(jīng)絲蛋白（NF-L）是神經(jīng)絲蛋白的骨架成分，并具有自我組裝能力。
CSF 內(nèi) NF-L 的增高，反應(yīng)大型有髓軸突的髓鞘再生過程。近期研究顯示出一致性結(jié)果，即 NF-L 能夠用于區(qū)分非典型帕金森綜合征與 PD，但不能用于非典型帕金森綜合征的細(xì)分。CSF 的連續(xù)分析顯示，疾病進(jìn)展中，NF-L 水平?jīng)]有增加。NF-L 能夠用于區(qū)分 PD 及其它退行性疾病，因?yàn)樗鼘ΩみM(jìn)的神經(jīng)元死亡形式敏感，而 PD 中神經(jīng)元的死亡相對溫和。
6. 膠質(zhì)纖維酸性蛋白（GFAP）：GFAP 是一種主要表達(dá)于星形膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)的蛋白。急性腦損傷后，膠質(zhì)細(xì)胞解體能夠?qū)е?CSF 內(nèi) GFAP 水平的升高。Süssmuth 等研究者發(fā)現(xiàn)，與對照組相比（非神經(jīng)退行性病變的其他神經(jīng)系統(tǒng)疾?。?，帕 金森綜合征患者 GFAP 水平升高。然而，其他課題組的研究發(fā)現(xiàn)，帕金森綜合征組與健康對照組患者間，GFAP 水平相似，并未隨時(shí)間發(fā)生顯著改變。
（五）其他候選標(biāo)志物
1. 氧化壓力標(biāo)志：
DJ-1---DJ-1 是一種涉及多過程的多功能蛋白。目前認(rèn)為，在神經(jīng)退行性病變中，DJ-1 蛋白具有應(yīng)對氧化壓力的作用。正如我們已經(jīng)討論過的，DJ-1 可能與常染色體隱性遺傳性 PD 相關(guān)。關(guān)于 DJ-1 能否作為一種腦脊液生物標(biāo)志物的結(jié)果并不一致。
一項(xiàng)研究顯示，相比于對照組，PD 組 DJ-1 蛋白水平降低（敏感性 90%、特異性 70%），但是其它研究未發(fā)現(xiàn)這種區(qū)別；另外，近期有研究發(fā)現(xiàn)，相比于 PD 及對照組，MSA 組 DJ-1 水平顯著增加。聯(lián)合 DJ-1 及 t-tau、p-tau 蛋白水平，有助于提高區(qū)分 MSA 及 PD 的準(zhǔn)確性。
8- 羥基脫氧鳥苷 /8-OHdG---8-OHdG 是神經(jīng)退行性病變與惡性腫瘤中，氧化及線粒體功能障礙的標(biāo)志物之一。CSF 內(nèi)非癡呆 PD 患者中，8-OHdG 水平高于對照組；并且在 PDD（帕金森病癡呆）中，與 MMSE 水平負(fù)相關(guān)。
尿酸 --- 尿酸是一種內(nèi)生性的潛在抗氧化成分。盡管有很多證據(jù)提示，PD 患者血清中尿酸水平較低，但腦脊液研究尚未得到一致結(jié)果。Maetzler 等研究者發(fā)現(xiàn)，相比于 DLB 組，PD 組患者尿酸水平增加；但其他研究者未發(fā)現(xiàn)帕金森綜合征與健康對照組間具有區(qū)別。
2. 炎性標(biāo)志物：
Fractalkine---Fractalkine 是一種細(xì)胞炎性因子，在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)發(fā)揮神經(jīng)營養(yǎng)及抗凋亡作用。MSA 患者中，F(xiàn)ractalkine 水平減低，并且可以單獨(dú)用來區(qū)分 PD 與 MSA（敏 感性 99%、特異性 95%）。另外，fractalkine/Aβ42 的比率與 PD 疾病嚴(yán)重性及進(jìn)展密切相關(guān)。這些結(jié)果需要進(jìn)行重復(fù)。
