“液體”指的是培養(yǎng)基物理狀態(tài)，“液體深層培養(yǎng)”就是發(fā)酵工程技術(shù)?！耙后w制種”實質(zhì)是利用生物發(fā)酵工程生產(chǎn)液體菌種，取代傳統(tǒng)、樸素的固體制種；利用生物發(fā)酵原理，給菌絲生長提供一個最佳的營養(yǎng)、酸堿度、溫度、供氧量，使菌絲快速生長，迅速擴繁，在短時間達(dá)到一定菌球數(shù)量，完成一個發(fā)酵周期，即培養(yǎng)完畢。
液體菌種的制作難點 1、1 液體母種生產(chǎn)設(shè)備 電磁搖床和機戒搖床都可以培養(yǎng)優(yōu)質(zhì)種子， 最好不用固體種子 （種 子是否染菌難判斷）和簡易培養(yǎng)的液體種子。 1、2 發(fā)酵罐的形狀有的罐高廋、有的則矮胖，前者依據(jù)傳統(tǒng)理論認(rèn)為空氣從進入液 體到冒出的時間越長溶氧越多， 后者則采取多供氣的方法來彌補空氣 在液體中運動距離短的缺陷， 這兩種設(shè)計理念都能完全達(dá)到培養(yǎng)優(yōu)質(zhì) 液體菌種的目的，在長期的應(yīng)用中我們感到矮胖罐也很好用，因為這 種罐滅菌時上下溫差小， 而且夾層與罐內(nèi)的壓差在較小的情況下蒸汽 就可經(jīng)過過濾器進入罐內(nèi)， 能很好的進行過濾系統(tǒng)的在位 （安裝位置） 滅菌，同時可以用能耗低而供氣較大的電磁式氣泵供氣 1、3 發(fā)酵罐的層數(shù) 市場上典型的有單層、雙層（夾層）、三層（夾層外設(shè)保溫層），使 用單層及雙層罐在滅菌時能耗較大， 有的罐靠自身熱源不另加棉被進 行保溫溫度很難達(dá)到 120 度以上、且要防止?fàn)C傷皮膚；三層罐保溫性 好；單層罐只能自然降溫，雙、三層罐可以用流水降溫。 1、4 發(fā)酵 罐體設(shè)置上的不合理點 罐體夾層應(yīng)設(shè)進排水（汽）口，安全閥、壓力表，內(nèi)層應(yīng)設(shè)壓力表、 溫度表、接種口、出種口、進氣口、呼吸口、進料口、取樣口等。各 品牌的發(fā)酵罐不合理點有內(nèi)層裝安全閥(負(fù)壓時易吸氣污染）、不裝 壓力表(不知道罐內(nèi)壓力） 過濾器離罐滅菌 、 （連接時有可能受污染） 、 呼吸器離罐滅菌（不方便）、接種口過大（火焰圈難控制）、過濾層 次少到只一級 （不安全、 應(yīng)有粗—精—精三級） 空壓機選配不當(dāng) 、 （電磁式氣泵、無油空壓機、有油空壓機）能耗相差三五倍、過濾器能力 不足（過大壓差擊破過濾膜）等。 1、5 發(fā)酵罐內(nèi)液體的循環(huán) 各品牌都以進入罐內(nèi)的無菌壓縮空氣為動力，個別品牌裝有導(dǎo)流 裝置、氣體破啐網(wǎng)等。在菌絲球少時液體都會很好的流動，后期則有 差異，特別是痩長罐無導(dǎo)流裝置時底部液體幾乎不流動，對菌絲生長 不利。設(shè)備生產(chǎn)廠家應(yīng)認(rèn)真考慮讓液體很好的循環(huán)流動起來。 1、6 空氣過濾器 小罐因通氣量小，有的用棉花或活性碳做過濾材料，棉花纖維間的空 隙一般達(dá)到十幾微米，它的過濾作用僅僅是靠沉降和粘附，當(dāng)氣流過 大時過慮效果不好，幾十升以上的罐多用膜過慮器，如粗過慮器用 0.2um 聚丙希、精過慮器用 0.01um 聚四氟乙希膜 1、7 氣泵的選用 電磁式氣泵的能耗低氣量大，但壓力低（僅 0.03-0.05mpa）,能與大 多數(shù)罐配用； 無油空壓機 （膜片式） 壓力中等， 活塞式空壓機壓力大、 能耗高； 500 升罐為列用電磁式氣泵和用活塞式空壓機相比能耗相 以 差 3-4 倍、月電費相差千元以上。 二、對液體菌種技術(shù)的認(rèn)識 2、1 基本現(xiàn)狀 培養(yǎng)基的配方、 培養(yǎng)條件的控制已有較多的研究報道， 各有特點， 培養(yǎng)結(jié)果也不完全相同，如菌球的大?。?—幾 mm）、數(shù)量（每毫升 幾百—幾千個），用直觀的方法即菌絲占液體的百分比列來看（靜止 2hr)如香菇、雙孢菇為 50-95、平菇金針菇黑木耳雞腿菇杏孢菇白靈 菇為 80-98，很多品種已經(jīng)在生產(chǎn)中正常應(yīng)用液體菌種。 2、2 培養(yǎng)基的選擇 很多原料可以做液體培養(yǎng)基，如玉米粉、土豆、面粉、麩皮、豆粕、 蛋白胨、酵母膏、葡萄糖、蔗糖等，所選原料可以因地制宜，如用量 小時主料用土豆、 用量大時多用玉米粉， 沒有蛋白胨時用豆粕或黃豆。 不同配方的最終培養(yǎng)液 ph 值是不會一樣的，一般高氮配方 ph 值高， 低氮配方 ph 值低（如香菇不同配方培養(yǎng)后 ph 值為 3.5-6.5）。粘度 高則菌球小，氮多則菌球疏松，生產(chǎn)中注意調(diào)節(jié)。 