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一、 螺旋體的分類、寄生部位螺旋體的分類及傳播方式屬致病性螺旋體種類傳播方式或媒介所致疾病螺旋體脊螺旋體密螺旋體梅毒螺旋體性傳播梅毒雅司螺旋體皮膚損傷雅司病品他螺旋體皮膚損傷品他病地方性螺旋體粘膜損傷地方性梅毒疏螺旋體伯氏疏螺旋體硬蜱萊姆病回歸熱螺旋體體虱流行性回歸熱赫姆疏螺旋體軟蜱地方性回歸熱奮森疏螺旋體機會感染多種口腔感染鉤端螺旋體問號鉤端螺旋體皮膚粘膜鉤端螺旋體病細絲體短螺旋體小蛇形螺旋體二、 生物學特性梅毒螺旋體即蒼白密螺旋體的蒼白亞種，人是其唯一宿主。直徑0.1—0.15μm，全長7--8μm。在電鏡下可見有細胞壁和細胞膜。新鮮標本在暗視野顯微鏡下可觀察其形態(tài)和活潑的運動方式。梅毒螺旋體主要有兩種抗原：1、密螺旋體抗原即梅毒螺旋體表面的特異抗原，與雅司、地方性梅毒、品他病等3種密螺旋體有共同抗原，可交叉反應。2、非螺旋體抗原即磷脂類抗原，可刺激機體產生反應素，其與牛心肌的心脂質抗原發(fā)生反應，此法敏感性高，但有假陽性。梅毒螺旋體對外界的抵抗力極弱，離體后1—2小時即死亡，對熱和干燥特別敏感，在體外干燥環(huán)境下1—2小時或加1.5℃經1小即死亡。血液中4℃放置3天可死亡，因此4℃血庫存放3天以上的血液無傳染梅毒的危險。對肥皂水和常用化學消毒劑亦敏感，1%--2%石炭酸內數分鐘就死亡。梅毒的免疫屬感染性免疫，有梅毒螺旋體感染時才有免疫力，一旦螺旋體被殺滅，其免疫力隨之消失。機體對梅毒螺旋體感染可產生細胞免疫和體液免疫反應，體液免疫中有兩種抗體：一種是梅毒特異性抗體，主要是IgG、IgM，對螺旋體有制動作用，當有補體存在時，可將其殺死和溶解，對機體的再感染有保護作用。另一種是抗脂質抗體的反應素，為IgG和IgM的混合物，對機體無保護作用。三、 送檢標本和檢驗方法Ⅰ期梅毒病人取硬下疳滲出液，Ⅱ期梅毒取梅毒疹滲出液或局部淋巴抽出液。對Ⅰ期梅毒末期以后（大約感染3—4周以后）的病人可分離血清檢查有無梅毒螺旋體抗體和反應素。檢驗方法：1、 顯微鏡鏡檢 滲出液涂片后可直接用暗視野顯微鏡檢。直接鏡檢適合ⅠⅡ期梅毒的檢查。（現已經不常用）2、 血清學試驗 包括非螺旋體抗體和密螺旋體抗體兩類1） 非螺旋體抗體試驗（NtrAT） 用正常牛心肌脂質作為抗原，測定病人血清中的反應素。均為初篩試驗。2） 密螺旋體抗體試驗（TrAT） 采用Nichols株梅毒螺旋體作為抗原，測定血清中梅毒螺旋體特異抗體，特異性強，可用作梅毒證實試驗。試驗方法分類類型試驗名稱NtrAT（測抗類脂抗體）VDRL（性病研究實驗室試驗）RPR（快速血漿反應素試驗）TRUST（甲苯胺紅不加熱血清試驗）USR（不加熱血清反應素試驗）TrAT（測抗T.pallidum抗體）TPHA（梅毒螺旋體血凝試驗）TPPA（梅毒螺旋體明膠凝集試驗）TP- ELISA（酶聯免疫法）FTA-ABS（熒光密螺旋體抗體吸收試驗）WB（免疫印跡試驗）金標記免疫層析法四、 方法學比較1. 非螺旋體抗體試驗（NtrAT） 這類方法敏感性高，其抗體滴度與病變活動性有關，病灶出現后1-2周就可測出反應素，Ⅰ期梅毒陽性率約為70%，Ⅱ期梅毒陽性率可達100%，Ⅲ期梅毒陽性率較低，先天性梅毒陽性率可達80%-100%，但此類試驗特異性不高，常有假陽性反應。因此，在分析結果時應結合病史和臨床癥狀，并做密螺旋體抗原試驗加以確診。2. 密螺旋體抗體試驗（TrAT）1） TPHA（梅毒螺旋體血凝試驗） 是一種間接血凝試驗，以SRBC為載體，將梅毒螺旋體Nichols株，經純化后超聲擊碎成密螺旋體抗原，致敏SRBC，加入待檢病人血清作間接血凝試驗，具有敏感性高，快速，簡便，易于觀察等特點。2） TPPA（梅毒螺旋體明膠凝集試驗）與TPHA基本相同。3） WB（免疫印跡試驗） 是分子水平的試驗，本法綜合了SDS-PAGE的高分辯力和ELISA的高特異性和敏感性，對梅毒的確診，尤其對早期梅毒的確診具有特殊的價值，對二期，三期梅毒的診斷率很高。