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1、培養(yǎng)基配方：

（1）I號(hào)：PDA(馬鈴薯200g+葡萄糖18g+瓊脂18g+水1000m1)；

（2）Ⅱ號(hào)：PDA+硫酸鎂1.5g+磷酸二氫鉀3g+蛋白胨2g+水1000ml；

（3）Ⅲ號(hào)：馬鈴薯100g+干雜木屑100g+葡萄糖20g+瓊脂20g+水1000ml。

（4）注意：上述配方的培養(yǎng)基經(jīng)高壓20分鐘滅菌消毒后制成試管斜面，3天內(nèi)用完。

2、制作方法：

通過組織分離技術(shù)，將選取的大球蓋菇組織塊接入I號(hào)培養(yǎng)基上(或接入需復(fù)壯的保存種)。在24--28℃條件下經(jīng)10--15天培養(yǎng),菌絲長(zhǎng)至試管1/3--1/4時(shí),挑取菌絲擴(kuò)展前端濃密、粗壯的部分轉(zhuǎn)入Ⅱ號(hào)或Ⅲ號(hào)培養(yǎng)基上，采用兩點(diǎn)接種法，以使菌絲迅速長(zhǎng)滿培養(yǎng)基表面(一般15--20天)提高菌絲的質(zhì)量。經(jīng)Ⅱ號(hào)、Ⅲ號(hào)復(fù)壯培養(yǎng)基培養(yǎng)的菌絲表現(xiàn)為濃白、粗壯、生命力強(qiáng)，以利原種菌絲的生長(zhǎng)，縮短原種培養(yǎng)時(shí)間，提高成品率。

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