2、3 無菌操作過程這是液體菌種培養(yǎng)的關(guān)鍵，整個過程中不能有一個細(xì)菌進入發(fā)酵液 中。 采用電磁式搖床培養(yǎng)液體菌種時可以在接入試管菌種后靜止培養(yǎng) 3-4 天，觀察無污染后再搖動培養(yǎng)，可以有效避免菌種帶雜菌；發(fā)酵 罐及空氣系統(tǒng)先空消一次再做培養(yǎng)液， 搖瓶菌種接入發(fā)酵罐的過程是 最易被污染的操作過程，操作中必須對罐體的接種口進行嚴(yán)格消毒， 火焰圈應(yīng)該完整控制接種口， 搖瓶管口與罐體接種口的對接應(yīng)在火焰 中進行，接種完后迅速關(guān)閉接種口；種子罐與下一級培養(yǎng)罐的連接管 道最好在使用前再次蒸汽滅菌一次。 培養(yǎng)期間應(yīng)始終預(yù)防系統(tǒng)產(chǎn)生負(fù) 壓。 2、4 抗生素的使用問題 抗生素主要用于預(yù)防細(xì)菌污染，雖有一定的效果但不提倡使用，試驗 中如果發(fā)酵液被污染了再用抗生素來治療， 即使用量加大到一般用量 的 3-5 倍也不可能阻止細(xì)菌的繁殖，這說明抗生素不是萬能的，而且 在生產(chǎn)中某些抗生素在液體菌種培養(yǎng)中曾經(jīng)引起食用菌遺傳性的改 變，導(dǎo)致不出菇（如茶薪菇、紫木耳），復(fù)合使用或先后使用兩種抗 生素可能更易使遺傳性發(fā)生改變，導(dǎo)致不出菇。實驗中還發(fā)現(xiàn)有些抗 生素達(dá)到一定濃度可以使雞腿菇菌絲不生長， 某抗生素只要較低濃度 就可以抑制黑木耳菌絲的生長， 所以應(yīng)該認(rèn)識到抗生素對食用菌菌絲 生長是有影響的；同時大多數(shù)抗生素都有一個代謝失效的過程，如果 不能殺死細(xì)菌而只能抑制細(xì)菌的話等到抗生素失效時培養(yǎng)液仍然會 被污染 3、1 液體菌種與培養(yǎng)料的含水量等 配料時應(yīng)考慮準(zhǔn)備接入的菌液量減少加水量，避免培養(yǎng)料過濕；液體 菌種的液體中含有一定的糖等營養(yǎng)物質(zhì)，配料時可以不再加糖 3、2 液體菌種生產(chǎn)與菌包生產(chǎn) 液體菌種的保存時間短，生產(chǎn)中最好在培養(yǎng)好后盡早使用，否則必須 用冷水降溫培養(yǎng)，雖然當(dāng)溫度降到很低時（10 度以下）可以保存十 多天，但仍應(yīng)盡早使用，這就要求做液種與做栽培袋按計劃進行。液體菌種應(yīng)用于食用菌的生產(chǎn)，對于食用菌行業(yè)從傳統(tǒng)生產(chǎn)上的繁瑣復(fù)雜、周期長、成本高、憑經(jīng)驗、拼勞力、手工作坊式向自動化、標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)?；壘哂兄卮笠饬x。液體菌種接入固體培養(yǎng)基時，又具有流動性、易分散、萌發(fā)快、發(fā)菌點多等特點，較好的解決了接種過程中萌發(fā)慢、易污染的問題，菌種可進行工業(yè)化生產(chǎn)。液體菌種不分級別，可以用來做母種生產(chǎn)原種，還可以作為栽培種直接用于栽培播種。液體菌種栽培黑木耳具有八大優(yōu)勢：（1）成本低：制種成本是固體的三十分之一；（2）時間短：制種時間是固體的1/10；（3）萌發(fā)快：接種后6小時萌發(fā)，24小時菌絲布滿接種面；（4）生長快：栽培養(yǎng)菌時間比固體縮短1/2；（5）純度高：設(shè)備完全密閉運行，菌種純度高、活力強；（6）污染少：菌種萌發(fā)速度快，雜菌幾乎沒有侵染機會；（7）菌齡短：菌包上下菌齡一致，出耳齊、產(chǎn)量高；（8）自動化：按鍵操作，自動化程度高。 常規(guī)制備液體菌種多采用“母種—一級搖瓶種—二級搖瓶種—培養(yǎng)（發(fā)酵）器”的生產(chǎn)工藝，環(huán)節(jié)多，操作復(fù)雜，周期長。全禾菌業(yè)研制的CQY系列液體菌種培養(yǎng)器及其配技術(shù)，將母種經(jīng)過提純、活化制備成大量的“液體菌種專用母種”,直接接種到培養(yǎng)器中培養(yǎng)。使用液體專用母種，解決了液體菌種生產(chǎn)及使用上的一系列難題。傳統(tǒng)的生產(chǎn)從一級搖瓶、二級搖瓶到培養(yǎng)器一個生產(chǎn)周期需9～13天，而專用種直接接到培養(yǎng)器上到生產(chǎn)出成品液體種只需2～4天時間，使得液體菌種自身的生產(chǎn)周期大大縮短。同時節(jié)約了投資和生產(chǎn)成本，減少了中間環(huán)節(jié)的污染；菌球量大，菌齡一致。液體菌種制種工藝流程如下：清洗和檢查→培養(yǎng)基配制→上料裝罐→培養(yǎng)基滅菌→降溫冷卻→接入專用菌種→發(fā)酵培養(yǎng)→接出菌種 液體菌種研究應(yīng)用背景
