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問題一

xuefeiyuli123
雷老師再請教你一個培養(yǎng)基高壓滅菌的問題。說明書上：平板計數(shù)培養(yǎng)基加熱溶解121攝氏度滅菌15分鐘，乳糖膽鹽發(fā)酵管培養(yǎng)基經(jīng)115攝氏度15分鐘滅菌。我想問下，我把2者一同在高壓鍋滅菌121到126攝氏度時間20分鐘，這樣可以嗎？或2者一同在高壓鍋滅菌121到126攝氏度時間15分鐘可以嗎？
覺得2個培養(yǎng)基分開滅菌覺得浪費，再一起滅菌不知怎樣做才標準？

Leizhw
1、“雷老師再請教你一個培養(yǎng)基高壓滅菌的問題。說明書上：平板計數(shù)培養(yǎng)基加熱溶解121攝氏度滅菌15分鐘，乳糖膽鹽發(fā)酵管培養(yǎng)基經(jīng)115攝氏度15分鐘滅菌。我想問下，我把2者一同在高壓鍋滅菌121到126攝氏度時間20分鐘，這樣可以嗎？或2者一同在高壓鍋滅菌121到126攝氏度時間15分鐘可以嗎？”
----不可以，乳糖膽鹽發(fā)酵管培養(yǎng)基經(jīng)115攝氏度15分鐘滅菌的目的是防止高溫導(dǎo)致多糖碳化。
2、“覺得2個培養(yǎng)基分開滅菌覺得浪費，再一起滅菌不知怎樣做才標準”？
----沒有規(guī)矩不成方圓。不可一起滅菌。

雨肖XY
我們實驗室想做認可，關(guān)于CNAS-CL09-2014中“標準菌種必須從認可的菌種或標本收集途徑獲得”，“實驗室必須保存有滿足試驗需要的標準菌種/菌株”，包括應(yīng)用于培養(yǎng)基（試劑）驗收/質(zhì)量控制  然后看了4789.28-2013，后面列了各個培養(yǎng)基質(zhì)控的菌種。
那我們是否應(yīng)該根據(jù)4789的要求重新購買菌種？所有涉及到的培養(yǎng)基的相關(guān)菌種都應(yīng)購買？都要菌種的證書？

Leizhw
CNAS-CL09-2014中“標準菌種必須從認可的菌種或標本收集途徑獲得”，“實驗室必須保存有滿足試驗需要的標準菌種/菌株”，包括應(yīng)用于培養(yǎng)基（試劑）驗收/質(zhì)量控制  然后看了4789.28-2013，后面列了各個培養(yǎng)基質(zhì)控的菌種。
1、如果用實驗室已有的菌種進行試驗，關(guān)鍵生化特征完全符合，我認為沒有必要根據(jù)GB 4789.28-2013的要求重新購買菌種，畢竟購買菌種的費用不菲。當(dāng)然，如果實驗室有條件，購買GB 4789.28-2013規(guī)定的菌株，也是值得肯定的。
2、涉及到的培養(yǎng)基的相關(guān)菌種不一定需要購買，其實從食品中分離出來的經(jīng)過關(guān)鍵特征指標驗證的野生菌株，更有價值，建議大家妥善保藏并合理使用從食品中分離的菌株；
3、如果能收集、索取菌種證書，不應(yīng)該放棄任何機會。證書上的許多信息，對于“研究人員”來說，十分有價值！

yiyun121
我們實驗室剛剛建立，微生物室目前分三個檢測室——無菌室、霉菌室和BSL-2室，現(xiàn)在好幾個“專家”過來都說我們的微生物實驗室設(shè)置不合理，無菌室指完全沒有細菌的檢測室，可我們這個只是潔凈等級七級的檢測室所以不能叫無菌室，有的說應(yīng)該叫限度檢測室，有的說是潔凈室，有的說干脆就叫食品檢測室、微生物檢測室。。。。。
各種指導(dǎo)我們的意見都有，麻煩雷老師幫忙解答一下到底應(yīng)該叫什么？

Leizhw
1、食品農(nóng)產(chǎn)品微生物檢測，叫無菌室，沒有問題的。
2、“無菌室”，約定俗成。如果質(zhì)疑，我只能說該專家是“磚家”。

huangji5371
GB4789.28-2013附錄中，表E.2中孟加拉紅培養(yǎng)基生長率的質(zhì)控菌株為釀酒酵母ATCC9763，黑曲霉ATCC16404，考慮到我們實驗室測的是霉菌，
想咨詢雷老師的是：
1、真菌標準菌株（黑曲霉ATCC16404），是孢子形式的嗎？
2、如果是孢子形式的，細菌的制備工作菌株懸浮液方法，適用于真菌孢子，是嗎？