4） FTA-ABS（熒光密螺旋體抗體吸收試驗）為間接熒光抗體檢測法。本法敏感性和特異性均高，是Ⅰ期，Ⅱ期梅毒首先出現陽性反應的血清學試驗，且病人經藥物治療后，反應仍不轉陰，可用于確診但不能用作療效評價。密螺旋體抗原試驗的特異性雖強，但仍不能區(qū)分雅司、地方性梅毒、品他病，也可有1%生物學假陽性存在。因此，這些試驗的結果的判定，仍需結合臨床資料來分析。梅毒血清學試驗假陽性的原因原因非密螺旋體抗體試驗(NTrAT)密螺旋體抗體試驗(TrAT)自身免疫病瘧疾新近免疫接種皮膚病心血管病結核麻風靜脈注射毒品病毒感染熱性病妊娠HIV感染其他性傳播病老年人多次輸血萊娒病地方性密螺旋體病原因不明技術誤差＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋－＋－＋＋＋＋－－＋＋－＋－－＋－－－＋－＋＋＋＋根據后附論文“梅毒實驗室診斷及評價”的資料顯示RPR陽性率為94.2%，TRUST陽性率為93.0%, 4種非特異性檢測方法敏感性均在95%左右。雖然從數據中看到用進口RPR試劑在對照血清組有10例的假陽性（占8.7%），看似較高。但其準確性也有91.22%，也是令人較滿意的試劑。國產的RPR和TRUST在各項指標上的差異無統(tǒng)計學意義。因TRUST有操作簡單，用時短，結果容易觀察等特點被臨床實驗室廣范的接受（衛(wèi)生部門推存用RPR或VDRL）。RPR、TRUST試劑對不同血清標本的檢測結果組別例數RPR（進口）RPR（國產）TRUST 1TRUST2＋－＋－＋－＋－對照血清11410104211221122112Ⅰ期梅毒血清26224224224224Ⅱ期梅毒血清32320320320320Ⅲ期梅毒血清660606060不明期梅毒血清中存檢22211202202202TPPA法對梅毒患者診斷敏感性為83.72%,TP-ELlSA法敏感性為87.21%,WB法敏感性為100%。3種特異性抗體檢測法特異性均為100%（即假陽性率為0%）。在三種方法的對比中可以看出WB法是最好的，但其操作復雜費時，對實驗設備和實驗條件要求較高等客觀條件約束，因此在臨床實驗室中運用較少。3種特異性抗體檢測方法對不同血清標本的檢測結果標本份數TPPAELISAWB法＋－＋－＋－對照血清114011401140114Ⅰ期梅毒血清261971610260Ⅱ期梅毒血清32275320320Ⅲ期梅毒血清6606060不明期梅毒血清中存檢22202211220五、 梅毒螺旋體實驗指標的臨床應用對這些實驗指標的臨床應用中常會出現以下情況：1）單獨用篩查試驗（如：RPR試驗、TRUST試驗等非密螺旋體抗體試驗）進行梅毒的診斷。2）認為篩查試驗不好，沒有臨床應用價值，就在臨床實踐中丟棄它。3）只做確診試驗（密螺旋體抗體試驗：TPPA,TPHA，TP- ELISA等），陽性一定就是梅毒現癥感染。目前，RPR試驗和TRUST試驗主要用于梅毒患者的篩查，雖然對梅毒的診斷缺乏特異性，但其在確診后對治療的療效判定有重要意義。只要了解其造成假陽性的原因，結合病歷資料分析，就能盡可能的減少假陽性造成的不良后果。常用的梅毒特異性抗體檢測方法是傳統(tǒng)經典的TPPA,TPHA, TP- ELISA，FTA-ABS方法，只做特異性抗體檢測無法確定是否現癥感染。對于梅毒的確診需同時做NtrAT和 TrAT兩種檢測，并結合臨床表現綜合判斷。篩選試驗和確診試驗實驗結果解釋如下：實驗結果意義NTrAT＋TrAT－NtrAT假陽性NTrAT＋TrAT＋現癥梅毒；治愈的晚期梅毒NtrAT－TrAT＋極早期梅毒；治愈后的梅毒NtrAT－TrAT－排除梅毒感染；極早期梅毒；AIDS合并梅毒現在在梅毒的實驗室診斷方面已經比較成熟。我們實驗室針對梅毒的實驗室診斷運用了三種試驗方法（TRUST、TPPA、RPR）。只有根據實驗特點、臨床需要來選擇試驗方法，才能充分發(fā)揮其優(yōu)勢。為臨床診斷提供有力證據。