每每在顯微鏡下看到寄生蟲,總是分辨不清它是哪一種,總是感覺它很熟悉,卻又很陌生,感覺像 A 又像 B,模模糊糊混淆分不清楚,這樣的場景你是否遇到過?那就快快一起來看看這些鑒別要點。
肝吸蟲卵:卵蓋小而明顯,卵蓋周圍卵殼增厚突起形成肩峰,尾部一個疣狀突起,內(nèi)含一個毛蚴。
靈芝孢子:橢圓形、細胞壁雙層結(jié)構(gòu)且較厚、中心的細胞核呈深褐色、橢圓形。
1)從外形看,兩者都是橢圓形、且顏色褐色,肝吸蟲卵的疣狀突起有時不明顯,導(dǎo)致易混淆。但仔細觀察可知,靈芝孢子并無肩峰,無卵蓋。最重要的是,肝吸蟲卵里內(nèi)含毛蚴,而靈芝孢子的內(nèi)部雖含有營養(yǎng)成分,卻無實質(zhì)性內(nèi)容物,僅僅只是一個細胞核。通常靈芝孢子會成堆出現(xiàn),而肝吸蟲卵密度則較低。
2)另外,我在工作中也發(fā)現(xiàn)一個小訣竅:滴加 10% 氫氧化鉀溶液,肝吸蟲卵背景雜質(zhì)可被清除干凈,蟲卵特征非常明顯。而部分靈芝孢子則會出現(xiàn)「破壁」現(xiàn)象,即靈芝孢子破碎(破碎的靈芝孢子如上圖中紅色箭頭所示)。
人芽囊原蟲:該蟲形態(tài)多樣,在糞便中常見空泡型,中央有一個透亮的大空泡,有時可見空泡較小或呈網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),外圍一個環(huán)形胞質(zhì),核數(shù)目 1 到 4 個不等,呈月牙狀或塊狀。
紅細胞:糞便中紅細胞呈草綠色,略有折光性的圓盤狀,有時可因糞便 PH 影響,而呈皺縮狀。
人芽囊原蟲有時大小不等,有時和紅細胞差不多大小,但細調(diào)顯微鏡螺旋,可見人芽囊原蟲外圍胞質(zhì)有小亮點,這個小亮點就是它的核,而紅細胞外圍卻無。
鑒別小技巧:滴加稀乙酸,紅細胞溶解,人芽囊原蟲不溶解,因為人芽囊原蟲空泡中常含有碳水化合物和脂肪,不懼稀乙酸。
糞便中白細胞常見中性粒細胞,形態(tài)完整者與血液中的粒細胞無差別。白細胞灰白色、胞質(zhì)內(nèi)充滿細小的顆粒。而人芽囊原蟲常見空泡型,也即是中間一個大空泡。人芽囊原蟲四型中的顆粒型,可能比較難與白細胞區(qū)別,但是滴加稀乙酸,白細胞可顯現(xiàn)核型,而人芽囊原蟲無變化。
鉤蟲卵:橢圓形,卵殼薄,無色透明,內(nèi)含卵細胞 4 到 8 個。若患者便秘或糞便放置過久,蟲卵內(nèi)卵細胞可分裂為多細胞期。
東方毛圓線蟲卵:長橢圓形,一端較圓,另一端稍尖,一側(cè)常較另一側(cè)稍隆起,無色透明,卵殼薄。
這兩種蟲卵在許多形態(tài)學(xué)比賽較多見,特別容易混淆,尤其是卵殼都是薄,但鉤蟲卵兩端均較為圓滑(可以理解為「胖且矮」),東方毛圓線蟲卵則比鉤蟲卵略長,有一端較尖(可以理解為「瘦且高」)。
從卵細胞數(shù)區(qū)分,在新鮮糞便標(biāo)本中,鉤蟲卵的卵細胞 4 到 8 個,而東方毛圓線蟲卵內(nèi)含分裂的胚細胞 10 到 20 個。但是遇到放置較久的糞便標(biāo)本,由于鉤蟲卵的卵細胞可進行分裂為多細胞期,此時就會比較難以辨別。
鉤蚴桿狀蚴:鉤蟲卵經(jīng)過鉤蚴培養(yǎng)法,幼蟲自卵內(nèi)孵出,透明無色,前鈍后尖,口腔細長。生殖原基小而不明顯。
糞類圓線蟲桿狀蚴:前端棒狀、尾部鈍尖,口腔較短,具雙球形咽管,生殖原基大而明顯。
糞類圓線蟲的運動方式及速度比鉤蚴更為活潑,此鑒別方法較為抽象,實際工作中我們通常待蟲體運動緩慢或不動時,查看其腹部的生殖原基而區(qū)分,若是經(jīng)稀碘液染色,生殖原基的效果更加。蓋上蓋玻片鏡檢,可進一步比較口腔長短、咽管球形狀而區(qū)分。
另外,若是新鮮標(biāo)本可見較多運動活躍的蟲體,一般較為考慮糞類圓線蟲桿狀蚴居多,而鉤蟲桿狀蚴是需要鉤蟲卵在適宜環(huán)境下,經(jīng) 1 到 2 天才能孵出,所以詢問患者標(biāo)本的留置時間長短可有助于初步判別。
藍氏賈第鞭毛蟲包囊:橢圓形,囊壁較厚,囊壁與蟲體之間有明顯的空隙,未成熟包囊有 2 個核,成熟包囊有 4 個核,多偏于一側(cè)。囊內(nèi)可見鞭毛和中央小體的早期結(jié)構(gòu)。
阿米巴包囊:圓形,核 1 到數(shù)個不等,未染色標(biāo)本擬染色體呈棒狀、透明,糖原泡一般看不到。
濕片不染色情況下,藍氏賈第鞭毛蟲、阿米巴包囊對于初學(xué)者來說確實比較難鑒別,以至于被誤認為白細胞,但白細胞內(nèi)部有細小顆粒,而賈第鞭毛蟲內(nèi)部無顆粒。若是實驗室條件有碘液染色,便能很好的鑒別出來。
工作中自己發(fā)現(xiàn),藍氏賈第鞭毛蟲濕片下,高倍鏡視野下細調(diào)顯微鏡的螺旋可隱約看到一部分蟲體中間的軸柱,這便是賈第鞭毛蟲很好的依據(jù)。而阿米巴包囊濕片下,則可在低倍鏡視野下細調(diào)顯微鏡的螺旋,可看到蟲體中間有折光性的圓形核。
總結(jié):
近年來,人們生活水平提升,大眾個人衛(wèi)生意識提升,寄生蟲已然不及過去幾十年那么常見了,實際工作中很少遇見,導(dǎo)致目前很多檢驗人對很多的寄生蟲形態(tài)認知還停留在教科書層面,無法熟練掌握各個不同寄生蟲之間的細微鑒別點。
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