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　　1.3  統(tǒng)計學方法 

　　采用SPSS 10.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析。計量資料實驗數(shù)據(jù)用x±s表示。以方差分析檢驗各組均數(shù)間的差異性，組間比較使用最小顯著差異（LSD）法。若方差不齊時改用GamesHowell校正檢驗。P<0.05視為差異有統(tǒng)計學意義。

　　2  結  果

　　2.1  對荷瘤裸鼠的體內抑瘤作用 

　　DDP組和綜合治療組的抑瘤率均>50%，兩者的平均瘤質量與模型組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01），綜合治療組的抑瘤率大于化療組的抑瘤率，但兩者之間的平均瘤質量比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。肺巖寧方組的抑瘤率為34.17%，平均瘤質量與模型組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表1。表1  各組荷瘤裸鼠瘤質量及抑瘤率（略）

　　2.2  各組腫瘤組織中HIF1α mRNA表達 

　　綜合治療組HIF1α mRNA表達低于模型組，兩者比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），但肺巖寧方組、化療組與模型組HIF1α mRNA表達差異無統(tǒng)計學意義。見表2和圖1。表2  各組荷瘤裸鼠腫瘤組織HIF1α mRNA的表達（略）

　　2.3  HIF1α和pAkt蛋白表達
 
　　DDP組、肺巖寧方組和綜合治療組HIF1α蛋白表達低于模型組(P<0.01)，綜合治療組的表達最低。肺巖寧方組和綜合治療組pAkt表達均顯著低于模型組（P<0.05）。見表3和圖2、3。表3  各組荷瘤裸鼠腫瘤組織中HIF1α和pAkt蛋白表達（略）

　　3  討  論

    對人類腫瘤標本的免疫組化分析顯示，在大多腫瘤組織中HIF1α呈過度表達，HIF1α的表達與腫瘤細胞的增殖、浸潤及轉移能力相關，其高表達常提示不良的預后［2, 3］。在缺氧應激反應中，HIF1α是信號傳遞過程中極為重要的因子，調控的靶基因涉及細胞的生長、糖代謝、氧的轉運和利用等多個方面。PI3K/Akt是近年發(fā)現(xiàn)的信號傳遞因子。Akt使HIF1α轉錄活性增強是通過使細胞內可利用的蛋白池量增加來實現(xiàn)的［4］。蛋白水平下降將導致HIF1α DNA結合能力下降，且對其下游目的基因的調控能力下降。而PI3K/Akt通路表達增強或對Akt負性調控基因PTEN阻斷后，在多種細胞類型中，HIF1α蛋白水平、DNA結合或轉錄活性均有增加［5］。抑制HIFlα的表達已經(jīng)成為腫瘤治療的新思路，作為新的抗腫瘤靶點正在進行藥物研制開發(fā)。
   
　　從肺癌診斷分期來看，大多數(shù)患者一經(jīng)發(fā)現(xiàn)就為中晚期。中晚期肺癌患者，素體本虛，臟腑失調，邪毒盤踞，加之“久病及腎”，損耗腎中精氣，導致腎陰陽失調。故晚期肺癌多見動則氣喘，腰酸膝軟，食欲不振，舌淡苔少，脈沉細無力等，屬精氣虧虛，癌毒蘊結。因此，精氣虧虛是肺癌發(fā)生、發(fā)展的重要內在因素。據(jù)此，徐振曄教授提出了以益氣養(yǎng)精為主治療晚期非小細胞肺癌的學術觀點，抓住肺癌患者本虛標實的病機，益氣養(yǎng)精為主，兼以解毒抗癌，達到治病求本、標本兼顧的目的。肺巖寧方中生黃芪為補氣要藥，藥理研究證明其能提高免疫系統(tǒng)功能，具有抑癌作用，與補氣健脾之白術合用，共補肺脾腎之虛；黃精補腎益精，滋補肺脾，與女貞子二藥合用，滋腎養(yǎng)陰，補益肺肝脾之陰虛；仙靈脾補腎壯陽，山萸肉補精助陽，二藥與黃精、女貞子并用，寓“陰中求陽”、“陽中求陰”之義；石見穿、七葉一枝花、蜂房攻毒消腫，散結抗癌。諸藥合用，共奏益氣養(yǎng)精、解毒散結之效。臨床研究表明肺巖寧方能夠穩(wěn)定晚期肺癌瘤體，抑制腫瘤侵襲和轉移，提高患者的生存質量，延長生存期，在抗肺癌轉移方面確有良好療效［6, 7］。
   
　　本研究通過肺巖寧方治療A549荷瘤裸鼠，結果提示，化療組和綜合治療組的抑瘤率均大于50%，兩者的平均瘤質量與模型組比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。肺巖寧方組的抑瘤率為34.17%，平均瘤質量低于模型組（P<0.05）。說明肺巖寧方具有一定的抑制腫瘤生長的作用，肺巖寧方和順鉑在抑制腫瘤生長方面有協(xié)同作用。RTPCR和免疫組化實驗表明，肺巖寧方并沒有明顯抑制HIF1α mRNA表達的作用，但可以顯著減少HIF1α蛋白的表達。同時也觀察到肺巖寧方可以下調pAkt蛋白的表達。由此提示肺巖寧方對HIF1α蛋白表達的抑制作用可能與下調pAkt蛋白表達有關，從而影響下游基因的表達，達到控制腫瘤生長的目的。
   
　　惡性腫瘤的靶向治療已經(jīng)成為研究熱點，目前認為以HIF1α為選擇性治療靶點是可行的。但中藥對HIF1α信號途徑的作用研究尚不多見，本研究為進一步研究肺巖寧方抑制血管生成的有效成分提供了線索。此外，由于中藥的組成比較復雜，其抗腫瘤作用是多靶點和多通道的，對于該方的作用機制仍然值得進一步研究。

　　徐振曄, 王中奇, 朱晏偉, 等. 肺巖寧方對晚期非小細胞肺癌生長轉移和血清VEGF的影響. 上海中醫(yī)藥大學學報. 2003; 17(3): 1822.