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其中一種對白對蝦功效非常強，也很受歡迎的草藥提取物，那就是蓮心提取物。在本文范圍內(nèi)，我們將分享這種草藥在養(yǎng)殖南美白對蝦中的神奇用途。

穿心蓮，還有許多其他名稱，如：Nhat Kien Hy、public、Nguyen Cong、Lam Kau Lien……，學名：Andrographis paniculata；屬于爵床科。

原產(chǎn)于南亞國家，為垂直生長的草本植物，多分枝，平均高度0.3～0.8m。葉子成對成長、葉片卵形、長圓形或略披針形，兩端尖。葉子長3-12厘米，寬3.5厘米。

穿心蓮提取物

花朵以圓錐花序的形式生長在樹枝的尖端，花是白色的，也有粉紅色。果實長，稍光滑，長15毫米，寬3.5毫米，圓柱的形狀。

穿心蓮在我國廣東、福建等地生長，也是多國衛(wèi)生部鼓勵種植的70種藥材之一。穿心蓮的整個身體用來制藥，收獲后，將它們剪短并干燥以保存。

穿心蓮提取物是從穿心蓮的莖、植物和葉中提取的一系列藥用材料，用作生產(chǎn)功能性食品的原料、食品補充劑的原料、化妝品、飲料的原料，以及水產(chǎn)養(yǎng)殖中的許多應用（作為水產(chǎn)飼料、水產(chǎn)藥物）。

溶藻弧菌（V. alginolyticus）是導致全球?qū)ξr大量死亡的主要病原菌之一，影響對蝦的能量代謝、免疫反應和發(fā)育。在禁止使用抗生素的背景下，開發(fā)一種可以保護蝦免受溶藻弧菌感染的藥物至關重要。

穿心蓮提取物（Cybernacle Lienographolide Extract）是傳統(tǒng)草藥，具有抗菌、抗氧化、免疫調(diào)節(jié)等多種生物功效。在本研究中，我們研究了穿心蓮提取物對南美白對蝦（L. vannamei）生長、免疫和對溶藻弧菌感染的抵抗力的影響，并闡明了潛在的分子機制。

實驗的4種飼料是，分別在飼料中添加劑量為0g/kg（對照組）、0.5g/kg、1g/kg和2g/kg的穿心蓮提取物。在為期4周的喂養(yǎng)試驗中，將每種飼料隨機喂給一組蝦，每組蝦有3個試驗罐。結(jié)果表明，穿心蓮提取物改善了蝦的生長性能和非特異性免疫功能，另外，飼喂穿心蓮提取物的南美白對蝦在受到溶藻弧菌攻擊后、表現(xiàn)出較低的死亡率。

總的來說，穿心蓮提取物可促進南美白對蝦的生長和免疫力，并通過ROS-JNK依賴性途徑調(diào)節(jié)炎癥和細胞凋亡來保護蝦免受溶藻弧菌的侵害。這些結(jié)果增進了對溶藻弧菌感染發(fā)病機制的認識，并為開發(fā)有效抗溶藻弧菌藥物提供了線索。

1、準備測試飼料

四種試驗日糧為基礎飼料（對照組），基礎日糧每1kg飼料添加0.5g、1g和2g穿心蓮提取物。穿心蓮提取物在質(zhì)量、同批次、同生產(chǎn)時間上生產(chǎn)。

2、實驗設計

健康的蝦（南美白對蝦）不含細菌和病毒。他們在裝有10±1ppt海水的曝氣系統(tǒng)中的玻璃纖維罐中適應了7天。馴化期間，每天用商品飼料喂蝦3次（08:00、14:00和20:00）。

選擇處于蛻殼階段的蝦進行實驗，將240尾南美白對蝦（重量2.311±0.105g）隨機分配至12個100L玻璃罐（每種飼料有3個玻璃罐）。

實驗飼料每組每天喂食3次（08:00、14:00和20:00），持續(xù)4周。每日投喂量為體重的5%–8%，并根據(jù)上一次的投喂反應進行調(diào)整。實驗期間，水溫保持在28±2°C，鹽度保持在10±1ppt，pH保持在8.2±0.2。

經(jīng)過4周的飼養(yǎng)試驗之后，所有蝦禁食24小時，然后稱重，計算增重（WG）、特定生長率（SGR）、飼料轉(zhuǎn)化率（FCR）和存活率（SR）。

1、補充穿心蓮提取物對白蝦生長性能的影響

每1kg飼料中添加0.5g穿心蓮提取物的南美白對蝦，其WG和SGR顯著高于飼喂0g/kg、1g/kg和2g/kg 飼料的蝦。同時，0.5g/kg穿心蓮提取物組的FCR為2.292±0.064，顯著低于另一組 (p < 0.05)。

表1. 南美白對蝦添加不同水平穿心蓮提取物的飼料中4周的生長性能。

筆記：

Andr.：穿心蓮提取物;

WG，增重率;

SGR，特定增長率；

FCR，飼料轉(zhuǎn)化率；

SR，生存率。

圖1：南美白對蝦的 WG (%) (A)、SGR (%) (B)、FCR (C) 與不同水平的穿心蓮提取物之間的關系。

2、穿心蓮提取物對南美白對蝦免疫相關基因的影響

為了進一步探討穿心蓮提取物對南美白對蝦免疫的作用，通過RT-qPCR研究了喂食穿心蓮提取物4周后多種免疫相關基因的表達，如圖3所示。

飼料中添加0.5g/kg穿心蓮提取物后，無論是在造血細胞還是肝胰腺細胞中，大多數(shù)影響體液免疫的免疫影響基因的表達顯著增加，包括：免疫功能蛋白（LSZ、PO 和 SOD）、抗菌肽（ALF1、PEN3 和 cruin）和抗氧化蛋白（GST、GPX 和 CAT）（圖3）。