補(bǔ)體 C3/H 因子之比 --- 與 PD、AD 及健康對照組相比，MSA 組患者腦脊液內(nèi)補(bǔ)體 C3/H 因子比率顯著降低。補(bǔ)體 C3 或 H 因子增加，伴 Aβ42 水平降低，與 PD 疾病嚴(yán)重程度及進(jìn)展陽性相關(guān)。
Neurosin---Neurosin 是一種表達(dá)于人體腦組織內(nèi)的蛋白質(zhì)，能夠裂解α-Syn。一項(xiàng)突觸核蛋白變性疾病中 neurosin 水平的研究顯示，DLB 患者內(nèi) neurosin 水平最 低，但 DLB、PDD、PD 間沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。將數(shù)據(jù)匯總后，相比于 AD 及對照組，突觸核蛋白病變組患者 neurosin 水平明顯更低。
腦啡肽酶 (Neprilysin)--- 腦啡肽酶是一種膜結(jié)合性突觸前蛋白，涉及 Aβ清除過程。DLB、PDD 患者，腦脊液內(nèi)腦啡肽酶水平顯著低于 PD 及對照組；并且所有隊(duì)列中，均與 Aβ42 水平相關(guān)。
3. 兒茶酚胺代謝：
高香草酸（HVA）/ 黃嘌呤比率 ---HVA 是多巴胺的主要分解產(chǎn)物，目前，已經(jīng)廣泛研究了 HVA 與 PD 間的相關(guān)性。黃嘌呤是尿酸的直接前體。PD 組高香草酸（HVA）/ 黃嘌呤比率高于對照組，并且與疾病嚴(yán)重性相關(guān)。
二羥苯乙酸（DOPAC）--- 基底節(jié)處多巴胺消耗，為 PD 的神經(jīng)化學(xué)特征之一。DOPAC 是神經(jīng)元兒茶酚胺代謝物之一。相比于健康對照組，PD 及 MSA 組患者 DOPAC 水平降低，但是突觸核蛋白變性組間沒有區(qū)別。上述復(fù)合物，可能是最具前景的候選標(biāo)志物，但需要未來展開進(jìn)一步驗(yàn)證。腦脊液 HVA 與 PD 間的相關(guān)性，及治療反應(yīng)已經(jīng)被廣泛研究，但在臨床常規(guī)檢查中仍沒有明確地位。
4. 溶酶體功能障礙：
溶酶體是“細(xì)胞垃圾處理站”，在 PD 病理改變早期，溶酶體功能 失調(diào)。戈謝?。℅D）是溶酶體貯積?。↙SD）中最常見的一種，因溶酶體缺乏β- 葡萄糖苷酶 (GCase) 而引起的罕見的、常染色體隱性遺傳病。GD 能夠增加帕金森綜合征風(fēng)險(xiǎn)，因?yàn)?GCase 缺陷及溶酶體障礙，能夠直接導(dǎo)致α-Syn 積聚。
檢測腦脊液內(nèi) GCase 活性，可能是一種有助于鑒定 PD 的標(biāo)志物。PD 及 DLB 患者 GCase 活性低于其它神經(jīng)系統(tǒng)疾病的對照組。近期一項(xiàng)研究顯示，聯(lián)合 GCase 活性，低聚體 / 總α-Syn 比率及年齡，有助于區(qū)分 PD 及其它神經(jīng)系統(tǒng)疾病的對照組。荷蘭一項(xiàng)新發(fā) PD 患者的隊(duì)列研究顯示，CSF 內(nèi) GCase 活性趨向于降低。針對 GCase 能否作為帕金森綜合征潛在標(biāo)志物的問題，未來需進(jìn)一步展開評估。
5.“組學(xué)”方法：
