作者：呂秀齊
在大自然這個天然實驗室里，病毒無處不在，并不斷進化，不知什么時候就會跳出來危害一下人類。人類對付病毒，首先要識別它，抓住它。
相比于細菌等微生物，病毒要小的多，一般只有50-100納米，高倍的電子顯微鏡，也不容易看請它們的真面貌。但借助于分子生物學的檢測手段，對它們進行尋蹤早已不是難事。
嚴格來講，病毒并不算是真正的生命，它們沒有細胞結構，離開生命體不能自我復制，但具有復制生命所必須的核酸。人類不僅搞清了核酸這種特殊生命大分子的結構，及其在體內的作用方式，也掌握了在體外對核酸進行復制增殖操作的一些高超本領。
每種生命都包含不一樣的遺傳大分子，即核酸，或DNA, 或RNA，抓住了特異的核酸，就抓住了病毒。微量核酸抓著費勁，但借助復制它的神器，問題就容易解決了。
COVID-19疫情爆發(fā)，伴隨核酸檢測這個反復出現(xiàn)的名詞和實際發(fā)生的事實，RT-PCR、qPCR這些專業(yè)術語也更多出現(xiàn)在公眾的視野中?？赡苡斜匾晕⒆餍┝私?，消除一些誤解。
學過相關專業(yè)知識的，PCR（聚合酶鏈式擴增反應）都不陌生，但對于普通人肯定不好理解，聽名字就夠難記的。其實也沒有必要了解太多，記住擴增兩個字就可以了，還有，這個過程需要一些特殊條件和酶的參與。
提起PCR這個技術，腦海中就會閃現(xiàn)“變性、退火、延伸”這些名詞，以及相關畫面。變性-退火-延伸也正是描述核酸體外擴增的基本過程。雙鏈的DNA高溫（93攝氏度）下變性，解鏈成單鏈，目的是讓其與互補的引物DNA結合，退火（溫度降到55攝氏度）后，模板DNA與引物根據堿基配對原則進行雜交。后邊的延伸過程簡單來說，就是在DNA聚合酶和中間反應原料（dNTP）的參與和稍高溫度下，實現(xiàn)DNA連續(xù)的半保留復制。整個溫度和酶控的過程，現(xiàn)在都可以由儀器自動完成，操作起來比較方便。
新冠病毒屬于單鏈RNA病毒，不穩(wěn)定，需要通過逆轉錄酶，以RNA為模板合成cDNA（從RNA到DNA反向轉錄的DNA），然后以其為模板，擴增合成目的片段，這就是人們所說的RT-PCR核酸檢測技術（逆轉錄核酸擴增），這個技術在RNA病毒檢測上應用比較廣泛，擴增后結合探針（一段人工合成的堿基序列）熒光標記（qPCR）等，就可以準確識別靶標。
應該說，PCR技術已經不算什么新玩意兒，從上世紀八九十年代開始，技術已逐漸成熟，更好用的工具酶的不斷發(fā)現(xiàn)和篩選，加上技術的不斷改進，大面積應用也有幾十年時間。我們熟悉的親子鑒定，通過DNA比對鎖定罪犯，還有DNA考古，等等，都離不開PCR這個超級神器。抓個病毒更不在話下了。
基于PCR的核酸檢測也不是什么很新鮮的技術。但的確，只有在這次不同尋常的疫情爆發(fā)后，它才真正進入大眾的視野。
涉及大量人群的病毒病源學檢測，使得核酸檢測這幾個字不斷深入人心。病毒核酸，陰性還是陽性，希望和失望，從來沒有像今天這樣牽動著人們的神經。記得2003年SARS時，媒體并沒怎么提到需要通過核酸檢測作為確診依據，主要原因是SARS的癥狀比較典型，通過臨床癥狀和影像學檢查，基本就可以定性，不需要借助病源學檢測這個武器。關鍵是，SARS沒有這么多隱形感染者。
追蹤病毒的還有另一種方式，即血清免疫學檢查，需要采血測抗體，主要看以往感染的情況，結果的不確定性相對復雜，抗體產生的滯后，也需要發(fā)病后一段時間才能檢測到。核酸檢測看起來相對單純，只要能搞到含有病毒核酸的微量樣本，只要是合格的試劑，規(guī)范的操作，抓住病毒的概率就應該比較高，所以，利用RT-PCR技術進行病毒核酸檢測，特異性應該沒有大問題（不需要整個的核酸，只需要其中一個片段，即靶標，就可以了）。至于靈敏性保證，看具體情況。
人們普遍關心假陰性的產生，一方面與樣品受限有關（沒有取到有病毒或者病毒載量過低的組織樣本），或者試劑不太合格，靈敏度低，如造成逆轉錄的起始DNA含量太低。還有人提出，如果病毒變異了，正好涉及那段靶標，也可能檢測不出來，但我覺得這種可能性不大。據知情人講，我們的檢測試劑有很多種，大多數是靠得住的。不合格的試劑能隨便上市應用嗎？估計很快被淘汰了。
當然，通過核酸檢測可以確認病毒的存在，至于它是不是活著（具有感染力），還無法判斷。所以要結合臨床癥狀和其他檢查來確定。
COVID-19，較多的無癥狀和不典型癥狀人群的存在，真的讓核酸檢測在疫情防控和患者確診中發(fā)揮了史無前例的作用。如果沒有核酸檢測這個武器，無法及時篩查到感染人群，不能采取有效干預手段，結果可想而知。
人類科技的進步，總會在對抗疾病，對抗自然界敵人入侵中發(fā)揮越來越重要的作用。相信科學，依靠科學，我們一定可以找到更多與大自然抗衡的有力武器，當然，我發(fā)自內心的想法是，最好，我們能找到更多方法，與大自然和諧相處，不要有太多的殺戮。我們能做到嗎？
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