上調(diào)表達(dá)使得功能增強(qiáng)通常采用的方法是將目的基因的編碼區(qū)（CDS）構(gòu)建到載體中，導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)使目的基因的表達(dá)量顯著增加。但基因在細(xì)胞內(nèi)本體表達(dá)已經(jīng)很高時(shí)，此時(shí)再進(jìn)行過表達(dá)的調(diào)控，細(xì)胞的表型很可能不會(huì)發(fā)生變化，此外，外源高表達(dá)對(duì)細(xì)胞也是個(gè)刺激壓力，會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性和假陰性的結(jié)果。
而對(duì)于功能獲得，則常采用基因敲入的方法，例如引入標(biāo)記基因序列，便于目的基因的示蹤和定位，或引入調(diào)控表達(dá)元件如增強(qiáng)子，調(diào)控目的基因的表達(dá)；但由于受到同源重組效率和插入基因片段大小的影響，目前細(xì)胞基因敲入存在較高的技術(shù)難度，普通實(shí)驗(yàn)室難以開展。
掌握了研究策略要進(jìn)行細(xì)胞水平功能性驗(yàn)證，貌似很簡(jiǎn)單。但開展實(shí)驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)好像并不是那么回事。即便按照流程仔細(xì)做，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)也跟鬧著玩似的，一次一個(gè)樣，數(shù)據(jù)五花八門，說起來都是淚。
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