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中國(guó)市場(chǎng)艾滋病檢測(cè)四類主流方法學(xué)及相應(yīng)廠家匯總！

2019.08.09

人類免疫缺陷病毒HIV感染導(dǎo)致艾滋病AIDS目前還沒(méi)有疫苗可以預(yù)防，也沒(méi)有治愈這種疾病的有效藥物或方法。目前，艾滋病仍是威脅我國(guó)公眾健康的重要公共衛(wèi)生問(wèn)題。

截止至2018年年底，中國(guó)存活艾滋病感染者約125萬(wàn)，其中近30%對(duì)自身患病不知情。2018年新發(fā)記錄感染64170人，死亡18780人。聯(lián)合國(guó)艾滋病規(guī)劃署提出在2020年實(shí)現(xiàn)90%感染者通過(guò)檢測(cè)知曉感染狀況。由2018年的衛(wèi)健委統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，我國(guó)還有30%，近40W感染者不知其感染狀況，任務(wù)十分艱巨，市場(chǎng)也很巨大。今天小編帶大家了解下HIV診斷技術(shù)、生產(chǎn)企業(yè)及產(chǎn)品。

免疫層析法

近幾年國(guó)外興起的一種快速診斷技術(shù)，其原理是將特異的抗體先固定于硝酸纖維素膜的某一區(qū)帶，當(dāng)該干燥的硝酸纖維素一端浸入樣品(尿液或血清)后，由于毛細(xì)管作用，樣品將沿著該膜向前移動(dòng)，當(dāng)移動(dòng)至固定有抗體的區(qū)域時(shí)，樣品中相應(yīng)的抗原即與該抗體發(fā)生特異性結(jié)合，若用免疫膠體金或免疫酶染色可使該區(qū)域顯示一定的顏色，從而實(shí)現(xiàn)特異性的免疫診斷。

目前市面上使用較多的快檢平臺(tái)主要是免疫層析法（LFA），即試紙條。試紙條是目前應(yīng)用很廣的快速檢測(cè)平臺(tái)。廣泛應(yīng)用于孕檢、HIV等的快速診斷。其示意圖如下所示：

試紙條的制備非常簡(jiǎn)單，檢測(cè)時(shí)間也很快，是目前HIV篩查最常用的方法。但該法容易出現(xiàn)假陽(yáng)性或者漏檢。目前最新的方法是采用熒光物質(zhì)等進(jìn)行信號(hào)標(biāo)記，使用便攜式的熒光閱讀儀實(shí)現(xiàn)半定量或者定量檢測(cè)。

部分代表產(chǎn)品：

Western 印記（蛋白印跡法）

將獲得的蛋白質(zhì)樣品通過(guò)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳，對(duì)不同分子量的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離，然后通過(guò)轉(zhuǎn)移電泳將凝膠上分離到的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印到固相支持物上。免疫印跡法是確認(rèn)HIV感染的金標(biāo)準(zhǔn)，其具有很高的特異性。嚴(yán)格來(lái)說(shuō)所有的HIV感染確認(rèn)都應(yīng)該做這個(gè)實(shí)驗(yàn)。原理如圖所示：

部分代表產(chǎn)品：

反轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR）

又稱為逆轉(zhuǎn)錄PCR，提取組織或細(xì)胞中的總RNA，以其中的mRNA作為模板，采用Oligo(dT)或隨機(jī)引物利用逆轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄成cDNA。再以cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，而獲得目的基因或檢測(cè)基因表達(dá)。

簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)，在RT-PCR中，一條RNA鏈被逆轉(zhuǎn)錄成為互補(bǔ)DNA，再以此為模板通過(guò)PCR進(jìn)行DNA復(fù)制。其有一步法和兩步法之別，區(qū)別在于是否在同一個(gè)緩沖鹽和酶體系中進(jìn)行。其反應(yīng)原理如圖所示：

部分代表產(chǎn)品：

酶聯(lián)免疫/化學(xué)發(fā)光/時(shí)間分辨熒光

先說(shuō)一下酶聯(lián)免疫（ELISA），本質(zhì)上酶聯(lián)免疫和化學(xué)發(fā)光類似，最大的不同在于其屬于異相免疫測(cè)試，在反應(yīng)速度，效率，靈敏度等有所缺陷。

時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定（TRFIA）是以鑭系元素標(biāo)記抗原或抗體，并與時(shí)間分辨測(cè)定技術(shù)結(jié)合而建立起來(lái)的一種新型非放射性微量免疫分析技術(shù)，它根據(jù)鑭系元素螯合物的發(fā)光特點(diǎn)，用時(shí)間分辨技術(shù)測(cè)量熒光，同時(shí)檢測(cè)波長(zhǎng)和時(shí)間兩個(gè)參數(shù)進(jìn)行信號(hào)分辨，可有效地排除非特異熒光的干擾，極大地提高了分析靈敏度。

部分代表產(chǎn)品：

HIV生產(chǎn)企業(yè)名單匯總

來(lái)源：體外診斷網(wǎng)

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