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　　來源：學(xué)術(shù)經(jīng)緯

　　今日對于研究大腦的科學(xué)家們來說，是具有里程碑意義的一天。在最新出版的《科學(xué)》雜志上，由麻省理工學(xué)院（MIT）和霍華德·休斯醫(yī)學(xué)研究所（HHMI）的科學(xué)家們領(lǐng)銜的一支團(tuán)隊，成功對果蠅的完整大腦進(jìn)行了成像，清晰度達(dá)到了納米級！這讓我們能夠看清大腦中，不同的神經(jīng)細(xì)胞，乃至蛋白質(zhì)在空間上的相對分布，對基礎(chǔ)科研有著極為重要的意義。

　　這一重磅研究，也登上了本期《科學(xué)》的封面。

　　嬰兒尿布與大腦研究

　　本研究的通訊作者之一是MIT的知名科學(xué)家Edward S。 Boyden教授。他最初因在光遺傳學(xué)上的研究而聞名于世，最近幾年則在大腦成像領(lǐng)域有著諸多突破性的貢獻(xiàn)。2015年，他獲得了有“科學(xué)界奧斯卡”之稱的“科學(xué)突破獎”（Breakthrough Prize）。2018年，他也獲得了有諾貝爾風(fēng)向標(biāo)稱號的蓋爾德納獎。

Edward S。 Boyden教授是本研究的通訊作者之一（圖片來源：Edward S。 Boyden教授課題組）

　　在2015年左右，Boyden教授團(tuán)隊向解析大腦的高清結(jié)構(gòu)發(fā)起了沖鋒，目標(biāo)是理清大腦在細(xì)胞、乃至蛋白層面上如何進(jìn)行組合。為了實現(xiàn)這一目標(biāo)，科學(xué)家們開發(fā)了一種看起來很有趣的研究方法：他們首先往大腦組織樣本中注射一種膠狀物質(zhì)，隨后讓這些凝膠吸水膨脹，把大腦撐開。

　　從原理上看，這和嬰兒尿布中的材料吸水膨脹，有著異曲同工之妙。

　　這種看起來簡單的方法，在解析大腦結(jié)構(gòu)中扮演了重要的角色。在長、寬、高的維度上膨脹擴(kuò)大2倍，整個體積就會擴(kuò)大8倍。由于膨脹后的大腦組織更為松散，對其進(jìn)行顯微觀察就成為了可能。更關(guān)鍵的是，大腦樣本中的這些神經(jīng)細(xì)胞，相對位置被凝膠所固定，并不會發(fā)生變化。

果蠅大腦的擴(kuò)大過程（圖片來源：參考資料[1]）

　　正是因為這一突破，針對特定的大腦細(xì)胞或小型大腦區(qū)域，我們已經(jīng)獲得了不少“高清地圖”。

　　兩種顯微技術(shù)的合力

　　在體積較小的大腦樣本中取得的成功，并不一定能被復(fù)制到大型腦組織里。這是因為樣本的體積越大，就越難對深埋其中的特定部分進(jìn)行成像。如果單純?yōu)榱恕包c(diǎn)亮”而增強(qiáng)光源，還會破壞用于做標(biāo)記的熒光蛋白。可以說，這是一個兩難。

　　此外，大型腦組織在膨脹擴(kuò)大之后，如何對整個結(jié)構(gòu)進(jìn)行快速的掃描成像，也就成了一個難題?！拔覀冃枰軌蚩焖俪上瘢粫硖喙馔噬╬hotobleaching）效應(yīng)的顯微鏡”，本研究的共同第一作者Ruixuan Gao博士說道。而他們知道，HHMI的Eric Betzig教授課題組中，就有這么一臺高級的顯微鏡。

本研究的共同第一作者Ruixuan Gao博士（圖片來源：Edward S。 Boyden教授課題組）

　　Betzig教授的顯微鏡叫做“晶格層光顯微鏡”（lattice light-sheet microscope）。它每次只會照亮超級薄的一層樣本，將對樣本的損害降到了最低。此外，它也能快速對樣本進(jìn)行成像，這正是研究人員們所需要的技術(shù)。

