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【摘要】  目的: 比較甲苯胺紅不加熱血清試驗梅毒螺旋體抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗同步檢測無償獻血者梅毒血清的效果。方法:采用甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）和梅毒螺旋體抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗（TPELISA）對無償獻血者的血液標本20162例作篩選試驗，對兩法檢出的陽性標本用梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗（TPPA）進行確證。結(jié)果:篩選試驗中TRUST法的陽性率為0.88%（178 / 20162），TPELISA法的陽性率為1.03%（207 / 20162），兩者差異有非常顯著性 (χ2 =9.92，P<0.01)。TRUST法檢出的陽性標本中經(jīng)TPPA確認141例，確認率為87.92%（141 / 178）；TPELISA法檢出的陽性標本中經(jīng)TPPA確認195例，確認率為94.20%（195 / 207），兩者差異有非常顯著性 (χ2 =19.38，P<0.01)。54例TRUST法陰性、TPELISA法陽性標本中經(jīng)TPPA試驗確認陽性46例；25例TPELISA法陰性、TRUST法陽性標本中經(jīng)TPPA試驗確認陽性12例。結(jié)論: TPELISA法對梅毒抗體的檢出率高于TRUST法，TRUST法與TPELISA法均存在漏檢和假陽性或假陰性現(xiàn)象，兩種篩選試驗具有互補性，用此兩種方法同時對獻血者標本作篩選試驗，對于提高血液質(zhì)量、預(yù)防梅毒經(jīng)輸血傳播具有重要意義。

【關(guān)鍵詞】  供血者; 梅毒/診斷; 血清學(xué)試驗/方法

　　我國梅毒的發(fā)病率有逐年上升趨勢［1］，選用高靈敏度和高特異性的方法檢測梅毒特異性抗體，對保證血液質(zhì)量，預(yù)防梅毒經(jīng)輸血傳播顯得尤為重要。為比較甲苯胺紅不加熱血清試驗（TRUST）和梅毒螺旋體抗體酶聯(lián)免疫吸附試驗（TPELISA）對無償獻血者梅毒抗體的檢測效果，我們采用TRUST法及TPELISA法對20162例償獻血者的血液標本進行檢測，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

　　1   材料與方法

　　1.1   材料

　　1.1.1   標本   2004年1月～2004年10月無償獻血者的血液標本，共20162例。獻血者獻血前經(jīng)體檢、病史咨詢等檢查，符合獻血健康標準。

　　1.1.2   儀器   瑞士GENESIS RSP 150全自動前處理系統(tǒng)、MICROLAB FAME 全自動后處理系統(tǒng)、Heidolph振蕩儀；美國BIOTEK ELK800 型全自動酶標儀；北京DEM2型 自動酶標洗板機；江蘇TL200B型梅毒自動旋轉(zhuǎn)儀。

　　1.1.3   試劑   TRUST法試劑由上海榮盛生物技術(shù)有限公司提供；TPELISA雙抗原夾心法試劑由廈門新創(chuàng)科技有限公司提供；確認試驗梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗（TPPA）試劑由日本富士株式會社提供；梅毒質(zhì)控血清由衛(wèi)生部臨檢中心提供。所有試劑均在有效期內(nèi)使用。

　　1.2   方法

　　1.2.1   篩查試驗   采用TRUST法及TPELISA法同時對血液標本進行檢測，陽性標本進行雙孔復(fù)試，復(fù)試陽性者判為不合格標本，陰性者判為合格標本。所有不合格標本的血液作報廢處理。兩方法的所有操作嚴格按照試劑盒說明書要求進行。

　　1.2.2   確認試驗   將經(jīng)TRUST法和TPELISA法檢測陽性的標本用TPPA法進行確認。操作嚴格按照試劑盒說明書要求進行。

　　1.3   統(tǒng)計學(xué)處理 采用（配對）χ2檢驗。

　　2   結(jié)果

　　20162例血液標本中，用TRUST法檢測為陽性者有178例，陽性率為0.88%；用TPELISA法檢測為陽性者有207例，陽性率為1.03%，兩者經(jīng)配對χ2檢驗，差異有非常顯著性(P<0.01），TPELISA法的陽性率高于TRUST法。詳見表1。

