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BSP實驗原理：

    BSP克隆測序法，是目前甲基化檢測的金標(biāo)準(zhǔn)。用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA，所有未發(fā)生甲基化的胞嘧啶被轉(zhuǎn)化為尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不變；隨后再CpG島兩端設(shè)計引物進(jìn)行PCR，將目的產(chǎn)物純化后進(jìn)行TA克隆，每個克隆挑取陽性克隆測序，最后將測得的序列與原始序列比對，統(tǒng)計甲基化位點及數(shù)量，并分析甲基化程度。

 BSP實驗流程：

優(yōu)點：

    1、克服了MSP只能作定性研究，可做定量研究；

    2、敏感性高，待測DNA中5-甲基胞嘧啶分布極不均衡也可檢測；

    3、引物設(shè)計相對簡單。

缺點：

    1、價格高。

送樣要求：
    1、組織樣本：-20℃或-80℃低溫冰箱中保存，液氮或者干冰運輸；市內(nèi)或短途運輸可冰袋運輸。若提供的材料為新鮮組織、血液細(xì)胞等生物材料，請?zhí)峁┳銐蛱崛?ug以上基因DNA的材料量。
    2、DNA樣本：體積≥20ul，濃度≥100ng/ul，DNA總量≥2ug，20℃保存，低溫冰袋運輸。
    3、血液樣本：要求保存于抗凝管中或凍存管中，體積大于2ml，請用干冰運送，保證DNA不降解。
    4、樣品為石蠟包埋組織切片的，要求提供10張組織切片光片（面積>10mm×10mm,厚度約5-10um）。