眾所周知,哺乳動(dòng)物細(xì)胞作為蛋白的表達(dá)系統(tǒng)具有糖基化、乙?;⒘蛩峄?、硫酸化等翻譯后修飾。而蛋白翻譯后修飾,如糖基化修飾,會(huì)直接影響蛋白在體內(nèi)的半衰期及穩(wěn)定性和生物學(xué)活性、影響配體識(shí)別及結(jié)合,影響其免疫原性,影響胞間作用等等功能。
目前,哺乳動(dòng)物細(xì)胞已被廣泛用于重組蛋白、疫苗、抗癌試劑及其他臨床相關(guān)的藥物的生產(chǎn)中。
CHO細(xì)胞、BHK細(xì)胞、Sp2/0等細(xì)胞常被用于制備生物制藥。然而這些小鼠來源的細(xì)胞與HEK293細(xì)胞相比,缺乏人的細(xì)胞翻譯后修飾系統(tǒng),因此與人源系統(tǒng)表達(dá)的蛋白有差異。目前,HEK293細(xì)胞被廣泛用于生產(chǎn)蛋白、疫苗、抗癌試劑及重組腺病毒包被等。
1) 轉(zhuǎn)染效率高;
2) 可懸浮培養(yǎng)用于大規(guī)模表達(dá);
3) 表達(dá)蛋白結(jié)構(gòu)最接近其在人體內(nèi)構(gòu)象;
4) HEK293細(xì)胞在培養(yǎng)體系中能夠快速增長,高密度培養(yǎng)。
5) HEK293細(xì)胞與神經(jīng)元細(xì)胞一樣,對(duì)外界微環(huán)境較為敏感,利用這一特點(diǎn),可用于藥物發(fā)現(xiàn)及細(xì)胞毒性測(cè)試。
溫馨提示:接下來將有一群HEK293細(xì)胞系向您狂奔而來,
請(qǐng)注意防護(hù)~
HEK293細(xì)胞系概覽
(帶您一圖覽盡HEK293細(xì)胞系)
(點(diǎn)我看大圖)
如您所見,小編在得到讀者想要系統(tǒng)了解HEK293細(xì)胞系的愿望后,博覽古今(不要臉)發(fā)表的文獻(xiàn),找到了最新的關(guān)于HEK293細(xì)胞系的綜述文獻(xiàn)。
接下來,小編將主要按照該篇文獻(xiàn)報(bào)道中的順序給大家分享現(xiàn)有的HEK293細(xì)胞系的現(xiàn)狀。
1973年,最原始的HEK293細(xì)胞來源于一個(gè)夭折的人類胚胎腎細(xì)胞中。將人的胚胎腎細(xì)胞中轉(zhuǎn)化入人5型腺病毒DNA片段,得到的細(xì)胞即為HEK293細(xì)胞。
HEK293細(xì)胞,何許人也?
注:以下細(xì)胞系介紹中,HEK293細(xì)胞簡(jiǎn)稱為293細(xì)胞。
293T細(xì)胞
293細(xì)胞中轉(zhuǎn)入SV40T-antigen基因形成的高轉(zhuǎn)衍生株,即為293T細(xì)胞系。這使得包含SV40ori的質(zhì)粒能夠在該細(xì)胞系中顯著擴(kuò)增,從而促進(jìn)表達(dá)載體的擴(kuò)增,促進(jìn)蛋白的表達(dá)。
293T細(xì)胞除了可用于各類基因表達(dá)及蛋白生產(chǎn),還可用于高滴度逆轉(zhuǎn)錄病毒及其他病毒生產(chǎn),如腺病毒及其他哺乳動(dòng)物病毒。
293T/17細(xì)胞
293T細(xì)胞中共轉(zhuǎn)染入pBND 和 pZAP 質(zhì)粒,獲得的具有G418耐受的細(xì)胞系即為293T/17細(xì)胞系。該細(xì)胞系在保有293T細(xì)胞的優(yōu)良性能之外,還具有高轉(zhuǎn)染性的特點(diǎn)。
293T/17 SF細(xì)胞
293T/17 SF細(xì)胞系指的是在293T細(xì)胞中轉(zhuǎn)入EBV基因形成的轉(zhuǎn)化細(xì)胞系,該細(xì)胞系主要用于細(xì)胞的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染及蛋白表達(dá)。
293H細(xì)胞
293H細(xì)胞則指的是將293細(xì)胞馴化后得到的能夠在無血清培養(yǎng)體系下快速生長、具有高轉(zhuǎn)染效率及高效蛋白表達(dá)性能的細(xì)胞系。另外,該細(xì)胞系貼附力好,而被用于噬菌斑檢測(cè)等應(yīng)用。
