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實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉方法及注意事項(xiàng)


  一、吸入式麻醉
  起效快,恢復(fù)也快,且麻醉的深度和維持時(shí)間易控制,被認(rèn)為是嚙齒類動(dòng)物最可靠的麻醉方式。我們下面主要介紹2種常見的麻醉劑——異氟烷和乙醚。

  1. 乙醚(Diethyl ether)
  特點(diǎn):為高度易揮發(fā)性液體,被吸收后會(huì)廣泛抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng),操作簡(jiǎn)單,見效快;
  操作方式:將被乙醚浸濕的消毒脫脂棉球或紗布放入燒杯(常用1000ml)內(nèi),將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物放入,用塑料薄膜封口,觀察,會(huì)發(fā)現(xiàn)動(dòng)物先開始興奮,繼而出現(xiàn)抑制,自行倒下。若實(shí)驗(yàn)時(shí)間過長,可將動(dòng)物固定在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,將含有乙醚的棉球靠近其鼻部,保持吸入狀態(tài);
  缺點(diǎn):但其對(duì)呼吸系統(tǒng)有刺激性,可增加呼吸道分泌物;若麻醉過深,可導(dǎo)致動(dòng)物死亡;由于其會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有害,且可能造成的操作人員危險(xiǎn)等原因,目前使用相對(duì)較少[1]。
  適用實(shí)驗(yàn):由于起效和維持時(shí)間短,僅5-10min,主要用于短時(shí)間的淺麻實(shí)驗(yàn),如大鼠眼眶取血等簡(jiǎn)單實(shí)驗(yàn)。

  2. 異氟烷 (Isoflurane)
  特點(diǎn):異氟烷為無色的澄明液體,易揮發(fā),具有輕微氣味;誘導(dǎo)和復(fù)蘇均較快,加上不會(huì)影響動(dòng)物的生理指標(biāo),在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用日趨廣泛;
  操作方式:一般使用時(shí)會(huì)配專用的吸入麻醉機(jī),混合純氧進(jìn)行麻醉,通過氧氣氣流使異氟烷揮發(fā),誘導(dǎo)麻醉一般使用2~3%的濃度,維持使用1.5~2%。一般在麻醉機(jī)連接一個(gè)麻醉罐子,如果單獨(dú)維持麻醉操作就使用面罩比較合適。一般小鼠的麻醉時(shí)間為2~3min,大鼠的麻醉時(shí)間為4~5min;

  異氟烷使用裝置
 

  適用實(shí)驗(yàn):研究表明,異氟烷麻醉能維持動(dòng)物的心率、血氧分壓、血液pH等生理功能處于穩(wěn)定狀態(tài)[2],適合情況復(fù)雜且持續(xù)時(shí)間較長的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)[3],包括連續(xù)監(jiān)測(cè)動(dòng)物參數(shù)變化如成像技術(shù)、還有一些其他全麻藥不宜使用的疾病,例如癲癇、顱內(nèi)壓增高、重癥肌無力、糖尿病等。

  二、注射式麻醉
  一種既簡(jiǎn)單方便,又能使動(dòng)物很快進(jìn)入麻醉期,而無明顯興奮期的方法。水合氯醛、戊巴比妥鈉、阿佛丁和氯胺酮是目前大小鼠實(shí)驗(yàn)中最常用的注射類麻醉劑。

  1. 水合氯醛(Chloral hydrate)
  特點(diǎn):有效的鎮(zhèn)靜催眠藥,但本品麻醉劑量與中毒量很接近,所以安全范圍小,使用時(shí)要注意;另外對(duì)皮膚和黏膜有較強(qiáng)的刺激作用;
  推薦用藥濃度及配比:一般配置濃度為4%~10%(質(zhì)量體積比,4-10g溶于100ml滅菌水),大小鼠用藥量為:300~500mg/kg。

  2. 戊巴比妥鈉(Pentobarbital)
  特點(diǎn):臨床上常用,隨用量而產(chǎn)生鎮(zhèn)靜、催眠和抗驚厥效應(yīng),大劑量時(shí)則產(chǎn)生麻醉作用,常作為有效的鎮(zhèn)靜和麻醉劑。但它沒有鎮(zhèn)痛作用只有鎮(zhèn)靜作用,因此手術(shù)前配合鎮(zhèn)痛劑使用效果會(huì)更好;
  推薦用藥濃度及配比:一般配置濃度為1%~3%,大小鼠用藥量為:40~70mg/kg。

  3. 阿佛?。ˋvertin)
  特點(diǎn):阿佛丁學(xué)名三溴乙醇,曾被推薦作為轉(zhuǎn)基因鼠傳代有關(guān)的外科手術(shù)(如胚胎移植和輸精管切除術(shù))的麻醉劑;但配制較繁瑣,保質(zhì)期較短,保存時(shí)要防菌;      推薦用藥濃度及配比:一般配置濃度為1.2%-2.5%(100%濃儲(chǔ)液是10g阿佛丁與10mL 叔戊醇混合,使用時(shí)加滅菌蒸餾水稀釋至1.2%-2.5%,4℃冷藏可保存2周;大小鼠用藥量為:125~400mg/kg。

  4. 氯胺酮(Ketamine)
  特點(diǎn):一種鎮(zhèn)痛麻醉劑,注射后很快產(chǎn)生麻醉作用,使動(dòng)物進(jìn)入淺睡眠狀態(tài),麻醉的安全性相對(duì)較高;適用于各種表淺、短小手術(shù)麻醉及全身復(fù)合麻醉;
  推薦用藥濃度:大小鼠用藥量為:100~150mg/kg。