1、國際背景20世紀(jì)中期，微生物液體深層培養(yǎng)（發(fā)酵）技術(shù)迅猛發(fā)展，從而形成了現(xiàn)代醫(yī)學(xué)、食品發(fā)酵工業(yè)。1948年美國科學(xué)家Humfeld 等成功地對蘑菇進行了液體深層培養(yǎng)，從而揭開了人類進行食用菌液體培養(yǎng)和液體菌種研究的序幕，并很快使歐美國家蘑菇生產(chǎn)在五、六十年代快步進入了液體菌種和工業(yè)化栽培時代。目前世界生物發(fā)酵工業(yè)發(fā)展速度驚人，英帝國化學(xué)公司SCP（單細(xì)胞蛋白）生產(chǎn)罐有30層樓高，達(dá)100m，罐容近3500m3。而英國的食用菌液體菌種生產(chǎn)也代表西歐與北美發(fā)達(dá)國家菌種生產(chǎn)模式。英國的蘑菇菌種采用全自動化的大罐發(fā)酵制備液體菌種，全國菌種僅由Sylvon和Amycel兩大國際菌種公司完成。雙孢蘑菇是英國重要作物，其產(chǎn)值超過馬鈴薯和蕃茄，進入自動化和電子計算機時代，成為了現(xiàn)代農(nóng)業(yè)的代表。其兩大菌種廠的菌種都在進行出菇檢驗合格后才出廠銷售。西方國家液體菌種與設(shè)備的總體特點是早、精、大。2、國內(nèi)背景我國較早從事食用菌液體深層發(fā)酵研究的是上海植物生理研究所孫美聿等人，于1960年進行了香菇液體培養(yǎng)研究。1979年上海師院的楊慶堯教授開始對香菇、金針菇等培養(yǎng)液體菌種，并進行栽培試驗。自80年代至20世紀(jì)來，我國許多科研院所的專家教授前輩開始對食用菌深層發(fā)酵、液體菌種及中小型發(fā)酵設(shè)備進行了反復(fù)、深入和刻苦的研究。 為今天我國液體菌種的社會化推廣應(yīng)用，不論在發(fā)酵設(shè)備、工藝技術(shù)還是在栽培應(yīng)用上，都提供了寶貴的經(jīng)驗，奠定了堅實的基礎(chǔ)。目前已見的液體菌種生產(chǎn)與應(yīng)用的食用菌品種，包括平菇、香菇、黑木耳、雙孢菇等常規(guī)品種和白靈菇、杏鮑菇、真姬菇等珍稀品種約五十多個品種。我國液體菌種研究的總體特點是晚、全、小。3、差距與出路西歐、美國、日本食用菌產(chǎn)量都很大，發(fā)酵技術(shù)與生產(chǎn)都很先進，其液體菌種的優(yōu)勢發(fā)揮得令人驚嘆不已。我們?yōu)槭裁床环滦Ш驼瞻嵋惶啄Ｊ?，建造一個或幾個縣級、省級或國家級液體菌種廠，來促進我們食用菌產(chǎn)業(yè)發(fā)展呢？本人認(rèn)為其原因諸多，主要有三：其一是國外設(shè)備投資大、技術(shù)要求高。一套設(shè)備得成百上千萬元，且要求水、電、氣、汽俱全。然而我國食用菌商品價格比國際市場平均低幾倍至十幾倍，這種大、洋、貴的設(shè)備不適合中國國情。其二是與手工化農(nóng)戶生產(chǎn)不協(xié)調(diào)。液體菌種自身是工業(yè)化生產(chǎn)，西方國家在液體菌種發(fā)展的同時，其栽培生產(chǎn)也同步實現(xiàn)了機械化、工業(yè)化，兩者相輔相成，互相促進和發(fā)展，而我國食用菌生產(chǎn)仍然是傳統(tǒng)的手工化、作坊式、千家萬戶的小農(nóng)生產(chǎn)，兩者難以接軌。況且液體制種客觀上能做到常年化生產(chǎn)菌種，而農(nóng)戶實際栽培只能季節(jié)性栽培出菇愈顯不協(xié)調(diào)。其三是我國栽培品種太多。西方國家僅對一、二個品種實現(xiàn)了社會化、工業(yè)化大生產(chǎn)，并把液體菌種作精作細(xì)，但我國食用菌商品化栽培已幾十個品種，其工藝、設(shè)備研究難點多，需多年積累，逐步突破。探索研究適合中國國情的液體菌種生產(chǎn)技術(shù)與設(shè)備是許多食用菌行業(yè)許多有志之士夢寐以求的愿望。尤其要求的是規(guī)模小、投資小、運行成本低，技術(shù)操作簡單，適于多品種生產(chǎn)等等。今天我們率先研究和推廣的液體菌種培養(yǎng)器，就是針對并解決了上述問題，從而得到了我國食用菌行業(yè)和從業(yè)菇農(nóng)的認(rèn)可。液體菌種優(yōu)勢的認(rèn)識
