中文名稱(chēng):AFC修飾多肽：Ac-Ile-Glu-Pro-Asp-7-氨基-4-三氟甲基香豆素
英文名:Ac-Ile-Glu-Pro-Asp-AFC
CAS號(hào):1135417-31-0
單字母:Ac-IEPD-AFC
氨基酸個(gè)數(shù):4
分子式:C32H38O11N4F3
平均分子量:711.66
精確分子量:711.25
等電點(diǎn)(PI):-
pH=7.0時(shí)的凈電荷數(shù):-2
平均親水性:1.4
疏水性值:-1.03
鹽體系:可選TFA、HAc、HCl或其它
儲(chǔ)存條件:Please store the product under the recommended conditions in the Certificate of Analysis
Ac-IEPD-AFC 是顆粒酶 B 的底物。
Ac-IEPD-AFC is a substrate of Granzyme B[1].
多肽熒光標(biāo)記由于沒(méi)有放射性，實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)單。因此，目前在生物學(xué)研究中多肽熒光標(biāo)記應(yīng)用非常廣泛，多肽熒光標(biāo)記方法與熒光試劑的結(jié)構(gòu)有關(guān)系，對(duì)于有游離羧基的采用的方法與接多肽反應(yīng)相同，也采用HBTU/HOBt/DIEA方法連接。在N端標(biāo)記FITC的多肽需經(jīng)歷環(huán)化作用來(lái)形成熒光素，通常會(huì)伴有最后一個(gè)氨基酸的去除，但當(dāng)有一個(gè)間隔器如氨基己酸，或者是通過(guò)非酸性環(huán)境將目的多肽從樹(shù)脂上切下來(lái)時(shí)，這種情況可避免在切割的過(guò)程中被TFA切割掉。
人們利用利用熒光標(biāo)記的多肽來(lái)檢測(cè)目標(biāo)蛋白的活性，并將 其發(fā)展的高通量活性篩選方法應(yīng)用于疾病治療靶點(diǎn)蛋白的藥物篩選和藥物開(kāi)發(fā)（例如，各種激 酶、磷酸酶、肽酶等）。
下面是一些常見(jiàn)的多肽修飾熒光物質(zhì)結(jié)構(gòu)：
FITC標(biāo)記
FITC(異硫氰酸熒光素)具有比較高的活性，可以通過(guò)兩種方式將FITC標(biāo)記于多肽 上：(1) 將FITC標(biāo)記于賴(lài)氨酸（Lys）或被選擇性地脫保護(hù)的鳥(niǎo)氨酸（ornithine）側(cè)鏈氨基 上；(2) 將FITC標(biāo)記于多肽N端氨基。
當(dāng)在N端標(biāo)記時(shí)，建議在最后一個(gè)氨基和由異硫氰酸酯與氨基反應(yīng)產(chǎn)生的硫脲鍵之間引入 烷基間隔器（alkyl spacer），如氨基己酸（Ahx）。鏈接切割需要酸性環(huán)境，在N端標(biāo)記FITC 的多肽需經(jīng)歷環(huán)化作用來(lái)形成熒光素，通常會(huì)伴有最后一個(gè)氨基酸的去除，但當(dāng)有一個(gè)間隔器 如氨基己酸，或者是通過(guò)非酸性環(huán)境將目的肽從樹(shù)脂上切下來(lái)時(shí)，這種情況可避免?？臻g位阻 被認(rèn)為是在熒光染料前使用Ahx的主要原因，而不是為什么FITC不能直接偶聯(lián)在多肽上的原因。
Ahx或b-Ala均可作為間隔器用于FITC標(biāo)記的多肽上。
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