  5. 舒泰50
  一種進(jìn)口混合麻醉劑,麻醉效果非常,價(jià)格較貴


 

  如下為上述幾種麻醉劑的比較: 


 

  注:上述藥品在大小鼠中一般采用腹腔注射方式,快速吸收,見效快!注射部位宜選在腹部后1/3處略靠外側(cè)(避開肝和膀胱)
  腹腔注射模式圖(圖片來自網(wǎng)絡(luò))


 


  三、局部麻醉
  局麻是指在手術(shù)的局部麻醉或者緩解局部疼痛和瘙癢時(shí)使用,優(yōu)點(diǎn)是動(dòng)物在麻醉期間能保持清醒,對(duì)重要臟器功能干擾輕微,麻醉并發(fā)癥少,是一種較安全的麻醉方法。目前常用的局部麻醉劑有普魯卡因、利多卡因和丁卡因。如下為這三類的比較[4]:
  注:局麻一般采用浸潤麻醉方法,操作時(shí),動(dòng)物固定好后,首先在局部皮膚用皮頭針先作皮內(nèi)注射,形成橘皮樣丘疹,然后換成局部麻醉長針頭,由皮點(diǎn)進(jìn)針,放射到皮點(diǎn)周圍繼續(xù)注射,直到要求麻醉區(qū)域的皮膚都浸潤為止;可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)操作要求的深度按照皮下、筋膜、肌肉、腹膜或骨膜的順序,依次注射麻藥,以達(dá)到麻醉神經(jīng)末梢的目的。

  麻醉過程中常遇到的問題:
  1. 麻醉時(shí)需要注意什么?
  注意保溫:動(dòng)物在麻醉期間體溫易下降,可將動(dòng)物置于循環(huán)水恒溫墊上進(jìn)行保溫;
  注意觀察:使用麻醉劑過程中隨時(shí)檢查動(dòng)物的反應(yīng)情況,如隨時(shí)觀察動(dòng)物的肌張力、角膜反射、呼吸頻率、夾痛反射等指標(biāo),避免動(dòng)物出現(xiàn)死亡;
  注意給藥劑量:配制的藥液濃度要適中不可過高,以免麻醉過急造成動(dòng)物死亡;但也不能過低,以減少注入溶液的體積。除參照一般標(biāo)準(zhǔn)外,還應(yīng)考慮個(gè)體對(duì)藥物的耐受性不同,而且體重與所需劑量的關(guān)系也并不是絕對(duì)成正比的。一般說,衰弱和過胖的動(dòng)物,其單位體重所需劑量較小。

  2. 如何確認(rèn)動(dòng)物已完全麻醉?
  以小鼠為例,麻醉起效:小鼠仰臥時(shí)心跳及呼吸均勻、肌肉松弛、四肢無活動(dòng),胡須無觸碰反應(yīng),踏板反射消失,即視為達(dá)到完全麻醉狀態(tài)。若小鼠的前肢開始抖動(dòng)即判定為開始復(fù)蘇。手術(shù)過程中如果發(fā)現(xiàn)動(dòng)物抽搐、排尿,說明麻醉過深,應(yīng)立即進(jìn)行急救。

  3. 若小鼠出現(xiàn)復(fù)蘇跡象怎么辦?
  若實(shí)驗(yàn)還沒有完成,小鼠接近蘇醒,需及時(shí)將麻醉瓶(氣麻)放在動(dòng)物口、鼻處,給予輔助吸入麻醉或可臨時(shí)適當(dāng)補(bǔ)加麻醉劑,一般每次補(bǔ)加劑量不超過注射總量的1/10?1/5。

  4. 給藥方式一般除了腹腔注射還有哪些?
  非吸入麻醉常采用的注射方法有:靜脈注射,肌肉注射,腹腔注射等。靜脈與肌肉注射多用于較大的動(dòng)物,如犬、貓、豬、犬等;靜脈注射的部位多是耳緣靜脈(家兔、貓、豬)、后肢靜脈(犬)及尾靜脈(大、小鼠);肌肉注射的部位多選用臀部。腹腔注射多用于較小的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,如大鼠、小鼠、沙鼠、豚鼠等。

 ?。? 吸入式麻醉和注射式麻醉如何選擇?
  吸入麻醉的優(yōu)缺點(diǎn):較好的控制麻醉深度,快速進(jìn)入麻醉狀態(tài),蘇醒迅速、平穩(wěn),對(duì)肝、腎功能影響輕微;但揮發(fā)性麻醉藥被人體長期吸入后會(huì)對(duì)醫(yī)護(hù)人員造成身體上的傷害,且每種揮發(fā)性麻醉藥的揮發(fā)罐的價(jià)格昂貴。

  非吸入麻醉的優(yōu)缺點(diǎn):操作簡(jiǎn)便,無需特殊的麻醉裝置,與吸入麻醉相比成本較低。但不能靈活掌握用藥的劑量、麻醉深度以及麻醉維持時(shí)間,且麻醉藥物需要通過肝臟代謝,腎臟排出,因此相比之下對(duì)肝臟和腎臟的影響較大。

  總之,吸入麻醉麻醉藥安全性高,副作用低,安全可控;相比之下非吸入麻醉藥對(duì)呼吸、心率及血氧飽和度等指標(biāo)影響較大,因此安全性相對(duì)較低。在臨床上如果條件允許,吸入麻醉是最理想的選擇。

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