新年快樂!元旦的三天放假馬上就要結(jié)束啦~大家都休(fu)息(xi)得怎么樣呀~輸血學(xué)新的考綱也是打得我措手不及呀- -稍稍更新了一下~大家來看看輸血的重要知識(shí)點(diǎn)吧~
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《臨床輸血檢驗(yàn)技術(shù)》知識(shí)點(diǎn)整理
輸血學(xué)緒論
一、掌握
1. 輸血醫(yī)學(xué)(TransfusionMedicine, Transfusiology)的定義。
定義:是一門研究、實(shí)踐輸注血液以救治傷病的醫(yī)學(xué)學(xué)科
Transfusion medicine (ortransfusiology) is the branch ofmedicine that is concerned with the transfusionof blood and blood components.
2. 成分輸血具備的優(yōu)點(diǎn)。
高效、安全、易于保存、節(jié)約血液資源
3.血型的研究及其在臨床上的應(yīng)用。
輸血之父:James Blundell。1818年首次人-人輸血。
血型之父:Karl Landsteiner。1902年ABO血型系統(tǒng)被確立。1930年,獲得諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。
二、熟悉
1. 血型在臨床上的應(yīng)用。
A.輸血醫(yī)學(xué)是一門獨(dú)立的學(xué)科;是 (臨床)醫(yī)學(xué)中關(guān)于血液(成分)輸注的一個(gè)分支,是臨床重要的、不可替代的治療手段。涉及血液免疫學(xué)、血液學(xué)、臨床檢驗(yàn)學(xué)、醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)、流行病學(xué)、移植生物學(xué)、生理學(xué)、細(xì)胞組織學(xué)和社會(huì)科學(xué)相關(guān)專業(yè)領(lǐng)域等多個(gè)學(xué)科
B.內(nèi)容:血液(成分、制品、替代品)采集、制備、化驗(yàn)、儲(chǔ)存、輸注、結(jié)果監(jiān)測(cè)
C.目的:補(bǔ)充失血,治療支持
D.結(jié)果:安全性、有效性、合理性
2. 輸血前傳染病指標(biāo)檢驗(yàn)項(xiàng)目。
A.病毒:HIV、肝炎病毒(HBV、HCV等)
B.螺旋體和細(xì)菌:梅毒螺旋體、細(xì)菌污染等
C.寄生蟲:瘧原蟲、南美錐蟲、巴貝西蟲等
D.其他病原體:朊蛋白體等vCJD
三、了解
1. 輸血發(fā)展史中的主要階段。
A.20世紀(jì)初期到20世紀(jì)10年代,直接輸血時(shí)代:
1900 KarlLandsteiner發(fā)現(xiàn)A、B、O血型(免疫學(xué)), 1902年AB型
1907 Reuben Ottenberg 血型遺傳符合孟德爾定律(遺傳/生理/統(tǒng)計(jì))
1908 Moreschi 設(shè)計(jì)抗球蛋白反應(yīng), 抗原-抗體反應(yīng)可見(免疫/生化)
B.20世紀(jì)10年代到20世紀(jì)50年代,間接輸血時(shí)代:
1915 RichardLewisohn發(fā)明抗凝劑(有機(jī)化學(xué))
1939/40 Landsteiner, Wiener等發(fā)現(xiàn)Rh血型。
1943 Beeson 報(bào)告輸血傳播肝炎(病毒/檢驗(yàn)/微生物/流行病)
1945 Coombs, Mourant和Race發(fā)明抗人球蛋白試驗(yàn)
1947 美國開始檢測(cè)獻(xiàn)血者梅毒
C.20世紀(jì)50年代至今,成分輸血時(shí)代:
1950 Walter和Murphy研制塑料袋(化學(xué)/高分子),1953 冷凍離心機(jī)發(fā)明
1960 Solomon和Fahey 報(bào)告單采術(shù), 1964用于血漿單采