1、液體菌種的優(yōu)勢液體菌種是采用生物培養(yǎng)（發(fā)酵）設(shè)備，通過液體深層培養(yǎng)（發(fā)酵）的方式生產(chǎn)食用菌菌球，作為食用菌栽培的種子。其液體菌種是相對固體菌種（木屑、棉殼、麥麩、枝條等）的物理性狀而言的。液體菌種具有固體菌種不可比擬的優(yōu)勢：其一是制種快：在液體菌種培養(yǎng)罐內(nèi)菌體細(xì)胞處于最適溫度、酸堿度、氧氣、碳氮比等條件下，以動態(tài)方式培養(yǎng)，菌絲分裂迅速，在短期內(nèi)能獲得大量菌絲體（球）。固體菌種培養(yǎng)，其菌絲體是以自然數(shù)的速度自上而下勻速生長；而液體菌種培養(yǎng)，其菌體細(xì)胞是以幾何數(shù)字的倍數(shù)加速增殖。采用大連全禾菌業(yè)有限公司的液體菌種培養(yǎng)器生產(chǎn)液體菌種一般2~4天完成一個培養(yǎng)周期，而固體菌種從原種再到栽培種，每級擴繁都得1個多月。其二是活力強。液體菌種不僅營養(yǎng)、溫度、氧氣、酸堿度等環(huán)境通過控制，最大限度地滿足了菌體的生長需求，而且呼吸作用產(chǎn)生的代謝廢氣能及時排除，新陳代謝旺盛，所有菌球菌齡基本一致，因此菌絲活力強。而固體菌種菌體細(xì)胞代謝物積留混雜于培養(yǎng)基營養(yǎng)物中間，自然影響菌體質(zhì)量。況且固體菌種往往是瓶（袋）上下菌齡不一致，下面剛長好，上面可能老化，并失去活力。其三是純度高。液體菌種所用母種一般需經(jīng)篩選純化制備而成，種源純度高。而固體菌種所用斜面母種經(jīng)一些商家無限轉(zhuǎn)代后純度降低。液體菌種培養(yǎng)是在密閉罐體內(nèi)運行，供氧系統(tǒng)空氣經(jīng)過濾，以全禾菌業(yè)液體菌種培養(yǎng)器為例，其純度達(dá)到99.999999%，從而保證所培養(yǎng)的液體菌種是純種。其四是防污染。液體菌種具有流動性，接種后易分散，萌發(fā)點多，菌球接入后萌發(fā)快，在適宜條件下，接種后24小時左右菌絲布滿接種面，使栽培污染得到有效控制。而固體菌種接種時，菌體經(jīng)過剝離與撕裂和藥物薰殺，從萌發(fā)吃料到封閉接種面，一般得5~7天。所以雜菌污染機率多。其五是縮短栽培周期。液體菌種使栽培發(fā)菌速度快一倍，出菇集中，減少潮次，周期縮短，栽培的用工、能耗、場地等成本都大大下降。有的品種（如杏鮑菇、金針菇）從制種到栽培、采收上市不超過30天，更容易抓季節(jié)，趕行情。其六是成本低。以130型全禾液體制種培養(yǎng)器為例，每罐菌種成本100元左右，接種4000~5000袋，菌種成本不超過3分錢。2、液體菌種的不足事物都是一分為二的。液體菌種目前也有著不盡人意之處。諸如培養(yǎng)設(shè)備需要有電源、偏遠(yuǎn)農(nóng)村常停電、設(shè)備需要投資（有的菇農(nóng)由于諸多原因，尚未完成資金積累），需要重新學(xué)習(xí)和掌握制種工藝，設(shè)備故障自己不會維修；一家一戶小規(guī)模生產(chǎn)（1000-2000袋），上設(shè)備不劃算，但可聯(lián)戶引進設(shè)備等等。但這些問題也正是我們科研單位正在努力解決的，況且有的目前已經(jīng)解決。比如停電問題，目前全禾菌業(yè)培養(yǎng)器能在停電后繼續(xù)自動運行10~20小時，短期停電不用怕，全禾菌業(yè)不僅負(fù)責(zé)培訓(xùn)技術(shù)，出現(xiàn)問題還能上門服務(wù)，這也是科研單位應(yīng)有的服務(wù)。3、對液體菌種認(rèn)識的誤區(qū)因為液體菌種研究與推廣的突破是在近幾年，而許多人的認(rèn)識尚受前些年，甚至十幾年前液體菌種研究水平的影響，對液體菌種的成功和應(yīng)用推廣持謹(jǐn)慎、懷疑甚至反對態(tài)度，實際是自身認(rèn)識的誤區(qū)所致。最主要的有以下幾種觀點：其一是液體菌種培訓(xùn)器污染。是的，發(fā)酵液營養(yǎng)豐富，比固體木屑培訓(xùn)基雜菌生產(chǎn)速度快。然而，現(xiàn)在的國際先進的膜過濾材料，其過濾孔徑為0.01微米，是最小細(xì)菌個體的幾十分之一，從而保證了供養(yǎng)純度并有效控制雜菌。其二是液體菌種技術(shù)要求高，農(nóng)戶不易掌握。實際上我們現(xiàn)在的液體菌種培養(yǎng)器全部是自動控制，按鍵操作，比過去制種瓶瓶袋袋地轉(zhuǎn)要輕松簡單十幾倍，農(nóng)戶一學(xué)就會。其三是液體菌種貯藏運輸難。實際上，液體菌種培養(yǎng)器制種2-3天就一罐，一罐百八十塊錢，就能接幾個至上萬袋，現(xiàn)用現(xiàn)作，現(xiàn)作現(xiàn)用，何需貯藏運輸呢？其四是液體菌種對出菇的影響。有人懷疑液體菌種物理攪拌造成菌體單核化，營養(yǎng)液體造成菌性變異退化等等。實際上，這些問題是多年前液體發(fā)酵中存在的問題，恰是我們現(xiàn)在技術(shù)已經(jīng)解決了的問題。氣體攪拌代替機械攪拌，天然有機物代替化學(xué)試劑，專用母種代替?zhèn)鹘y(tǒng)母種，并取消搖瓶工藝，從而保障了菌種的種性，使食用菌栽培產(chǎn)量質(zhì)量都有了保障。延續(xù)到今天。其五是簡單化認(rèn)識傾向。這種傾向和以上懷疑態(tài)度相反，認(rèn)為液體菌種好干，設(shè)備誰都可造，技術(shù)也沒啥，甚至把菌種培養(yǎng)的發(fā)酵都混為一談。有的人說搞幾個瓶子幾個塑料袋子都可生產(chǎn)液體菌種，有的人說單位和個把別人的罐買來一臺一解剖一模仿，就說出了科研成果，有的公司成立沒幾天，就稱“雄厚的實力”、“產(chǎn)業(yè)的龍頭”，請問這些人自己對液體菌種生產(chǎn)過沒有，用過沒有？竟敢向社會推廣，簡直是對科學(xué)的諷刺。（王德林）
