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鑒定ABO血型時正反定型不一致怎么破
來源:醫(yī)學之聲 作者:沐同
ABO血型定型也比較復雜,并不是正反定型結果一致便可報結果那么簡單。
20世紀初,卡爾·蘭德斯坦納(kar Landsteiner)發(fā)現(xiàn)了ABO血型,開啟了免疫血清學大門,在不斷的探索中,相繼發(fā)現(xiàn)了MNS、P、Rh、Kell等血型系統(tǒng),血型系統(tǒng)紛繁復雜,極易因血型不合而導致同種免疫反應,輕則輸血無效,重則導致患者休克死亡,因此,準確地判斷患者血型,是保障安全輸血的前提,是最最最重要的關鍵環(huán)節(jié)。臨床中主要鑒定ABO血型系統(tǒng)和Rh血型系統(tǒng),而ABO血型定型也比較復雜,并不是正反定型結果一致便可報結果那么簡單。
如何鑒定 ABO血型?
ABO血型定型包括正定型和反定型,用抗-A及抗-B試劑與被檢細胞反應,檢測紅細胞表面是否存在A抗原和(或)B抗原,稱之為正定型;用標準A細胞和B細胞與被檢測血清反應,檢測血清中是否存在相應的血型抗體,稱之為反定型,正反定型一致方可確定結果,可出具報告。
正定型
反定型
抗A
抗B
A1紅細胞
B紅細胞
A
+
-
-
+
B
-
+
+
-
O
-
-
+
+
AB
+
+
-
-
注:+表示陽性,-表示陰性
以上為大多數(shù)情況,但ABO定型試驗中會出現(xiàn)正反定型不一致,主要原因有技術和操作失誤,還有受血者自身因素。
出現(xiàn)正反型不符時,不要盲目地判斷或進行下一步的實驗分析,應立即重復試驗,看是否與之前結果一致,通知臨床護士重新采集受血者的血標本,防止因采血失誤導致的試驗結果不確定性,咨詢臨床醫(yī)生該患者用藥史、輸血史、既往史。詢問患者(家屬)是否知曉自己的血型。
待確定該標本為患者無誤,采血良好,重復試驗結果一致,方可進行下一步的分析。
受血者自身問題導致ABO血型試驗正反定型不一致
(1) 異常的血漿蛋白
受檢者血漿中異常的白蛋白、球蛋白比例、高濃度的纖維蛋白等問題,導致紅細胞緡錢狀形成,造成假凝集現(xiàn)象。如果鏡下觀察紅細胞呈緡錢狀排列,加等滲鹽水均勻稀釋,如果在試管中稀釋,比例為1:3,若在玻片上 稀釋為1:1,可以使緡錢狀現(xiàn)象消失。
(2) 血清異常
臍帶血中的華通膠或血清高M蛋白引起紅細胞緡錢狀,出現(xiàn)假凝集,處理同(1)。
(3) 紅細胞致敏
受免疫球蛋白致敏的紅細胞,在含高蛋白介質(zhì)的試劑中可發(fā)生凝集。將紅細胞做直接抗人球蛋白試驗,若 結果呈陽性,表示紅細胞已被抗體致敏。
(4) 嵌合體血型
這種血型者體內(nèi)有兩組紅細胞群體,定型時可以出現(xiàn)“混合外觀凝集 ”現(xiàn)象,常見于異卵雙胎。
(5) 近期輸血
受血者于試驗前輸入過其他ABO型的血液,使血液標本為不同血型的紅細胞混合物,例如A型患者輸入了O型洗滌紅細胞,就有可能出“混合外觀凝集”現(xiàn)象,但并不意味著該患者體內(nèi)的血液從此是不同血型紅細胞混合物,輸入的異體血會代謝,會凋亡,患者自身會再生新的紅細胞,輸血治療一段時間后,患者體內(nèi)的血仍是自己的血,患者仍是原來的血型,沒有改變。
(6) 疾病因素導致抗原減弱
患胃腸道腺癌時,由于喪失了轉移酶而缺乏A和B抗原,血液病患者因缺乏H轉移酶或酶受到抑制,致使ABH抗原發(fā)生“改變”或減弱,導致正反定型不一致,待病情緩解時又恢復過來。
(7) 獲得性B
有腸道疾病的O型或A型病人,因腸道細菌影響而形成“類B”,表現(xiàn)為B型或AB型,待疾病恢復時,“類B”即可消失。
(8) 抗體減弱
低丙種球蛋白血癥患者,會因機體免疫球蛋白水平全面下降,使反定型時與A細胞、B細胞不發(fā)生凝集,從而導致的正反定型不一致。