293E細(xì)胞
293E細(xì)胞指的是在293-H細(xì)胞中插入EBNA-1基因的細(xì)胞系,該基因能夠穩(wěn)定表達(dá)EBV病毒的EBNA1蛋白。含有EBV復(fù)制起點(diǎn)(oriP)的重組表達(dá)質(zhì)粒,能夠在H293E細(xì)胞中復(fù)制,并實(shí)現(xiàn)蛋白的高效表達(dá)。
293-6E細(xì)胞
293-6E細(xì)胞則是在293-H細(xì)胞中插入截短過后的EBNA-1基因的細(xì)胞系,其能夠在無血清培養(yǎng)基中高表達(dá)生產(chǎn)蛋白及病毒載體。
293F細(xì)胞
293F細(xì)胞是一類能夠在無血清中高表達(dá)蛋白的野生型293細(xì)胞系。
293FT細(xì)胞
293FT細(xì)胞則是在293F細(xì)胞系中插入pCMVSPORT6TAg.Neo 質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化細(xì)胞系,能夠快速增值,易轉(zhuǎn)染,其能夠用于慢病毒載體的生產(chǎn)。
293FTM細(xì)胞
293FTM細(xì)胞則是來源于Flp-InTMT-RETM293細(xì)胞,該細(xì)胞系中轉(zhuǎn)染了ecotropic receptor質(zhì)粒及MAPPIT(mammalian protein-protein interaction trap)報(bào)告質(zhì)粒,該細(xì)胞系主要用于蛋白互作的篩選。
293S細(xì)胞
293S細(xì)胞則指的被馴化成能夠懸浮培養(yǎng)且能夠耐受低鈣離子培養(yǎng)條件的293細(xì)胞系。
293SG細(xì)胞
將293S細(xì)胞用甲基磺酸乙酯誘變處理,蓖麻毒素選擇后再轉(zhuǎn)染pcDNA6/TR質(zhì)粒得到耐受蓖麻毒素的細(xì)胞系即為293SG。
該細(xì)胞系缺乏乙酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移酶I活性,因此可促進(jìn)蛋白的Man5GlcNAc2N-聚糖型糖基化修飾。此外,該細(xì)胞系中具有四環(huán)素表達(dá)抑制基因,可用于四環(huán)素誘導(dǎo)的蛋白表達(dá)研究。
這類細(xì)胞系常用于同源的N-糖基化蛋白的表達(dá)。
293SGGD細(xì)胞
293SGGD細(xì)胞系則指的是在293SG轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-zeo-STendoT質(zhì)粒的細(xì)胞系,其主要用于糖基化工程研究中。
完
本篇文章僅僅是匯總了常見的HEK293細(xì)胞系,
如果您對(duì)某類細(xì)胞系感興趣,想要更加深入的了解,
請(qǐng)隨時(shí)聯(lián)系小編,小編愿與您共同探討學(xué)習(xí),進(jìn)步~~
PS:特別感謝北京義翹神州余博士對(duì)于本篇文章內(nèi)容指導(dǎo)幫助。
參考文獻(xiàn):
1:Lin Y C, Boone M, Meuris L, et al. Genome dynamics of the human embryonic kidney 293 lineage in response to cell biology manipulations[J]. Nature communications, 2014, 5: 4767.
2:Hu J, Han J, Li H, et al. Human Embryonic Kidney 293 Cells: A Vehicle for Biopharmaceutical Manufacturing, Structural Biology, and Electrophysiology[J]. Cells Tissues Organs, 2018, 205(1): 1-8.
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