1.試管的選擇：生產(chǎn)液體菌種時，試管的選擇非常重要，有好多的人就是在試管的選擇上出問題，總是做不出專用母種。在生產(chǎn)上，我們要求試管一是自己新生產(chǎn)的，再一個就是存放時間短的。長期存放的、上面長霉菌的，一定不能用。
2.三角瓶專用母種的制作：三角瓶專用母種其實很好做，就是有些人不求甚解，以為接上種就可以，其實這樣是永遠(yuǎn)都不會生產(chǎn)出三角瓶的。這里面的操作細(xì)節(jié)一定要掌握。
3.發(fā)酵罐的制作細(xì)節(jié)：發(fā)酵罐其實很好操作，只是做為一個最后的環(huán)節(jié)，它要求的是細(xì)節(jié)。操作規(guī)程上說的那些是對的，只是要想做得好，最好是學(xué)習(xí)一下。由老師親自做一次，注意哪個地方應(yīng)該特別小心，也就是細(xì)節(jié)要特別小心，可保成功率。
4.接種技術(shù)：接種技術(shù)對于固體來說應(yīng)該沒什么的，可以在液體菌種上，是有說法的。特別是一些特別品種，在接種時應(yīng)該特別注意。
5.栽培料的含水量和接種量的控制：這一項沒做好，是好多人做液體菌種失敗的一個重要原因。需要一些計算公式和方法。
液體菌種制作與士兵用槍射擊是一個道理，其實一般的人也會射擊，可是要想一槍斃命，正中眉心，就不是一般人能做到的了，要經(jīng)過系統(tǒng)的學(xué)習(xí)和訓(xùn)練。理論上說的是一回事，實際上做的又是一回事。
正常情況下，經(jīng)過系統(tǒng)培訓(xùn)的人，在做液體菌種時，成功率應(yīng)該在95%以上。能熟練掌握試管的制作、攪拌器和搖瓶機的液體菌種制作技術(shù)，能自己一個人操作液體菌種發(fā)酵罐、懂得不同品種的接種技術(shù)。經(jīng)常做的人，應(yīng)該在98%以上，甚至更高。這里面除了技術(shù)外，還有設(shè)備的問題。液體菌種的制作過程及方法
（一）試管種的生產(chǎn)：液體菌種對試管的純度要求很高。所以要自己會做試管種。
試管種的制作其實很簡單，在我們要用種的前三個月，到市場上去看哪個菇符合要求，就買回來（也可以用自己保存的試管種均可）。在接種箱內(nèi)進行常規(guī)氣霧（最好是高錳酸鉀和甲醛）消毒，30分鐘后，開始分離。分離時先將用具消毒，然后用手把菇體分開，用鑷子夾一小塊菇肉（不同的菇取種位置不同），放到試管里。塞上棉塞就行了。這樣的成功率一般在80%以上。在菌絲生長階段，要經(jīng)常觀察菌絲的生長情況。對菌絲生長不整齊的，有污染的，全部淘汰。只留下沒什么問題的，長滿試管后，再取特定部位進行轉(zhuǎn)管（見實操）。菌絲長到**cm時，從菌絲生長的尖端提取一小塊，一般地認(rèn)為，取****大小就可以了，不過從試驗上看，提得**效果越好。平菇一般提二次就可以了，提到五次，基本上與脫毒菌種效果差不多。別的品種要多些，最多不超過五次，都可以達(dá)到提純的目的。
?。ǘ┤瞧繉Ｓ媚阜N生產(chǎn)：專用母種分固體和液體兩種。
從生產(chǎn)技術(shù)上看，液體專用母種要難一些，是用電磁攪拌器或搖瓶機進行生產(chǎn)。整個過程要4-7天時間，生產(chǎn)的液體種稍經(jīng)加工就可以直接使用。
液體菌種專用母種的配方就是用PDA加富配方去掉瓊脂。用三角瓶盛裝，在高壓鍋里121℃保持30分鐘就行了。待三角瓶的溫度降到30℃以下時，在超凈工作臺或接種箱內(nèi)進行接種。馬上就可以進行攪拌或搖瓶了。
固體種生產(chǎn)時間要長些，保存的時間也長，而且方便運輸。固體專用母種一般污染要嚴(yán)重一些，有的人污染率要達(dá)到20-30左右。
固體專用母種我們現(xiàn)在一般不用，污染率太高，而且不好發(fā)現(xiàn)，最糟糕的是容易堵槍。配方是把木屑過20-40目的篩，用去掉瓊脂的PDA配方拌料，在121℃高壓下滅菌2小時，待溫度下降到30度以下時，在超凈工作臺或接種箱內(nèi)進行常規(guī)接種。一般20多天可以長好。具有運輸和貯存方便等特點。
