麻醉的基本知識
麻醉（Anesthesia）：從愛護(hù)動物的觀點出發(fā)，為減輕其實驗痛苦，利用物理或化學(xué)的方法，使動物的全身或局部暫時失去痛覺或痛覺遲鈍，減少動物的掙扎和保持安靜，以保證實驗操作的進(jìn)行。
麻醉的分類：根據(jù)麻醉范圍主要分為全身麻醉和局部麻醉，全身麻醉又分為吸入麻醉和非吸入麻醉。
1. 全身麻醉：
吸入麻醉：又稱為氣麻，將揮發(fā)性或氣體麻醉劑，由動物呼吸道吸入體內(nèi)而產(chǎn)生麻醉效果；大小鼠實驗中常用乙醚異氟烷、七氟烷等麻醉劑；
非吸入麻醉：即注射麻醉，包括肌肉、腹腔、靜脈注射，大小鼠實驗中常用阿佛丁、戊巴比妥鈉、水合氯醛和氯胺酮等麻醉劑。
2. 局部麻醉：指通過麻醉藥阻斷機(jī)體某一部分的感覺神經(jīng)傳導(dǎo)功能，而運動神經(jīng)傳導(dǎo)保持完好或同時有程度不等的被阻滯狀態(tài)。
下面就介紹幾種常見的麻醉劑的使用方法：
一、吸入式麻醉
起效快，恢復(fù)也快，且麻醉的深度和維持時間易控制，被認(rèn)為是嚙齒類動物最可靠的麻醉方式。我們下面主要介紹2種常見的麻醉劑——異氟烷和乙醚。
1. 乙醚(Diethyl ether）
特點：為高度易揮發(fā)性液體，被吸收后會廣泛抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)，操作簡單，見效快；
操作方式：將被乙醚浸濕的消毒脫脂棉球或紗布放入燒杯（常用1000ml）內(nèi)，將實驗動物放入，用塑料薄膜封口，觀察，會發(fā)現(xiàn)動物先開始興奮，繼而出現(xiàn)抑制，自行倒下。若實驗時間過長，可將動物固定在實驗臺上，將含有乙醚的棉球靠近其鼻部，保持吸入狀態(tài)；
缺點：但其對呼吸系統(tǒng)有刺激性，可增加呼吸道分泌物；若麻醉過深，可導(dǎo)致動物死亡；由于其會對實驗動物有害，且可能造成的操作人員危險等原因，目前使用相對較少[1]。
適用實驗：由于起效和維持時間短，僅5-10min，主要用于短時間的淺麻實驗，如大鼠眼眶取血等簡單實驗。
2. 異氟烷 (Isoflurane)
特點：異氟烷為無色的澄明液體，易揮發(fā)，具有輕微氣味；誘導(dǎo)和復(fù)蘇均較快，加上不會影響動物的生理指標(biāo)，在動物實驗中的應(yīng)用日趨廣泛；
操作方式：一般使用時會配專用的吸入麻醉機(jī)，混合純氧進(jìn)行麻醉，通過氧氣氣流使異氟烷揮發(fā)，誘導(dǎo)麻醉一般使用2~3%的濃度，維持使用1.5~2%。一般在麻醉機(jī)連接一個麻醉罐子，如果單獨維持麻醉操作就使用面罩比較合適。一般小鼠的麻醉時間為2~3min，大鼠的麻醉時間為4~5min；
異氟烷及其使用裝置（圖片來自網(wǎng)路）
適用實驗：研究表明，異氟烷麻醉能維持動物的心率、血氧分壓、血液pH等生理功能處于穩(wěn)定狀態(tài)[2]，適合情況復(fù)雜且持續(xù)時間較長的動物實驗[3]，包括連續(xù)監(jiān)測動物參數(shù)變化如成像技術(shù)、還有一些其他全麻藥不宜使用的疾病，例如癲癇、顱內(nèi)壓增高、重癥肌無力、糖尿病等。
二、注射式麻醉
一種既簡單方便，又能使動物很快進(jìn)入麻醉期，而無明顯興奮期的方法。水合氯醛、戊巴比妥鈉、阿佛丁和氯胺酮是目前大小鼠實驗中最常用的注射類麻醉劑。