　　順便一提，由于在顯微成像技術(shù)上的突破，Betzig教授曾獲得2014年的諾貝爾化學(xué)獎。

Betzig教授是2014年諾貝爾化學(xué)獎得主之一（圖片來源：諾貝爾獎官方網(wǎng)站）

　　這名諾獎得主起初并不相信他的顯微鏡能提供多少幫助，但他依然大度地邀請研究人員們前去嘗試。

　　Ruixuan Gao博士與另一名共同一作Shoh Asano博士帶去了一些經(jīng)過膨脹擴(kuò)大的小鼠大腦組織，在晶格層光顯微鏡下進(jìn)行觀察。通過結(jié)合“擴(kuò)大顯微技術(shù)”和“晶格層光顯微技術(shù)”，他們看到了神經(jīng)元上的許多樹突棘結(jié)構(gòu)。這種微小的結(jié)構(gòu)看起來就像是蘑菇，有著龐大的頭部，以及細(xì)長的根部。過去，樹突棘的成像一直是一個挑戰(zhàn)。然而在兩種顯微技術(shù)的合力下，研究人員們連“最細(xì)小的根部”都可以看到。

研究人員們看到了樹突棘的“森林”（圖片來源：參考資料[1]）

　　“我簡直不敢相信數(shù)據(jù)的質(zhì)量，” Betzig教授說道：“用一根羽毛，你就可以把（震驚的）我推倒?！?/p>

　　暢游果蠅的大腦

　　在驚人的圖像質(zhì)量面前，兩支科研團(tuán)隊迅速達(dá)成合作。在兩年多的時間里，Ruixuan Gao博士與Shoh Asano博士，以及其他生物學(xué)家，顯微鏡專家，以及計算機(jī)專家一道，拍攝了大量的圖片，并對其進(jìn)行分析。

　　“我們就像是復(fù)仇者聯(lián)盟?！?Ruixuan Gao博士這樣評論他們的合作關(guān)系。

看清大腦結(jié)構(gòu)，一直是科研人員們的夢想（圖片來源：參考資料[1]）

　　這些研究帶來的最大亮點(diǎn)之一，就是對完整果蠅大腦的成像分析。從每個果蠅大腦中，科學(xué)家們都獲得了大約50000個立體圖像。隨后，計算機(jī)就像是做三維拼圖一般，把這些立體圖像拼成一個完整的果蠅大腦。

　　研究人員們說，他們研究了超過1500個樹突棘，觀察了保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞的髓鞘，標(biāo)出了所有的多巴胺能神經(jīng)元，并數(shù)清了整個果蠅大腦中存在的突觸。

　　以下是研究人員們給我們帶來的一段精彩影片，讓我們在果蠅的大腦中飛翔。影片里，每一個小球都代表一個突觸。

納米級清晰度看大腦是怎樣一種體驗？

　　視頻來源：VIDEO FOOTAGE COURTESY OF HHMI， POSTPRODUCTION BY UC BERKELEY

　　這些圖像的清晰度高達(dá)60納米，成像過程不超過3天。隨著效率不斷提高，將來，我們有望在一天之內(nèi)就對10個果蠅大腦進(jìn)行立體成像。

　　“我們能用極快的速度，對非常大體積的樣本進(jìn)行分析，獲得高清的圖像?！盉oyden教授說道。

　　這一研究為神經(jīng)科學(xué)帶來了極為重要的研究工具。它讓我們可以理解不同的神經(jīng)環(huán)路如何組成，性別對大腦有怎樣的影響，疾病又會怎樣破壞大腦。

　　對研究神經(jīng)科學(xué)的生物學(xué)家來說，這可能是最好的時代。

　　參考資料：

　　[1] Ruixuan Gao et al。 （2019）， Cortical column and whole-brain imaging with molecular contrast and nanoscale resolution， Science， DOI： 10.1126/science.aau8302

　　[2] How to rapidly image entire brains at nanoscale resolution， Retrieved January 17， 2019， from https：//www.eurekalert.org/pub_releases/2019-01/hhmi-htr011119.php

　　[3] Mapping the brain at high resolution， Retrieved January 17， 2019， from https：//www.eurekalert.org/pub_releases/2019-01/miot-mtb011519.php

　　[4] Three-day imaging captures hi-res， cinematic view of fly brain， Retrieved January 17， 2019， from https：//www.eurekalert.org/pub_releases/2019-01/uoc--tic011619.php