攪拌器是應(yīng)用磁性材料N、S極的異性吸引，同性相斥的原理制成的。工作時，機械的磁轉(zhuǎn)子轉(zhuǎn)動時，瓶內(nèi)的磁轉(zhuǎn)子在瓶內(nèi)跟著轉(zhuǎn)，帶動液體旋轉(zhuǎn)，為液體供氧。液體菌種培養(yǎng)基本條件是有一定的氧氣、菌絲、水份和營養(yǎng)，幾個因素溶合才能使菌絲快速繁殖。由于轉(zhuǎn)子的高速旋轉(zhuǎn)，產(chǎn)生的菌絲被剪切成菌絲片段。
搖瓶機就是通過搖動液體，使空氣與水溶合，增加液體中的氧氣含量。通過搖動，液體在瓶內(nèi)翻滾，使菌絲滾動成菌球。發(fā)酵罐生產(chǎn)
生產(chǎn)時要先進行培養(yǎng)料的配制。配料時先將土豆去皮切片，與麩皮混合后用不銹鋼鍋煮熟并取汁，再將輔料KH2PO4、MgSO4等溶入，混勻后裝入罐中，也可將免煮培養(yǎng)基或公司提供的專用培養(yǎng)基直接加入到罐內(nèi)加熱滅菌，125℃維持40分鐘到一小時進行滅菌，滅菌結(jié)束后用冷水冷卻至30℃以下。將并瓶后的三角瓶專用種在火焰的保護下接到罐內(nèi)進行培養(yǎng)，培養(yǎng)時根據(jù)不同的菌種，設(shè)定適宜的溫度。
培養(yǎng)期間應(yīng)注意觀察菌球出現(xiàn)的時間、顏色和排出氣體的氣味等，壓力控制在**Mpa。如遇到停電，關(guān)閉排氣閥來保持罐中處于正壓狀態(tài)。來電后重新啟動，并打開排氣閥繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)過程中，可隨時采樣分析，幾天后待菌球密度符合要求時（從視鏡或排料觀察），即可接種。
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液體菌種生產(chǎn)結(jié)束后，在檢測合格的情況下，就要進行接種。接種前要先將接種槍、連接管道用棉花塞上，放到高壓鍋里進行滅菌。121℃20分鐘就行了。與此同時，將接種機打開工作。在接種時，前幾槍不要接到栽培袋里，應(yīng)該先噴到量筒里，以檢查接種量的大小。全部接種過程都要在接種機下進行。液體菌種的制作方法
液體菌種的生產(chǎn)方式可分為電磁攪拌法、搖瓶機法、簡易深層發(fā)酵（吹氧）法、發(fā)酵罐法。
1.電磁攪拌法比較簡單，投資也比較少，200元錢的投資就可進行生產(chǎn)。從接種到菌絲長好要7天時間。但也存在生產(chǎn)量小的缺點，所以生產(chǎn)中常用幾個攪拌器同時生產(chǎn)來加以解決。也可以用擴張法來加以解決。主要生產(chǎn)過程：在無菌條件下將試管種接到三角瓶里，攪拌4-7天后得到大量的菌種。
2.搖瓶機法也是一種比較簡單的方法，接種簡單，管理方便，生產(chǎn)量根據(jù)機器的設(shè)定而不同。投資要1000-3000元錢。但也存在噪音大等缺點。生產(chǎn)過程：在無菌條件下將試管種接到瓶內(nèi)，搖動。一般7天左右會出現(xiàn)大大量的菌球。
3.簡易深層發(fā)酵（吹氧）法相對來說比較麻煩一些，主要是器材的聯(lián)接要在無菌狀態(tài)下進行，如果哪個環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題，不能保證成功率。投資也要3000多元。生產(chǎn)過程：在無菌條件下將試管種接到容器內(nèi)，通氣培養(yǎng)7天，得到大量的菌球。
4.發(fā)酵罐法是目前要求最高的一種，涉及到好多方面的知識，很難自學(xué)成才，而且投資也高，一般要10000元以上。如果你的生產(chǎn)量大或是菌種場，建議你還是用發(fā)酵罐比較好。因為生產(chǎn)量大，很快就會把你的投資收回來，而且可以減輕你很多工作量。 發(fā)酵罐液體菌種的生產(chǎn)主要過程：專用母種的生產(chǎn)，時間在一周之內(nèi)。發(fā)酵罐接種后，一般品種在三到五天內(nèi)生產(chǎn)好。時間的長短一是看罐的大小，二是看品種。各有不同。需要說明的是電磁攪拌器生產(chǎn)的液體菌種是菌絲團，而搖瓶機法、簡易深層發(fā)酵（吹氧）法、發(fā)酵罐法生產(chǎn)出來的液體菌種一般是菌球。 — 、對液體菌種設(shè)備的認(rèn)識 液體菌種設(shè)備已經(jīng)基本完善，可以開展規(guī)?；a(chǎn) 食用菌液體菌種設(shè)備不論大小原理都一樣，培養(yǎng)容器（瓶、罐） 加無菌供氣系統(tǒng)，看似簡單的設(shè)備各生產(chǎn)廠家的設(shè)計都有不同，如罐 的形狀、空氣的過濾層次、罐內(nèi)液體的循環(huán)、滅菌溫度的均勻性等。
多品種規(guī)?；a(chǎn)證明液體菌種生產(chǎn)技術(shù)已經(jīng)成熟。 技術(shù)是生產(chǎn)應(yīng)用液體菌種成功與否的關(guān)鍵， 相同的設(shè)備不同的人 員操作結(jié)果大不一樣，有的可以連續(xù)幾個月生產(chǎn)不會出現(xiàn)污染，而有 的可能罐罐都污染，菌種質(zhì)量的優(yōu)劣也相差很大。
