糞便檢查是診療過程中最常見的實(shí)驗(yàn)室檢查之一。制備和閱讀檢查結(jié)果所需的技術(shù)都是很簡單的,也是每個(gè)醫(yī)師都要會(huì)的。盡管簡單,但這些檢查結(jié)果及隨后的治療往往決定動(dòng)物康復(fù)的情況。
01
采集、處理、儲(chǔ)存與運(yùn)輸
采集
(1)樣品盡可能新鮮,因?yàn)榕懦鲶w外后蟲卵會(huì)快速孵化。
(2)飼主應(yīng)該目睹動(dòng)物排便,確保新鮮并觀察有無任何染色、新鮮血液或其他問題。
(3)新鮮樣品如果2h內(nèi)不檢查應(yīng)冷藏保存,且不能超過24h。
(4)提供的檢測(cè)量相當(dāng)于成年男性的拇指大小,至少10g。
(5)樣品應(yīng)標(biāo)明動(dòng)物的名字、號(hào)碼、采集時(shí)間以及是否冷藏過。
常規(guī)處理
(1)樣品應(yīng)認(rèn)真處理,以免造成人為污染。
(2)保持清潔的實(shí)驗(yàn)室檢查環(huán)境。
(3)保存清晰的操作記錄。
儲(chǔ)存
(1)可使用無菌取樣袋、小塑料夾層袋、塑料容器或?qū)嶒?yàn)室一次性手套(把里面翻出來)貯存糞便。
(2)樣品可以無限期地儲(chǔ)存在10%的福爾馬林中(1份糞便+9份福爾馬林),局限性較小。
(3)樣品不能冷凍儲(chǔ)存,不能用70%酒精或100%甲醇儲(chǔ)存。
運(yùn)輸
(1)樣品應(yīng)在冰箱中放置到4℃,然后包裹在冰上或冰袋上24~48h。
(2)將重要樣品裝入單獨(dú)的塑料袋中,以免樣品液體泄漏。
02
內(nèi)寄生蟲檢查方法
大體檢查 | |
用途 | 黏稠度 顏色 血液、黏膜或寄生蟲成蟲 |
技術(shù) | 直接用肉眼檢查糞便或嘔吐物 |
備注 | 肉眼檢查不到(如潛血)要使用其他檢查方法 |
直接涂片:濕法制片 | |
用途 | 原蟲(如賈第鞭毛蟲) 寄生蟲荷量(隱孢子蟲) 細(xì)菌(如螺旋體、彎曲桿菌) |
技術(shù) | 1、在載玻片上滴1滴鹽水或水后,加上等量的糞便。充分混勻糞便和水,在載玻片上涂抹制成一層薄膜。 2、移除任何大塊糞便,蓋上蓋玻片以待檢查。 3、先在10倍鏡下檢查寄生蟲卵,40倍鏡下檢查原蟲,100倍鏡下檢查細(xì)菌??梢詮纳w玻片一側(cè)滴加染色劑,以便更清楚地鑒定。 |
備注 | 1、沒有蟲卵變形。 2、沒有一種濃縮技術(shù)(小樣本)會(huì)導(dǎo)致低數(shù)目。 3、活力可以成為一個(gè)有用的輔助診斷。 |
直接涂片:干法制片 | |
用途 | 原蟲(如賈第鞭毛蟲) 寄生蟲荷量(隱孢子蟲) 細(xì)菌(如螺旋體、彎曲桿菌) |
技術(shù) | 1、在玻片上放小量的糞便,使用涂藥棒將其薄薄散開。 2、加熱固定,使用Diff-Quick染色。 3、先在10倍鏡下檢查寄生蟲卵,40倍鏡下檢查原蟲,100倍鏡下檢查細(xì)菌。 |
備注 | 1、沒有蟲卵變形。 2、沒有一種濃縮技術(shù)(小樣本)會(huì)導(dǎo)致低數(shù)目。 3、不能判斷寄生蟲的活力。 |
標(biāo)準(zhǔn)或簡單的:浮集法 | |
用途 | 大多數(shù)寄生蟲 寄生蟲荷量 |
技術(shù) | 1、將1~2g糞便放進(jìn)合適的容器(如紙杯),添加懸浮液。 2、用壓舌板充分混勻,使用茶濾網(wǎng)或棉布過濾到第二個(gè)容器中。 3、將混合物倒入檢測(cè)管,繼續(xù)添加懸浮液直到凹液面形成。 4、在凹液面上放置一蓋玻片10~15min。 5、取下蓋玻片,放在載玻片上進(jìn)行檢查。 |
備注 | 1、可用商品化的糞便懸浮液試劑盒。 2、收集蟲卵的效果比離心浮集法差。 3、因?yàn)橹亓ψ饔茫紫x沉降而檢測(cè)不到。 |
離心浮集法 | |
用途 | 大多數(shù)寄生蟲 寄生蟲荷量 |
