科赫法則(Koch postulates)又稱證病律,通常是用來(lái)確定侵染性病害病原物的操作程序。
科赫法則是偉大的德國(guó)細(xì)菌學(xué)家羅伯特·科赫(Robert Koch,1843~1910年)提出的一套科學(xué)驗(yàn)證方法,用以驗(yàn)證了細(xì)菌與病害的關(guān)系,被后人奉為傳染病病原鑒定的金科玉律。它為病原微生物學(xué)系統(tǒng)研究方法的建立奠定了基礎(chǔ),使其成為一門獨(dú)立的學(xué)科。它作為一種研究方法,可能多少已經(jīng)受到現(xiàn)代研究方法的沖擊而顯得意義不再;但是作為一種研究思路,對(duì)人們建立嚴(yán)謹(jǐn)?shù)乃伎剂?xí)慣還是極有意義的。
科赫法則(Koch postulates)又稱證病律,通常是用來(lái)確定侵染性病害病原物的操作程序。
科赫法則(Koch's postulates)包括:
1 在每一病例中都出現(xiàn)相同的微生物,且在健康者體內(nèi)不存在;
2 要從寄主分離出這樣的微生物并在培養(yǎng)基中得到純培養(yǎng)(pure culture);
3 用這種微生物的純培養(yǎng)接種健康而敏感的寄主,同樣的疾病會(huì)重復(fù)發(fā)生;
4 從試驗(yàn)發(fā)病的寄主中能再度分離培養(yǎng)出這種微生物來(lái)。
如果進(jìn)行了上述4個(gè)步驟,并得到確實(shí)的證明,就可以確認(rèn)該生物即為該病害的病原物。
1893年發(fā)現(xiàn)有些霍亂帶原者以及傷寒瑪莉等案例并無(wú)任何癥狀表現(xiàn),因此科赫后來(lái)又將第一條原則后半刪去。后來(lái)在小兒麻痹、皰疹、艾滋病、丙型肝炎都有類似發(fā)現(xiàn),甚至今日幾乎所有醫(yī)師和病毒學(xué)家都認(rèn)同小兒麻痹病毒只會(huì)對(duì)少數(shù)感染者造成癱瘓。
第三條原則也同樣不盡完美,科赫本身也在1884年發(fā)現(xiàn)霍亂、結(jié)核等疾病未必能在不同個(gè)體產(chǎn)生相同表現(xiàn),以今日之觀點(diǎn),艾滋病毒無(wú)法感染CCR5 Δ32基因刪除的個(gè)體。
科赫氏法則發(fā)展于十九世紀(jì),是以當(dāng)時(shí)技術(shù)水平能用來(lái)辨認(rèn)病原體的技術(shù)通則。但科赫生活的年代,已有許多疾病明顯和某些物質(zhì)相關(guān),卻無(wú)法符合這套法則的檢驗(yàn)。而過(guò)于信任這套研究方法的學(xué)界,也在無(wú)法透過(guò)培養(yǎng)基分離培養(yǎng)病毒的情況下,導(dǎo)致病毒學(xué)發(fā)展窒礙難行。目前,已有不少疾病證實(shí)為某種病原體造成,卻不能滿足柯霍提出的理論。因此,雖然科赫氏法則在史上占有一席之地,也持續(xù)對(duì)微生物診斷有所幫助,但目前已不要求必須完全符合四項(xiàng)準(zhǔn)則考驗(yàn)的研究了。
柯赫氏法則已被移植并成為植物病理學(xué)中一項(xiàng)經(jīng)典法則
1. 共存性觀察:被疑為病原物的生物必須經(jīng)常被發(fā)現(xiàn)于病植物體上。
2.分離:必須把該生物從病植物體分離出來(lái),在培養(yǎng)基上養(yǎng)成 對(duì)于病毒這類特殊的病原體,有如下修改: To summarize, we can say that a virus is causing a disease if any one of the following conditions is satisfied: 1. Virus isolation from blood, tissue, cerebrospinal fluid, or any specific lesion other than from the gastro-intestinal tract; together with a demonstrable rise of serum antibodies. 2. (a) Isolation of a virus from stool, throat swabs or sputum with a high frequency during an outbreak of illness. (b) A significant increase of specific antibodies during the course of the illness. (c) Absence or low incidence of that virus in a control population. 3. Histological demonstration of pathognomonic lesions such as inclusions in pathological material. In order to demonstrate the etiological relationship of the virus to a particular clinical syndrome it must further be shown that there is an appropriate time relationship of the isolation or specific lesion to an appropriate phase of the clinical illness. 從植物上發(fā)現(xiàn)一種病原物,如果原來(lái)已知這種病原物能引起某種病害,就可以參考專門手冊(cè)鑒定這種病原物,病害的診斷即告完成。但如果看到的這種生物可能是引起病害的病原物,而以前又沒有資料來(lái)支持這個(gè)結(jié)論,那就需要采用柯赫法則來(lái)證明這種推測(cè)。 柯赫法則常用于侵染性病害的診斷和鑒定,特別是新病害的鑒定。非專性寄生物,如絕大多數(shù)植物病原菌物和細(xì)菌所引致的病害,可以很方便地應(yīng)用柯赫法則來(lái)進(jìn)行診斷和鑒定。至于一些專性寄生物如植物線蟲、病毒、菌原體、霜霉菌、白粉菌和銹菌等,由于目前還不能在人工培養(yǎng)基上培養(yǎng),以往常被認(rèn)為不適合于應(yīng)用柯赫法則,但現(xiàn)在也已證明柯赫法則也同樣可以適用于這些生物所致病害,只是在進(jìn)行人工接種時(shí),直接從病株組織上取線蟲、孢子,或采用帶病毒或菌原體的汁液、枝條、昆蟲等進(jìn)行接種。但病毒和菌原體的接種需要搞清傳播途徑。當(dāng)接種株發(fā)病后,再?gòu)脑摬≈晟先【€蟲、孢子,或采用帶病毒或菌原體的汁液、枝條、昆蟲等,用同樣方法再進(jìn)行接種,當(dāng)?shù)玫酵瑯咏Y(jié)果后才可證實(shí)該病的病原為這種線蟲、這種菌物、或這種病毒。因此,所有侵染性病害的診斷與病原物的鑒定都必須按照柯赫法則來(lái)驗(yàn)證。 柯赫法則同樣也適用來(lái)對(duì)非侵染性病害的診斷,只是以某種懷疑因素來(lái)代替病原物的作用。例如,當(dāng)判斷是缺乏某種元素引起病害時(shí),可以用適當(dāng)?shù)姆椒ㄑa(bǔ)施該種元素;如果處理后植株癥狀得到緩解或消除,即可確認(rèn)病害是因缺乏該元素所致。
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