三、液體菌種與栽培技術(shù)的結(jié)合問題 3-3 液體菌種優(yōu)勢的利用 如果將菌液噴滿料表面，菌種萌發(fā)就可以封面，可以有效控制雜菌污 染；如果采用插入式接種可以將菌種接到料的深處，可以明顯縮短養(yǎng) 菌時間；小麥菌種在接入液體菌種后搖動使麥表粘滿菌種，幾天即可 長滿菌絲，十天即可使用，可以解決生產(chǎn)急用。
液體菌種的幾種接種方法
液體菌種具有方便快捷菌齡短而一致純度高活力強等優(yōu)點， 越來 越受科研工作者和廣大食用菌生產(chǎn)者的重視， 但如何正確使用液體菌 種尚未見系統(tǒng)報道． 液體菌種培養(yǎng)好后接種方法直接影響液體菌種優(yōu)勢的發(fā)揮，甚至關(guān)系到生產(chǎn)的成?。覀冊谝?guī)模應(yīng)用液體菌種接種中 使用過多種接種方法， 各有特點， 下面就幾種成功的方法介紹給大家． 一 料表面接種法：這是目前采用比較多的方法,采用這種接種 方法時多為瓶裝或袋裝培養(yǎng)料，上端有一定的空間，如生產(chǎn)金針菇茶 薪菇黑木耳杏鮑菇菌包以及生產(chǎn)香菇雞腿菇平菇等各種菌種， 接種時 盡量將料表面噴淋上菌種，液種萌發(fā)生長快，封面早雜菌污染的機會 很小，除破袋外菌袋污染的機會極低，甚至以萬袋計算可以達(dá)到零污 染．這種方法的菌球處于氧氣充足的條件下生長很好． 二 表面加槍頭插入式接種法： 因表面接種法接種時菌球易被培 養(yǎng)料的過濾作用阻滯在料的上半部分，菌絲生長需要從上往下生長， 不能在料內(nèi)上下同時生長．如果將接種槍槍頭做成管狀插入料內(nèi)接 種， 菌球在料內(nèi)同時生長， 可以縮短發(fā)菌時間一半左右， 甚至更多． 這 種方法一要注意料內(nèi)氧氣的供應(yīng)（不適應(yīng)扎口袋），二要注意接種環(huán) 境的無菌要求，避免菌種不萌發(fā)或槍頭帶入雜菌造成污染．如生產(chǎn)中 香菇菌棒從兩端中心插入接種時即使不封口， 菌棒中段的菌種也不易 萌發(fā)． 這種方法曾在低溫季節(jié)大量接種香菇雞腿菇金針菇平菇等菌種, 成品率在 98-100%,縮短時間一半以上. 三 袋表面扎孔接種法：長菌棒從兩端接種不能縮短養(yǎng)菌時間， 從袋的表面一面或兩面）用槍頭扎入３－５cm 深并同時接種，扎孔 間隔根據(jù)需要確定，如香菇每棒扎３－５個孔，這種方法調(diào)節(jié)接種量 和孔間距離可以達(dá)到縮短養(yǎng)菌時間和減少雜菌污染的目的， 缺點是用 種量大，每個孔的接種量不少于１０ml,接種后不封口的應(yīng)達(dá)到每孔２０ml 以上．這種方法 2007 年大量生產(chǎn)香菇出菇菌棒,成品率高達(dá) 99%以上 四 袋壁內(nèi)噴射接種法： 長菌棒還可以采取從兩端一則用槍頭分 別扎入到袋薄膜內(nèi)，從料與塑料薄膜之間噴射菌種（要求液體壓力達(dá) 到１kg/cm２以上），噴射后用手按壓分散菌種，使菌棒一則布滿菌 種，待菌絲生長１－３cm 后可以扎孔增氧．這種方法可以覆蓋較大 的料表面，發(fā)菌快袋面微孔污染小，缺點是用種量大，每噴射一次用 種多在１００ml 左右．而且在配料時就要注意減少培養(yǎng)料的含水 量．這種方法在香菇生產(chǎn)上應(yīng)用比較成功．是我們在第三種方法的基 礎(chǔ)上改進的方法,期望今后適應(yīng)開放接種的需要. 五 接種后搖動接種法： 顆粒菌種培養(yǎng)基接液體菌種最能發(fā)揮快 速發(fā)菌的優(yōu)勢， 液體菌種接入玻璃瓶后旋轉(zhuǎn)或搖動使液體流動粘到每 粒顆粒上，在適合溫度下三天即可長滿菌絲，繼續(xù)培養(yǎng)幾天讓菌絲深 入顆粒內(nèi)部后即可用于生產(chǎn)．這種方法可以在急需用種時使用． 液體菌種對不良環(huán)境的抵抗力不如固體菌種（如耐缺氧能力不 強），采用發(fā)酵料，生料栽培或塑料袋熟料開放式拌料栽培往往不易 成功.液體菌種生產(chǎn)技術(shù)與食用菌栽培技術(shù)的很好結(jié)合才能發(fā)揮液體 菌種的優(yōu)勢 以上方法可以靈活運用， 如生產(chǎn)蛹蟲草時由于培養(yǎng)液中含有大 量由菌絲產(chǎn)生的孢子，接種時只要液體流到的地方都會有菌絲生長， 無論是薄料生產(chǎn)子實體還是厚料生產(chǎn)菌絲體粉都可以朝料表噴一下 液體菌種即可．液體菌種推廣的必然性