(9) 不規(guī)則抗體的存在
受檢者血漿中,含有ABO血型以外的不規(guī)則抗體,與試劑A、B細胞上的相應抗原起反應,可以通過不規(guī)則抗體篩查試劑來檢測受檢者血漿中是否存在不規(guī)則抗體。
(10) 血型特異性物質(zhì)過高
一些卵巢囊腫病例血液中血型物質(zhì)濃度過高,可中和抗A及抗B試劑??梢詫?紅細胞用鹽水洗滌數(shù)次,配制5%鹽水紅細胞懸液,用抗A、抗B、抗A1、抗A+B及抗H做定性試驗。
(11) 紅細胞多凝集現(xiàn)象
紅細胞膜因遺傳或獲得性異常,如細菌酶作用幾乎與所有人的血清發(fā)生凝集。
(12) 年齡因素
剛出生的新生兒、由母親被動獲得抗體的嬰兒或老年人血清中的抗體水平均較弱,甚至檢測不到抗體,但是紅細胞表面抗原終生存在,所以可以根據(jù)年齡等綜合判斷,可忽略反定型結果。
(13) 藥物因素
藥物如右旋糖酐及靜脈注射某些造影劑可引起紅細胞聚集(注:不是凝集),類似凝集表現(xiàn),屬于假凝集,鏡下觀察判斷,才能得到可靠的結論。
(14) 抗原位點減少或抗原性減弱
常見于A亞型,或將受檢者紅細胞與抗A/抗B血清做吸收放散試驗,以及受檢者唾液作A、B、H血型物質(zhì)測定,后者只對80%分泌型的人有用。
技術操作失誤造成ABO血型試驗正反定型不一致
(1) 試驗器材不清潔,產(chǎn)生假陽型結果
開啟一天的工作前,要用消毒液對操作臺、儀器表面進行擦拭消毒,保證操作環(huán)境的清潔,對所使用的試管、吸頭等一次性消耗品,禁止重復利用,避免交叉污染,有條件的科室可以使用高壓蒸汽滅菌的耗材。
(2) 錯加標本或試劑,產(chǎn)生假陽性或假陰性結果
這屬于人為差錯,醫(yī)生要本著認真的態(tài)度完成每一步操作,仔細確認,耐心核對信息,養(yǎng)成良好的工作習慣,既是對自己工作的復查,也是對患者負責。
(3) 試劑污染或失效,產(chǎn)生假陽性或假陰性結果
實驗室每天的第一件事就是做室內(nèi)質(zhì)控,無論是手工操作還是自動化系統(tǒng),室內(nèi)質(zhì)控會檢測出當天試劑是否有效,是否能準確地出具報告,是否保證這一天工作的有效性,因此,每天的室內(nèi)質(zhì)控工作不可或缺。
(4) 細胞和血清之間比例不適當,產(chǎn)生假陽性或假陰性結果
血型鑒定的方法不同,紅細胞懸液與血漿比例也不一樣,試管法測ABO血型,紅細胞懸液與血漿比例為1:1;而卡氏法則根據(jù)廠家說明書進行配比,不可擅自更改比例,否則抗原、抗體會因比例不當而出現(xiàn)前帶或后帶現(xiàn)象。
(5) 陽性反應產(chǎn)生溶血現(xiàn)象,判斷失誤導致假陰性結果
正反定型結果從兩個方面判斷:一是有無凝集:有凝集則為陽性,無凝集為陰性;二是有無溶血:有溶血為陽性,無溶血為陰性,溶血現(xiàn)象與血液凝集一樣具有重要的臨床意義。
(6) 漏加試劑,產(chǎn)生假陰性結果
為防止漏加試劑,滴加試劑后觀察各個試管或加樣孔內(nèi)的液面,若在一個水平面上,說明各試劑無漏加,或觀察顏色,若漏加紅細胞懸液一眼便知。
(7) 結果記錄或判斷錯誤產(chǎn)生假陽性或假陰性結果
作為醫(yī)生,粗心大意是個禁忌,當然,醫(yī)生不是神,也有一不小心失誤的時候,尤其夜班,精神狀態(tài)不好的情況極易出錯,但也只能盡力去保持較好的工作狀態(tài),從事醫(yī)生這一行業(yè),只能說,且行且認真。
(8) 離心過度或不足,產(chǎn)生假陽性或假陰性結果
離心過度會破壞紅細胞,離心不足紅細胞與血漿分離不徹底,都會影響試驗結果,根據(jù)血液的量給予相應的合理轉數(shù)和離心時間,尤其是急診情況,離心的時間長短和質(zhì)量甚至直接關系搶救時間和效果。
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