1. 水合氯醛（Chloral hydrate）
特點：有效的鎮(zhèn)靜催眠藥，但本品麻醉劑量與中毒量很接近，所以安全范圍小，使用時要注意；另外對皮膚和黏膜有較強(qiáng)的刺激作用；
推薦用藥濃度及配比：一般配置濃度為4%~10%（質(zhì)量體積比，4-10g溶于100ml滅菌水），大小鼠用藥量為：300~500mg/kg。
2. 戊巴比妥鈉（Pentobarbital）
特點：臨床上常用，隨用量而產(chǎn)生鎮(zhèn)靜、催眠和抗驚厥效應(yīng)，大劑量時則產(chǎn)生麻醉作用，常作為有效的鎮(zhèn)靜和麻醉劑。但它沒有鎮(zhèn)痛作用只有鎮(zhèn)靜作用，因此手術(shù)前配合鎮(zhèn)痛劑使用效果會更好；
推薦用藥濃度及配比：一般配置濃度為1%~3%，大小鼠用藥量為：40~70mg/kg。
3. 阿佛?。ˋvertin）
特點：阿佛丁學(xué)名三溴乙醇，曾被推薦作為轉(zhuǎn)基因鼠傳代有關(guān)的外科手術(shù)(如胚胎移植和輸精管切除術(shù))的麻醉劑；但配制較繁瑣，保質(zhì)期較短，保存時要防菌；
推薦用藥濃度及配比：一般配置濃度為1.2%-2.5%（100%濃儲液是10g阿佛丁與10mL 叔戊醇混合，使用時加滅菌蒸餾水稀釋至1.2%-2.5%，4℃冷藏可保存2周；大小鼠用藥量為：125~400mg/kg。
4. 氯胺酮（Ketamine）
特點：一種鎮(zhèn)痛麻醉劑，注射后很快產(chǎn)生麻醉作用，使動物進(jìn)入淺睡眠狀態(tài)，麻醉的安全性相對較高；適用于各種表淺、短小手術(shù)麻醉及全身復(fù)合麻醉；
推薦用藥濃度：大小鼠用藥量為：100~150mg/kg。
5. 舒泰50
一種進(jìn)口混合麻醉劑，麻醉效果非常，價格較貴
如下為上述幾種麻醉劑的比較：
注：上述藥品在大小鼠中一般采用腹腔注射方式，快速吸收，見效快！注射部位宜選在腹部后1/3處略靠外側(cè)（避開肝和膀胱）
腹腔注射模式圖（圖片來自網(wǎng)絡(luò)）
三、局部麻醉
局麻是指在手術(shù)的局部麻醉或者緩解局部疼痛和瘙癢時使用，優(yōu)點是動物在麻醉期間能保持清醒，對重要臟器功能干擾輕微，麻醉并發(fā)癥少，是一種較安全的麻醉方法。目前常用的局部麻醉劑有普魯卡因、利多卡因和丁卡因。如下為這三類的比較[4]：
注：局麻一般采用浸潤麻醉方法，操作時，動物固定好后，首先在局部皮膚用皮頭針先作皮內(nèi)注射，形成橘皮樣丘疹，然后換成局部麻醉長針頭，由皮點進(jìn)針，放射到皮點周圍繼續(xù)注射，直到要求麻醉區(qū)域的皮膚都浸潤為止；可以根據(jù)實驗操作要求的深度按照皮下、筋膜、肌肉、腹膜或骨膜的順序，依次注射麻藥，以達(dá)到麻醉神經(jīng)末梢的目的。
麻醉過程中常遇到的問題：
1. 麻醉時需要注意什么？
注意保溫：動物在麻醉期間體溫易下降，可將動物置于循環(huán)水恒溫墊上進(jìn)行保溫；
注意觀察：使用麻醉劑過程中隨時檢查動物的反應(yīng)情況，如隨時觀察動物的肌張力、角膜反射、呼吸頻率、夾痛反射等指標(biāo)，避免動物出現(xiàn)死亡；
注意給藥劑量：配制的藥液濃度要適中不可過高，以免麻醉過急造成動物死亡；但也不能過低，以減少注入溶液的體積。除參照一般標(biāo)準(zhǔn)外，還應(yīng)考慮個體對藥物的耐受性不同，而且體重與所需劑量的關(guān)系也并不是絕對成正比的。一般說，衰弱和過胖的動物，其單位體重所需劑量較小。