1、 菌種生產(chǎn)方式落后已成為影響行業(yè)進步的瓶頸傳統(tǒng)的固體菌種三級四級地代代轉(zhuǎn)接，一轉(zhuǎn)就是半年。生產(chǎn)中前怕污染，后怕老化，煙薰火燒，繁瑣復(fù)雜。今天好了明天不一定好，東家好西家不一定好，少干了還行，一上規(guī)模就出問題。由于固體菌種純度低萌發(fā)遲緩，污染居高不下，大面積污染的地區(qū)數(shù)不勝數(shù)。到了出菇時袋與袋之間菌絲參差不齊，即使是同一袋內(nèi)，菌絲的菌齡上下也相差懸殊，上面的菌絲已經(jīng)老化，而下面的還沒長滿，出菇難以集中，產(chǎn)品質(zhì)量差，管理費用高。2、產(chǎn)業(yè)發(fā)展需要菌種生產(chǎn)方式的創(chuàng)新我國食用菌產(chǎn)業(yè)今后的發(fā)展主要有三種趨勢：一是標(biāo)準(zhǔn)化；二是工廠化；三是周年化。但是建筑在固體菌種的基礎(chǔ)上來談標(biāo)準(zhǔn)化、工廠化、全年化，那無異于空中建樓閣。3、市場需求呼喚生產(chǎn)方式的創(chuàng)新據(jù)中國菌協(xié)報道，我國近年來，食用菌出的量度在下降、產(chǎn)值在下降，近五年來出的貿(mào)易下降，損失了50億人民幣。另據(jù)中國菌協(xié)報道，我國食用菌2002年部產(chǎn)已達(dá)870萬噸占世界65%。那么是我國食用菌供過于求了嗎？我國只有實現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化、工廠化、全年化生產(chǎn)，才能從生產(chǎn)大國發(fā)展到生產(chǎn)強國。面實現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化、工廠化、全年化生產(chǎn)，首先得解決機械化、設(shè)施化問題。液體菌種是整個食用菌生產(chǎn)的源頭，液體菌種技術(shù)設(shè)備的研究與應(yīng)用就是標(biāo)準(zhǔn)化菇廠的入門證。是我國菌業(yè)振興，立于國際菌業(yè)強國之林而不敗的有力武器。液體菌種研究推廣形勢
1、設(shè)備越來越精一是型號越來越多。既有每罐生產(chǎn)幾十升可接種一、兩千袋的“家庭型”罐，也有每罐生產(chǎn)幾百升可接種一、兩萬袋的菇廠、菌種廠用罐。我國食用菌生產(chǎn)發(fā)展正處于上升時期，普通菇農(nóng)生產(chǎn)大戶和大小菇廠（場）同時并存，設(shè)備型號多才能適應(yīng)我國食用菌發(fā)展現(xiàn)狀，才適合現(xiàn)階段食用菌的國情。二是功能越來越好。目前全禾液體菌種培養(yǎng)器不僅解決了自動控制，還實現(xiàn)了電腦遠(yuǎn)程集成監(jiān)控，不怕停電，停電20小時之內(nèi)機器照常運轉(zhuǎn)；能實現(xiàn)定量接種，誤差不到+0.5毫升，能與全自動液體菌種接種機相連接，整筐（12袋）一次性接種，6秒鐘完成。2、是工藝越來越先進目前已實現(xiàn)人工栽培的食用菌品種已達(dá)四、五十種，這些品種液體菌種生產(chǎn)的培養(yǎng)基配方、培養(yǎng)條件、工藝及設(shè)備控制各有不同，目前全禾菌業(yè)除常規(guī)品種制種工藝完成之外，對一些難度較大的品種也已獲新的突破。3、推廣普及正在深入液體菌種在我國推廣應(yīng)用的四年時間，基本消除了食用菌生產(chǎn)者對其懷疑觀望心理，得到了行業(yè)的認(rèn)可。不僅各省、市、自治區(qū)都得到推廣應(yīng)用，還輻射到了其他國家和地區(qū)。目前全禾液體菌種培養(yǎng)器已銷往加拿大、法國、馬來西亞、韓國和我國臺灣等十八個國家和地區(qū)，得到國外同業(yè)人士的稱贊，這也是我國對世界食用菌行業(yè)的又一貢獻(xiàn)。4、液體菌種正朝著標(biāo)準(zhǔn)化方向邁進中國食用菌協(xié)會與國家相關(guān)部門正在加強和推進食用菌標(biāo)準(zhǔn)化建設(shè)，制定了從制種的培養(yǎng)基、各級菌種、生產(chǎn)工藝、生產(chǎn)設(shè)備和食用菌產(chǎn)品等一系列標(biāo)準(zhǔn)。在目前食用菌液體菌種的國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)尚未確定的情況下，科研單位制定和實施企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)十分重要。目前全禾液體菌種設(shè)備、工藝、菌種及接種設(shè)備、技術(shù)先后制定了六項企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，對規(guī)范液體菌種的推廣應(yīng)用起到了積極有效的作用。
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