技術(shù) | 1、取1茶匙糞便放進(jìn)紙杯,與充足的水或懸浮液混合制成半固體懸浮液。 2、在第二個(gè)紙杯上放置茶濾網(wǎng)或棉布,清空上面的內(nèi)容物。 3、用壓舌板按壓液體通過濾網(wǎng),隨后丟棄固體廢物。 4、將過濾后的混合物倒入15mL的離心管。 5、用懸浮液填充滿離心管,形成一個(gè)輕微的凸液面;不要加過多懸浮液。 6、在離心管頂部放一蓋玻片。 7、將離心管平衡后離心,1 300 rpm 離心5min。 8、取出離心管,靜置10min。 9、直接向上提起蓋玻片,放在載玻片上。 |
備注 | 1、收集蟲卵要比標(biāo)準(zhǔn)浮集法更有效。 2、需要一個(gè)能容納15mL離心管的水平轉(zhuǎn)子離心機(jī)。 3、因?yàn)橹亓ψ饔茫紫x沉降而檢測(cè)不到。 |
貝爾曼技術(shù) | |
用途 | 線蟲幼蟲 |
技術(shù) | 1、用溫水或生理鹽水(30℃)裝入漏斗以覆蓋網(wǎng)篩。 2、放一塊棉布或紗布覆蓋住漏斗內(nèi)的網(wǎng)篩。 3、在棉布上放5~15g的糞便、土壤或組織樣品,將伸出的棉布蓋到樣品 表面。確保樣品被溫水覆蓋。 4、讓樣品靜置過夜(>8h)。 5、取一張玻片,放在被截?cái)嗟奈芟旅妫我坏我后w到玻片上。 6、蓋上蓋玻片并檢查。如果檢查結(jié)果呈陰性,重復(fù)多張載玻片以保證結(jié) 果準(zhǔn)確。 |
備注 | 可以有效地收集幼蟲 |
糞便培養(yǎng) | |
用途 | 鉤蟲幼蟲 區(qū)分有相似外觀的蟲卵和孢囊的寄生蟲 |
技術(shù) | 1、將糞便放入用0.1%的NaHCO3溶液沖洗的玻璃罐中或放在墊有濾 紙的培養(yǎng)皿中。 2、蓋上容器并放置到黑暗的地方7~10d。容器內(nèi)要保持足夠的濕度 以產(chǎn)生液滴;如果沒有液滴,加入少量的水。 3、7~10d后,使用少量的水沖洗容器,收集液體并離心。 4、在顯微鏡下檢查沉渣。 |
備注 | 保證鑒定 |
濕涂片 / 糞便培養(yǎng) InpouchTM | |
用途 | 胎兒三毛滴蟲 |
技術(shù) | 遵照制造商的說明 從包裝盒中取出袋子,并確認(rèn)在上面腔室有1mL液體。打開袋子,將帶有0.03g新鮮糞便的涂藥棒或棉簽插入上面腔室中的液體中。在拇指和食指間以及腔室壁上輕輕摩擦將糞便留在里面。密封袋子做好標(biāo)記。 濕涂片 將袋子口朝上靜置15min,使胎兒三毛滴蟲集中在袋子底部。將觀看夾水平橫跨袋子,隨后將袋子攤放在顯微鏡下檢查,要特別注意檢查袋子邊緣。 糞便培養(yǎng) 將所有的液體擠壓進(jìn)入下面的袋子,密封袋子,培養(yǎng) 18~24h。抓住袋子邊緣,將其上下顛倒3~4次混勻。將觀看夾水平橫跨袋子,隨后將袋子攤放在顯微鏡下檢查。 |
備注 | 1、過多的糞便將導(dǎo)致培養(yǎng)基呈云霧狀而無法識(shí)別。 2、如果沒有檢查到胎兒三毛滴蟲,連續(xù)查看2~4d,然后隔天查看到12d。 3、1~10個(gè)蟲體足會(huì)導(dǎo)致預(yù)期的陽性試驗(yàn)·糞便培養(yǎng)往往比濕涂片更準(zhǔn)確。 |
03
外寄生蟲檢查方法
大體檢查 | |
用途 | 虱子、螨、蜱蟲、蒼蠅或跳蚤 |
技術(shù) | 在動(dòng)物體表看到外寄生蟲或用跳蚤梳后看到 |
備注 | 僅有有限的寄生蟲可以看到 |
透明膠帶 | |
用途 | 虱子或螨 |
技術(shù) | 1、將透明膠帶黏面朝外彎曲成一個(gè)環(huán)。 2、在動(dòng)物皮膚上按壓膠帶。 3、在玻片上滴1滴水,將膠帶黏面朝下放在水上并按壓。 4、顯微鏡下檢查。 |
備注 | 僅有有限的寄生蟲可以看到 |
顯微鏡檢查 | |
用途 | 大多數(shù)外寄生蟲 |
技術(shù) | 1、在玻片上滴一滴礦物油。 2、在礦物油中滾動(dòng)棉簽或采集的樣品以收集所有的碎片。 3、在玻片上蓋上蓋玻片,顯微鏡下檢查,使用4倍鏡。 |
備注 | 外寄生蟲診斷最徹底的技術(shù) |
原創(chuàng)作者:張超
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