圖3：穿心蓮提取物對南美白對蝦肝細胞和肝胰腺中免疫相關基因的影響。

3、穿心蓮提取物對南美白對蝦肝臟抗氧化能力的影響

蓮花提取物顯著增強白對蝦血漿和肝胰腺中的SOD活性（圖 4A、E）。然而，0.5g/kg和1g/kg穿心蓮提取物組間和對照組之間的SOD活性沒有顯著差異。

隨著穿心蓮提取物水平的增加，T-AOC和CAT活性的能力最初增加，隨后下降，與對照組相比，飼喂0.5g/kg穿心蓮提取物的蝦組顯著較高（圖4B、C、F、G）。

肝胰腺中MDA含量隨著飼料穿心蓮提取物的增加而逐漸降低，其中0.5g/kg、1g/kg和2g/kg穿心蓮提取物的值顯著低于對照組（圖2）。

飼喂穿心蓮提取物組的蝦血漿MDA含量顯著低于對照組（圖4H），但MDA濃度在1g/kg組中最低，在2g/kg組中略有增加。

圖4：飼料穿心蓮提取物對南美白對蝦血漿和肝胰腺抗氧化指數(shù)的影響。

4、穿心蓮提取物可減少南美白對蝦因溶藻弧菌感染引起的氧化損傷和炎癥反應

為了研究穿心蓮提取物對南美白對蝦溶藻弧菌感染的影響，對用穿心蓮提取物養(yǎng)殖28天的蝦，進行了溶藻弧菌攻擊試驗（圖5）。

圖5：穿心蓮提取物可減少南美白對蝦中因溶藻弧菌感染引起的氧化損傷和炎癥反應。

結(jié)果表明，飼喂含穿心蓮提取物飼料的對蝦感染溶藻弧菌后存活率顯著高于對照組。對照組、0.5 g/kg、1g/kg、2g/kg穿心蓮提取物組，在溶藻弧菌感染后7天的存活率分別為0%、77.7%、22.2%和0%（圖5A）。

采用流式細胞儀檢測南美白對蝦造血活性氧水平，探討穿心蓮提取物對溶藻弧菌感染引起的南美白對蝦氧化損傷的影響。結(jié)果表明，喂食穿心蓮提取物組的蝦造血細胞中ROS的誘導低于對照組（圖1）。

同時，測量造血細胞和肝胰腺細胞中TNFα和IL-1β的基因表達。溶藻弧菌感染后對蝦造血和肝胰腺炎癥因子TNFα和IL-1β的表達顯著上調(diào)。飼喂0.5 g/kg穿心蓮提取物可顯著抑制溶藻弧菌誘導的炎癥因子的上調(diào)（圖5E，F(xiàn)）。然而，添加1g/kg和2g/kg的穿心蓮提取物，并沒有顯示出對血細胞的抗炎作用。

5、穿心蓮提取物抑制南美白對蝦溶藻弧菌感染引起的細胞死亡

qRT-PCR檢測造血細胞和肝胰腺細胞中凋亡相關基因的表達（圖1）。感染溶藻弧菌的蝦的造血和肝胰腺中促死亡基因（Bax、caspase3 和p53）的表達顯著上調(diào)。

圖6：穿心蓮提取物抑制南美白對蝦中溶藻弧菌感染引起的細胞死亡

感染溶藻弧菌后，與對照組相比，飼喂蓮花提取物（0.5g/kg、1g/kg和2g/kg）的蝦的細胞死亡率顯著降低（圖 6D）。

同樣，蝦肝胰腺中TUNEL陽性細胞的百分比表明，溶藻弧菌感染后細胞凋亡增加。與對照組相比，攝食含有穿心蓮提取物的蝦，肝胰腺中TUNEL陽性細胞的百分比顯著降低（圖6E，F(xiàn)）。

圖7：穿心蓮提取物對溶藻弧菌誘導的炎癥和細胞凋亡的抑制機制的示意圖。

細菌感染是降低養(yǎng)殖對蝦生長的重要生物學因素。溶藻弧菌是導致全世界蝦大規(guī)模死亡的主要病原體之一，影響能量代謝、免疫反應和蝦發(fā)育，我們前期的研究表明，感染溶藻弧菌會影響對蝦的生存、生長和代謝，誘導ROS產(chǎn)生、細胞凋亡和自噬，降低免疫功能，并誘導DNA損傷。

因此，尋找一種能夠保護蝦免受溶藻弧菌侵害的藥物至關重要。然而，穿心蓮提取物是治療多種感染性疾病的一種有前途的療法，具有抗炎、抗氧化和免疫調(diào)節(jié)功能。然而，關于穿心蓮提取物對南美白對蝦溶藻弧菌的感染作用及其生化機制知之甚少。在本研究中，結(jié)果表明，穿心蓮提取物可促進南美白對蝦的生長和免疫力，同時還通過ROS-JNK依賴性途徑調(diào)節(jié)炎癥和細胞凋亡，保護蝦免受溶藻弧菌的侵害。菌感染發(fā)病機制的認識，并為開發(fā)有效抗溶藻弧菌藥物提供了線索。