寫在前面的話:
消毒和滅菌是微生物實驗技術(shù)中最基本的操作技術(shù),因此從事藥品生產(chǎn)、檢驗的人員均應(yīng)了解消毒和滅菌的基本概念、兩者的關(guān)系,各自的應(yīng)用方法及其意義,操作時應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行相關(guān)的操作規(guī)程,一方面確保生產(chǎn)與檢驗工作的效果,另一方面也是對自身安全的保護(hù)。
1、消毒:指對病原微生物的繁殖體的致死作用,但不能殺死芽孢等全部微生物,因此消毒是不徹底的,不能代替滅菌。凡用于消毒的化學(xué)藥品稱為消毒劑,因此人們也常稱消毒劑為化學(xué)消毒劑。
2、滅菌:殺滅物體中所有活的微生物(含芽孢)的作用,滅菌是采用強烈的理化因素使任何物體內(nèi)外部的一切微生物永遠(yuǎn)喪失其生長繁殖能力的措施。通常用物理方法來達(dá)到滅菌的目的。
1、共性:殺滅微生物以控制其污染和防止傳播。
2、區(qū)別:
1、消毒
1)消毒劑分類
依殺滅微生物能力進(jìn)行分類,有以下三種:
2)消毒劑的選擇
消毒劑的種類很多,性質(zhì)不一,因此應(yīng)根據(jù)實際需求選擇既安全又有效的消毒劑。在選擇時至少應(yīng)考慮以下幾點:
3)消毒劑的使用
A、影響消毒效果的因素
影響消毒劑效能的因素比較復(fù)雜,一般都因消毒劑的種類而異,因此各種消毒劑使用時應(yīng)注意以下因素
a)微生物種類及數(shù)量
消毒劑的有效濃度及作用時間因微生物的種類及數(shù)量的不同而有差異,不同類型的病原微生物對消毒劑的抗力不同。對于細(xì)菌繁殖體來說,革蘭氏陰性菌比革蘭氏陽性菌對消毒劑的耐受性強,尤其是銅綠假單胞菌的耐受性較強;芽孢的耐受力最強,在化學(xué)消毒劑中,戊二醛和過氧乙酸可殺滅芽孢,但其作用力不如熱力滅菌方法;病毒對消毒因子的耐力也因其種類的不同而有相當(dāng)大的差異,親水病毒的耐力較親脂病毒要強;真菌對大多數(shù)化學(xué)藥物的耐受力較強,因此適用于細(xì)菌的消毒劑并不一定適用于真菌,但真菌一般耐熱性較差。微生物污染數(shù)量多時,應(yīng)加長消毒接觸時間、加大消毒劑用量或提高消毒劑濃度。
b)溫度
一般來說,消毒的速度隨溫度的提高而加快,其殺菌作用也相應(yīng)增強。溫度影響的原理是其可影響菌體表面和酶系統(tǒng)的活性,以及消毒劑的分子運動,使得消毒劑與菌細(xì)胞接觸的機會增加,從而使消毒的時間縮短。但溫度的變化對各種消毒劑的影響不同,如醇類和酚類一般受溫度影響較小,但如甲醛、環(huán)氧乙烷等溫度升高一倍時,其殺菌效果可增加十倍。
c)濃度
消毒劑的濃度應(yīng)考慮的是其主要成分的濃度,根據(jù)不同類型的消毒劑性質(zhì),提高或降低濃度,均可顯著影響消毒效果。一般降低消毒劑的濃度需延長相應(yīng)的消毒時間,且消毒劑內(nèi)的有效成分在其保存期內(nèi)也會相應(yīng)下降。
d)pH值
酸堿度常影響酸性或堿性消毒劑的電離度,改變其溶解度及分子結(jié)構(gòu),影響不同離子型消毒劑的作用,在堿性環(huán)境中,細(xì)菌表面負(fù)電荷增多,陽離子型消毒劑作用較強,在酸性環(huán)境中,細(xì)菌表面負(fù)電荷減少,陰離子型消毒劑的殺菌效果較好;另外pH的過高或過低對微生物的生長及表面物理化學(xué)狀態(tài)均有影響。
e)有機物質(zhì)
消毒環(huán)境中存在有機物,則其可在微生物表面形成保護(hù)層阻礙消毒劑與微生物的接觸或延遲消毒劑的作用,可能導(dǎo)致微生物逐漸產(chǎn)生對藥物的適應(yīng)性,這些情況均會不同程度的降低消毒劑的消毒作用,如有機物可中和一部分消毒劑,有機物和消毒劑作用,形成溶解度比原來更低或殺菌作用比原來更弱的化合物。一般來說消毒劑中的重金屬類及表面活化劑等受有機物的影響較大。
B、其他注意點
a)微生物對消毒劑的耐受性
一般來說,為了避免微生物對消毒劑的耐受性,很多企業(yè)的消毒劑是輪換使用的,現(xiàn)今在學(xué)術(shù)界對于消毒劑的輪換使用的必要性尚存爭議,但FDA的監(jiān)管引文中主導(dǎo)應(yīng)進(jìn)行消毒劑輪換,但消毒劑的輪換使用周期應(yīng)以歷史環(huán)境監(jiān)測數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)制訂。微生物對消毒劑的耐受性較抗生素要低一些,因為消毒劑比抗生素有更強的殺菌作用。另外使用高濃度的消毒劑來殺滅少量的微生物通常影響不大,因此應(yīng)考慮選擇合適的消毒劑來對抗不斷增強的耐受性。同時建議定期進(jìn)行試驗證明或評估從環(huán)境菌監(jiān)測中分離出的微生物(含已知及新的類型)對該環(huán)境使用消毒劑的敏感性。
b)規(guī)范及安全使用
在消毒劑的使用過程中,人員培訓(xùn)及是否規(guī)范及安全使用該消毒劑對其應(yīng)用有很大影響。接觸消毒劑的人員要求進(jìn)行微生物、清潔滅菌操作、消毒劑的制備/使用/安全處理廢棄稀釋及濃縮消毒劑的培訓(xùn)。如正確配制消毒劑是關(guān)鍵,很多消毒效果不佳或失敗的例子源于消毒劑的過度稀釋,另外用于無菌操作流程的消毒劑必須用無菌水稀釋,一般稀釋用水推薦純化水及更高級別的水,因為水的硬度會影響一些消毒劑的功效。另外在處理可能產(chǎn)生有毒刺激性氣體、腐蝕性較強及濃度較大的消毒劑(如殺孢子劑)時,應(yīng)配備適宜的安全防護(hù)裝備,如安全眼鏡、面罩、過濾氣味的口罩、手套、防護(hù)服等。在消毒劑的使用同時應(yīng)考慮清潔劑的配合使用,清潔是去除表面顆粒及微生物、去除殘留并提高后續(xù)消毒效果,因此清潔是為后續(xù)的消毒做好準(zhǔn)備,同時規(guī)避前后2種輪換消毒劑的互相作用。
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