Leizhw
1、真菌標準菌株（黑曲霉ATCC16404），是孢子形式的嗎？
-----不一定，一般不是。
2、如果是孢子形式的，細菌的制備工作菌株懸浮液方法，適用于真菌孢子，是嗎？
----在本實驗背景下，我認為是可以的。

surfing342
我們做可吸果凍微生物實驗，出現(xiàn)一個百思不得其解的現(xiàn)象，有時候會檢出菌落總數(shù)超100cfu/g，取樣是從可吸口向外擠出樣品，檢出超標后會將同一袋樣品從底部用剪刀剪開復(fù)檢樣品，檢測結(jié)果合格，＜10cfu/g。檢出超標后這批產(chǎn)品我們會放置一個月重新燈檢，檢查是否脹袋，然后沒問題再發(fā)貨。這種情況不是偶爾現(xiàn)象，是經(jīng)常出現(xiàn)，但是基本沒有發(fā)現(xiàn)異常，也沒有出現(xiàn)客戶投訴脹袋。所以想請雷老師分析一下可能的原因，不勝感激！

Leizhw
1、吸口污染？用75%酒精消毒后取樣試一試。
2、上層菌數(shù)超標，下層復(fù)驗不超標：
（1）GB 4789.1-2016 8.2明確規(guī)定不得復(fù)驗？
（2）上下層有別，從另一角度說明污染菌為好氧菌，那么真空包裝也許可以減低污染概率。（3）對同一批產(chǎn)品擴大取樣，如果與第一次結(jié)果一致，說明產(chǎn)品本身遭到污染；否則屬于測試操作交叉污染。

huangji5371
我們檢測大腸桿菌選用了SN/T 0169-2010中的葡萄糖苷酶熒光法，其中用到的培養(yǎng)基LST-MUG和Columbia-MUG瓊脂，在做培養(yǎng)基技術(shù)性驗收時，在GB 4789.28或SN/T1538.2沒找到相應(yīng)的質(zhì)控菌株要求，
請教一下：
1、在腸桿菌科中，可以用于驗證這兩種培養(yǎng)基的陽性（有熒光）和陰性（無熒光）菌株都大概有哪些？
2、培養(yǎng)基供應(yīng)商的質(zhì)檢報告中用了大腸桿菌（陽性，產(chǎn)氣，有熒光），大腸桿菌O157（陰性，產(chǎn)氣，無熒光），作為標準菌株的大腸桿菌O157有無毒菌株，是嗎？

Leizhw
1、在腸桿菌科中，可以用于驗證這兩種培養(yǎng)基的陽性（有熒光）和陰性（無熒光）菌株都大概有哪些？
----陽性-----大腸桿菌（陽性，產(chǎn)氣，有熒光），如板岐腸桿菌等；
----陰性-----大腸桿菌O157（陰性，產(chǎn)氣，無熒光）。
2、標準菌株的大腸桿菌O157是致病菌，應(yīng)在生物安全二級實驗條件(GB 19489)下操作。

xu542614314
有個問題想請教一下。就是車間空氣落菌情況，關(guān)于落菌的時間問題。有說五分鐘，十五分鐘，半個小時的。但是最終標準就是50到100之間。如果一車間生產(chǎn)一盤產(chǎn)品，從第一個開始到最后一個結(jié)束，所用時間為10分鐘，然后就開始生產(chǎn)下一盤，以此類推。那么空氣落菌時間就定10分鐘，這樣可以不？

Leizhw
1、GB/T 15979-2002《一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標準》規(guī)定為5min；
2、在限量給定的情況下，時間越長，對車間微生物控制越好！?。。。。。。?！因此10min可以-------僅供參考！

吾在場證明

如果以GB 4789.3-2016為例，假如樣品非液體，需要稀釋，限量<0.92，則樣品應(yīng)該分別稀釋十倍，百倍，千倍。0.1稀釋度應(yīng)該取10ml稀釋液加入10ml雙料中————后面的操作應(yīng)該是取0.01和0.001稀釋度稀釋液各10ml稀釋液分別加入10ml雙料中還是也可以取1ml0.1稀釋度稀釋液加入10ml單料、取1ml0.01稀釋度稀釋液加入10ml單料中呢？

Leizhw
1、GB 4789.3-2016中沒有所謂“單料和雙料”，你這是以GB/T 4789.3-2003的設(shè)計案例，試圖使用GB 4789.3-2016解答，不科學(xué)。

2、GB/T 4789.3-2003 7.2明確規(guī)定了“單料和雙料”的使用

阿波
我們的產(chǎn)品標準是大腸菌群≤30MPN/100mL,如果我報告成<1CFU/mL，和產(chǎn)品標準又對不上了，那怎么辦呀？

Leizhw
原則上沒有辦法，二者之間沒有任何“代數(shù)換算”關(guān)系。
但是基于經(jīng)驗和風(fēng)險，僅此一次可以認為所檢產(chǎn)品在大腸菌群這個指標上是可以接收的，既沒有超標。希望嚴格執(zhí)行產(chǎn)品標準。