1963 Blumberg發(fā)現(xiàn)HBsAg(1976諾獎(jiǎng)),1971 美國檢測(cè)HBsAg
1970 倡導(dǎo)無償獻(xiàn)血
1979 CPDA-1, 全血/紅細(xì)胞保存期35天,1983 添加液,保存42天
1984 Alec Jeffery發(fā)現(xiàn)“DNA圖譜”,1986年第一次用與刑案鑒定
1983 Kary Mullis發(fā)明PCR,1988年被用于DNA檢測(cè)。
2. 輸血醫(yī)學(xué)的主要領(lǐng)域及發(fā)展趨勢(shì)。
見下圖
血型血清學(xué)免疫基礎(chǔ)知識(shí)
一、掌握
1.抗原、抗體的定義、分類及其特性。
A.抗原的定義、分類、特性
a.抗原與免疫原的定義:
抗原(antigen,Ag):能和免疫應(yīng)答產(chǎn)生的抗體或致敏淋巴細(xì)胞發(fā)生特異性結(jié)合的物質(zhì)。
免疫原(immunogen):能刺激機(jī)體產(chǎn)生體液免疫和細(xì)胞免疫的物質(zhì)。
b.抗原的特性:外源性;分子量大、結(jié)構(gòu)復(fù)雜;特異性;抗原性(免疫原性、反應(yīng)原性)
免疫原性(immunogenicity):免疫原誘發(fā)特異性免疫反應(yīng)的性質(zhì)
反應(yīng)原性(reactionogenicity):抗原與免疫應(yīng)答產(chǎn)物發(fā)生結(jié)合的性質(zhì)
c.抗原的分類:
①按照抗原性分類:
完全抗原(antigen,complete):具有免疫原性、反應(yīng)原性兩種性能的抗原;
半抗原(hapten):缺乏免疫原性而只有反應(yīng)原性的抗原。
②抗原按照來源的分類:
異種抗原 (xenoantigen):與宿主不是同一種屬的抗原稱為異種抗原
同種(異體)抗原 (alloantigen):同種間不同個(gè)體的抗原稱為同種抗原
自身抗原 (autoantigen):能誘導(dǎo)宿主發(fā)生自身免疫反應(yīng)的抗原稱為自身抗原
B.抗體的定義、特性、分類
a.抗體的定義:存在于血液和其他體液中,對(duì)外來抗原刺激由漿細(xì)胞所產(chǎn)生的一組具有免疫功能的球蛋白,即免疫球蛋白(immunoglobulin, Ig)
b.抗體的分類
①抗體來源的分類:
天然抗體(natural antibody):機(jī)體在沒有可查知抗原刺激情況下產(chǎn)生的抗體
免疫/同種抗體(immune antibody):由輸血、妊娠、移植等免疫過程而產(chǎn)生的抗體
自身抗體(autoantibody):由藥物或疾病等因素導(dǎo)致機(jī)體針對(duì)自身抗原產(chǎn)生的抗體
②抗體按與抗原反應(yīng)的最適溫度分為:
冷型抗體(cold antibody):主要為IgM五聚體,0~4℃時(shí)可產(chǎn)生凝血作用
溫型抗體(warm antibody):主要為IgG,主要在37℃時(shí)產(chǎn)生凝血作用
③抗體按生物化學(xué)活性分為:IgM/G/A/D/E/,與血型血清學(xué)密切相關(guān)的為IgG和IgM
C.抗體的特性:
2.紅細(xì)胞致敏技術(shù)與凝集技術(shù)的原理。
A.凝集反應(yīng):抗體分子在相鄰的紅細(xì)胞表面抗原決定簇之間搭橋,使之形成肉眼可見的顆粒狀凝集團(tuán)塊。分為直接凝集IgM和間接凝集IgG。
B.一般步驟為致敏階段和凝集階段。IgM型結(jié)合紅細(xì)胞后激活補(bǔ)體,結(jié)合C3d。IgG則直接結(jié)合在紅細(xì)胞表面。
C.影響凝集反應(yīng)的因素:抗原抗體比例、反應(yīng)溫度、溶液的pH值、孵育時(shí)間、離子強(qiáng)度、增強(qiáng)劑。
*紅細(xì)胞之間的距離:24nm。IgM 抗體(五聚體跨度)間距34nm, IgG抗體間距14nm。故單獨(dú)的IgG型抗體無法連接兩個(gè)紅細(xì)胞,引起凝集。
3. 血型和血型系統(tǒng)基本概念。