2. 如何確認(rèn)動物已完全麻醉？
以小鼠為例，麻醉起效：小鼠仰臥時心跳及呼吸均勻、肌肉松弛、四肢無活動，胡須無觸碰反應(yīng)，踏板反射消失，即視為達(dá)到完全麻醉狀態(tài)。若小鼠的前肢開始抖動即判定為開始復(fù)蘇。手術(shù)過程中如果發(fā)現(xiàn)動物抽搐、排尿，說明麻醉過深，應(yīng)立即進(jìn)行急救。
3. 若小鼠出現(xiàn)復(fù)蘇跡象怎么辦？
若實驗還沒有完成，小鼠接近蘇醒，需及時將麻醉瓶（氣麻）放在動物口、鼻處，給予輔助吸入麻醉或可臨時適當(dāng)補加麻醉劑，一般每次補加劑量不超過注射總量的1/10～1/5。
４. 給藥方式一般除了腹腔注射還有哪些？
非吸入麻醉常采用的注射方法有：靜脈注射，肌肉注射，腹腔注射等。靜脈與肌肉注射多用于較大的動物，如犬、貓、豬、犬等；靜脈注射的部位多是耳緣靜脈（家兔、貓、豬）、后肢靜脈（犬）及尾靜脈（大、小鼠）；肌肉注射的部位多選用臀部。腹腔注射多用于較小的實驗動物，如大鼠、小鼠、沙鼠、豚鼠等。
５. 吸入式麻醉和注射式麻醉如何選擇？
吸入麻醉的優(yōu)缺點:較好的控制麻醉深度，快速進(jìn)入麻醉狀態(tài)，蘇醒迅速、平穩(wěn)，對肝、腎功能影響輕微；但揮發(fā)性麻醉藥被人體長期吸入后會對醫(yī)護(hù)人員造成身體上的傷害，且每種揮發(fā)性麻醉藥的揮發(fā)罐的價格昂貴。
非吸入麻醉的優(yōu)缺點：操作簡便，無需特殊的麻醉裝置，與吸入麻醉相比成本較低。但不能靈活掌握用藥的劑量、麻醉深度以及麻醉維持時間，且麻醉藥物需要通過肝臟代謝，腎臟排出，因此相比之下對肝臟和腎臟的影響較大。
總之，吸入麻醉麻醉藥安全性高，副作用低，安全可控；相比之下非吸入麻醉藥對呼吸、心率及血氧飽和度等指標(biāo)影響較大，因此安全性相對較低。在臨床上如果條件允許，吸入麻醉是最理想的選擇。
參考文獻(xiàn)
[1] Ruizmeana M, Martinson E A, Garciadorado D, et al. Animal ethics in Cardiovascular Research[J]. Cardiovascular Research, 2012, 93(1): 1-3.
[2] Low L A, Bauer L C, Klaunberg B A, et al. Comparing the Effects of Isoflurane and Alpha Chloralose upon Mouse Physiology.[J]. PLOS ONE, 2016, 11(5).
[3]王洋，陳克研，張賀，等．丙泊酚靜脈麻醉與異氟醚吸入麻醉在巴馬小型豬實驗中的比較［J］．中國比較醫(yī)學(xué)雜志，2012，22( 7).
[4]湯宏斌.《實驗動物學(xué)》（第三版）[M]. 湖北人民出版社，2016.
[5]李 丹，郭玉瑩，鄧 昊，高 珊，徐士欣. 實驗動物麻醉劑使用的福利倫理問題研究進(jìn)展［J］. 中國比較醫(yī)學(xué)雜志2017, 27( 9).
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