屠呦呦重整研發(fā)的思路。她想，為何歷代名醫(yī)稱道的好藥，諸如青蒿，今日眾人試之卻無明顯的療效？她再次埋下頭去，重讀一本本中醫(yī)古籍。
一天，當(dāng)她讀到東晉葛洪撰寫的《肘后備急方》時(shí)，其中一句話猛然提醒了屠呦呦青蒿一握，水一升漬，絞取汁盡服之屠呦呦當(dāng)即就想：浸泡、絞汁？干嘛不用水煎呢？是否害怕水煎的
高溫或酶的作用，破壞了青蒿的療效？
如此一想，屠呦呦就改用將溫度控制在60°C的乙醚冷浸法處理青蒿，然后將提取物注入染有鼠瘧的小白鼠，發(fā)現(xiàn)對(duì)鼠瘧的抑制率一下子有了明顯的提高。這結(jié)果讓屠呦呦非常興奮，證明低溫提取是保障青蒿療效的一大關(guān)鍵。隨后她進(jìn)一步改用低沸點(diǎn)溶劑處理青蒿，得到的提取物療效更高更穩(wěn)。1971年10月4日，即在廣州會(huì)議后屠呦呦提取到191號(hào)（即191次實(shí)驗(yàn)）藥物樣品時(shí)，所做的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，驚人地顯示出100%的抑制率。屠呦呦和她的科研組小組欣喜若狂。因?yàn)檫@意味著青蒿的提取物統(tǒng)統(tǒng)地殺死了鼠瘧原蟲，那它極可能也是人瘧原蟲的克星（注：鼠瘧和人瘧分屬不同的瘧疾原蟲）。
藥物的實(shí)驗(yàn)必須要反復(fù)而又多方面地予以重復(fù)。當(dāng)屠呦呦取來另一批青蒿生藥再做實(shí)驗(yàn)時(shí)，不想療效卻銳減。屠呦呦不得不從生藥學(xué)的角度仔細(xì)地研究青蒿。歷經(jīng)反復(fù)實(shí)驗(yàn)，最后屠呦呦和她的科研小組發(fā)現(xiàn)青蒿藥材含抗瘧活性的部分是在新鮮的葉片里，而非根、莖部位；最佳的采摘時(shí)節(jié)是青蒿即將開花的時(shí)刻。摸到這些規(guī)律后，屠呦呦方知過去人們?yōu)槭裁蠢显谇噍锏拈T前走彎路？
隨后，屠呦呦又把青蒿提取物成功分離成中性和酸性兩大部分。后者毒性大，而且還沒有抗瘧的功能，屠呦呦除掉這一部分，由此也解決了中草藥含毒的副作用。在證實(shí)了中性部分是青蒿抗瘧的有效成分后，屠呦呦又做猴瘧的實(shí)驗(yàn)，同樣取得了理想的效果。
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