　　表1   TRUST法和TPELISA法的檢測結(jié)果（略）

　　配對χ2=9.92，P<0.01TRUST法檢為陽性的178例標本中，經(jīng)TPPA試驗確認陽性141例（87.92%）；TPELISA法檢為陽性的207例標本中，經(jīng)TPPA試驗確認陽性195例（94.20%），兩者差異有非常顯著性（χ2=19.38，P<0.01）。54例TRUST法陰性、TPELISA法陽性標本中經(jīng)TPPA試驗確認陽性46例；25例TPELISA法陰性、TRUST法陽性標本中經(jīng)TPPA試驗確認陽性12例。

　　3   討論

　　梅毒是由蒼白螺旋體（treponema pallidum，TP）感染引起的可經(jīng)性傳播、母嬰垂直傳播及血液傳播的慢性傳染病，病程發(fā)展過程中可侵及人體任何器官和組織，并可產(chǎn)生特異性（TP）抗體和非特異性（NTP）抗體，特異性TP（IgM+IgG）抗體的IgM抗體要比非特異性（NTP）抗體出現(xiàn)的早［2］，且經(jīng)治療后TP抗體滴度仍然可維持相當長的時間。本文的結(jié)果顯示用TPELISA法檢測梅毒抗體的陽性率高于TRUST法（P<0.01），且經(jīng)TPPA試驗確認的確認率也高于TRUST法（P<0.01）。這是因為TPELISA雙抗原夾心法的包被反應(yīng)板采用了針對梅毒螺旋體致病的S3系列膜抗原（如TpN15、TpN17、TpN47等）感染人體后產(chǎn)生特異性的TP（IgM+IgG）抗體的基因重組螺旋體膜抗原（TpN15、TpN17和TpN47）包被和偶聯(lián)HRP，而且ELISA法還利用了酶系統(tǒng)的放大作用，所以對梅毒抗體的檢出率較高，可檢測出Ⅰ期梅毒的TPIgM抗體。TRUST法對Ⅰ期梅毒敏感性較低和梅毒治療期血清可呈陰性反應(yīng)［3］，而TPELISA法卻恰好彌補了這一缺陷，從而縮短早期梅毒的“窗口期”，大大減低了梅毒經(jīng)血液傳播的風險。TRUST法對Ⅱ期梅毒陽性檢出率100%［3］，與TPELISA法配合使用可保證對Ⅱ期梅毒的檢出率。本文結(jié)果中54例TRUST法陰性、TPELISA法陽性標本中經(jīng)TPPA試驗確認陽性46例；25例TPELISA法陰性、TRUST法陽性標本中經(jīng)TPPA試驗確認陽性12例。顯示兩種方法均存在有漏檢和假陽性或假陰性現(xiàn)象，但兩者具有很好的互補作用，可提高梅毒的檢出率和準確性。在眾多種性病中，只有梅毒與艾滋病有相同的傳播途徑。一期梅毒是生殖器潰瘍性疾病，可增加對HIV的易感性，梅毒的感染者有可能成為潛在的HIV病毒的傳播者，故提高梅毒的檢出率和準確性亦可大大減低艾滋病毒經(jīng)血液傳播的風險。確認試驗TPPA的試劑價格昂貴，不適于大規(guī)模樣本（如無償獻血人群的血液標本）的檢測。TRUST法為人工操作、判讀，在結(jié)果的判斷方面主觀性較強，容易漏判和錯判，且結(jié)果不易保存、查閱。而TPELISA法操作簡便，可自動化檢測，結(jié)果清晰，可彌補TRUST法易受人為因素影響的不足。TPELISA法的檢測結(jié)果還可輸入計算機貯存處理，有利于質(zhì)控的建立和數(shù)據(jù)的保存及管理規(guī)范化。因此，對無償獻血者的梅毒血清學(xué)檢測，可利用TPELISA和TRUST兩種方法的互補來提高梅毒的檢出率和準確性，保證血液質(zhì)量，同時也可以最大限度地避免不必要的血液資源浪費，以及消除假陽性給無償獻血者造成的精神壓力。

【參考文獻】
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