“組 學(xué)”技術(shù)，能提供一種非偏倚方法，鑒定涉及神經(jīng)退行性病變的生物化學(xué)路徑。最終，旨在確定未來值得靶向研究的一系列標(biāo)志物。“組學(xué)”方法，即通過非偏倚、 系統(tǒng)性檢測方法，研究基因變異（基因組學(xué)）、RNA（轉(zhuǎn)錄組學(xué)）、蛋白質(zhì)（蛋白組學(xué)）及小分子（代謝組學(xué)）。我們在之前的部分，已經(jīng)簡要探討過基因組學(xué)及 代謝組學(xué)，下面我們將回顧帕金森病相關(guān)的蛋白質(zhì)組學(xué)。
Abdi 等研究者，使用多重定量蛋白質(zhì)組學(xué)平臺，鑒定出 PD 患者中，72 種改變的蛋白質(zhì)（與健康對照組相比）。載脂蛋白 H 和銅藍(lán)蛋白，看似有助于區(qū)分 PD 與健康對照組及非 PD 患者（AD、DLB）。
Constantinescu 等研究者，使用表面增強(qiáng)激光解吸離子化飛行時(shí)間質(zhì)譜儀 (SELDI-TOF-MS)，發(fā)現(xiàn)４種蛋白質(zhì)構(gòu)成的 CSF 蛋白質(zhì)組學(xué)結(jié)構(gòu)，可以從非典型帕金森綜合征中區(qū)分出 PD 及健康對照組患者。近期，Ishigami 等研究者，利用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)，對 MSA 與 PD 進(jìn)行區(qū)分，即使在疾病早期，也能夠開展。
另一項(xiàng)研究試圖通過蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)，從 PDD 患者中區(qū)分出 PD；共鑒定 6 種蛋白，但只有絲氨酸蛋白酶抑制劑通過生物化學(xué)方法進(jìn)行了驗(yàn)證。通過２-D 免疫印跡技術(shù)，檢驗(yàn)程序的特異性為 100％，敏感性為 58％。通過無凝膠蛋白質(zhì)組學(xué)質(zhì)譜法和同位素標(biāo)記樣品（iTRAQ) 技術(shù)，檢測 PD、PDD、非癡呆對照組患者腦脊液，鑒定出 16 種差異性調(diào)節(jié)蛋白，可能作為潛在診斷標(biāo)志物。
盡管蛋白質(zhì)組學(xué)研究，已經(jīng)產(chǎn)生一系列候選基因，但仍然需要進(jìn)一步驗(yàn)證與重復(fù)。值得注意的是，目前發(fā)現(xiàn)的多種蛋白質(zhì)表達(dá)改變，可見于一系列神經(jīng)退行性病變。因此，疾病特異標(biāo)志物的檢測，可能需要依賴更先進(jìn)的技術(shù)，對 CSF 蛋白質(zhì)組學(xué)進(jìn)行深入探索而得出。
6. 影像學(xué)標(biāo)志物：
盡管影像學(xué)標(biāo)志物，超出本綜述的范圍，但我們?nèi)砸赋觯Y(jié)合腦脊液與影像學(xué)標(biāo)志物的方法，或許能夠增加診斷準(zhǔn)確性。
探討：
目前開展的研究，大多為橫斷面、回顧性試驗(yàn)，沒有經(jīng)過病理學(xué)確認(rèn)。因此，尚不清楚臨床診斷準(zhǔn)確度，并且合并癥對臨床表型的影響也依然未知。
目前缺少分析前（樣本收集、處理、貯存）及分析中（執(zhí)行分析／樣本處理）標(biāo)準(zhǔn)化方法。例如，CSF 被血液污染后，能夠改變α-Syn 及 DJ-1 的水平。另外，缺少標(biāo)準(zhǔn)化試驗(yàn)方法，而不同試驗(yàn)方法，可能測出不同蛋白濃度，致使結(jié)果全球化應(yīng)用受限。
而且，疾病組及對照組均具有異質(zhì)性特征。神經(jīng)退行性疾病組，具有年齡、疾病病程、嚴(yán)重程度等差異。而對照組包括少量健康對照組，及大多為非神經(jīng)退行性病變的神經(jīng)系統(tǒng)疾病患者。一些研究納入的對照組患者，可能具有神經(jīng)退行性改變，例如輕度認(rèn)知障礙或正常壓力性腦積水。
最后，研究缺少不同形式標(biāo)志物的結(jié)合，如 CSF 標(biāo)志物及影像學(xué)的聯(lián)合。 帕金森進(jìn)展標(biāo)志物倡議（PPMI），是一項(xiàng)具有前景的研究，旨在鑒定 PD 進(jìn)展性標(biāo)志物，并且更好鑒定 PD 患者亞群。研究開展了運(yùn)動(dòng)、神經(jīng)心理學(xué)評估，多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)體掃描，及 CSF 檢測等工作；同時(shí)數(shù)據(jù)獲取、CSF 收集及處理步驟具有嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)。
關(guān)鍵點(diǎn)總結(jié)：鑒定帕金森綜合征的 CSF 內(nèi)生物標(biāo)志物
（1） Aβ42：能夠預(yù)測 PD 患者認(rèn)知能力的下降；
（2）t-α-Syn：最具前景的標(biāo)志物，能夠區(qū)分突觸核蛋白病變與其他神經(jīng)退行性病變或健康對照患者，但缺少特異性；
（3）t-tau 與 p-tau：目前數(shù)據(jù)不一致，有助于區(qū)分 PD 及 AD，能夠與其它標(biāo)志物聯(lián)合使用；
（4）NF-L：能夠用于區(qū)分非典型帕金森綜合征與 PD；
（5）4R-tau：可能是 PSP 疾病進(jìn)展標(biāo)志物；
（6）DJ-1：具有潛在區(qū)分 MSA 與 PD 的能力；
（7）氧化壓力／炎性／代謝標(biāo)志物：初步結(jié)果顯示具有前景，但需要進(jìn)一步驗(yàn)證。
未來發(fā)展：
我們認(rèn)為，一些假設(shè)驅(qū)動(dòng)的生物標(biāo)志物，同時(shí)應(yīng)該使用多重平臺技術(shù)進(jìn)行探究。另外，應(yīng)該擴(kuò)大蛋白質(zhì)組學(xué)領(lǐng)域，并且提高分析敏感性，從而鑒定更多候選基因，其中一些可能出乎意料，從而為疾病機(jī)制提供新的線索。
未來，需要開展一系列檢測腦脊液的大型、前瞻性、縱向隊(duì)列研究，并且盡可能使用病理學(xué)方法對患者進(jìn)行確診。目前亟需解決的問題是，提高檢測過程標(biāo)準(zhǔn)及 CSF 分析的質(zhì)量控制。最后，與 AD 相似，應(yīng)該將不同形式的標(biāo)志物（如影像學(xué)）與 CSF 標(biāo)志物進(jìn)行結(jié)合。
臨床上，應(yīng)該盡可能在更多不可逆轉(zhuǎn)性神經(jīng)病變出現(xiàn)之前，完成帕金森綜合征的診斷。另外，研發(fā)靶向針對潛在病變過程的疾病修飾性藥物至關(guān)重要。使用放射性配體結(jié)合于α-Syn 上的顯像劑，極具前景，有助于評估患者有生之年，腦內(nèi)α-Syn 的分布情況。
結(jié)論：
帕金森綜合征，如大多神經(jīng)退行性病變一樣，潛在病理間具有復(fù)雜而又動(dòng)態(tài)的相互作用。為實(shí)現(xiàn)疾病早期診斷及精準(zhǔn)預(yù)后，需要開展聯(lián)合不同形式生物標(biāo)志物的大型、縱向隊(duì)列研究。
編輯： neuro207
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