A.血型(blood group)的定義:血型是血液各種成分以抗原形式進(jìn)行表達(dá)的一種遺傳性狀,是血液的主要特征之一。
廣義上指血液中任何成分的變異和多態(tài)性;狹義指血細(xì)胞表面抗原的區(qū)別。
B.血型抗原(blood group antigens)的定義:指血細(xì)胞或血漿蛋白上的抗原,必須在人群中有多態(tài)性分布,能夠用相對(duì)應(yīng)的特異性抗體進(jìn)行血清學(xué)鑒定,并具有可遺傳性。
血型抗原的決定簇可以為糖分子(如ABH、Lewis等,常作為組織血型抗原,存在于紅細(xì)胞膜表面、組織細(xì)胞和體液中)或是多肽(如 Rh、Kell等,常常只存在于紅細(xì)胞膜或其它血細(xì)胞膜上)
C.血型系統(tǒng)(blood group system):指由單一基因或多個(gè)連鎖基因控制表達(dá)的抗原組。
a.血型系統(tǒng)的確立:抗原在已確立的各血型系統(tǒng)中的分布→抗原與已知的血型系統(tǒng)的遺傳關(guān)系→將該抗原確立為一個(gè)血型系統(tǒng)
b.發(fā)現(xiàn)血型系統(tǒng)的方法:同種免疫(alloimmunity,如妊娠,得到人的血清如Rh抗體);異種免疫(heteroimmunity,如動(dòng)物的紅細(xì)胞恒河猴發(fā)現(xiàn),再到人的細(xì)胞)
c.血型系統(tǒng)的命名:
①抗原的命名:全數(shù)字命名式前3位數(shù)代表血型系統(tǒng)、集合或系列,后3位數(shù)代表抗原
字母/數(shù)字命名方式血型系統(tǒng)用字母表示,血型抗原用字母加數(shù)字記述
②表型的命名:如Le(a-b )
③基因與基因型的命名:大寫斜體字
二、熟悉
1.IgG、IgM性質(zhì)抗體的特性和區(qū)別。
A. IgG抗體:多引起血管外溶血。通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體并可透過胎盤傳輸給胎兒,G1和G3在溶血性輸血反應(yīng)和新生兒溶血病中意義重大
B. IgM抗體:多引起血管內(nèi)溶血。不能通過胎盤,是一種高效凝集素,固定補(bǔ)體能力比IgG大,2-Me(二巰基乙醇)可使其失去活性
2.IgG性質(zhì)抗體的臨床意義。
IgG性質(zhì)抗體在血型血清學(xué)中意義重大。如IgG型抗體可以通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體并可透過胎盤傳輸給胎兒,IgG1和IgG3在溶血性輸血反應(yīng)和新生兒溶血病中意義重大。
三、了解
1.人類紅細(xì)胞血型的遺傳方式。
A.常染色體顯性或等顯性遺傳:如ABO、Rh血型等
B.常染色體隱性遺傳:如成人i血型
C.X連鎖顯性:如Xg血型
紅細(xì)胞血型系統(tǒng)(ABO、MN血型系統(tǒng))
一、掌握
1.ABO血型的分型原則。
A.紅細(xì)胞上有A抗原,血清中有抗B者為A型
B.紅細(xì)胞上有B抗原,血清中有抗A者為B型
C.紅細(xì)胞上沒有A和B抗原,血清中有抗A和抗B者為O型
D.紅細(xì)胞上有A和B抗原,血清中沒有抗A和抗B者為AB型
2.Landsteiner規(guī)則。
只有在ABO血型系統(tǒng)中紅細(xì)胞缺乏某抗原的血清中一定預(yù)計(jì)地含有該抗原的抗體
3.ABO血型系統(tǒng)的獨(dú)特性質(zhì)。
A.血清中常存在反應(yīng)強(qiáng)的抗體,而紅細(xì)胞上必然缺乏與之相對(duì)應(yīng)的特異性抗原;
B.許多組織細(xì)胞上有規(guī)律地存在著ABH抗原,以及分泌型人的分泌液中存在著ABH物質(zhì)
**ABO血型系統(tǒng)的兩個(gè)獨(dú)特性質(zhì)使ABO血型系統(tǒng)成為臨床輸血和器官移植中最為重要的血型系統(tǒng)。
二、熟悉
1.ABO血型的遺傳與生化合成。
A.ABO血型抗原的結(jié)構(gòu):見下圖
B.ABO血型的生化合成:見下圖
C.ABO血型的發(fā)育:
a.胚胎早期:A和B抗原開始產(chǎn)生
b.出生時(shí):A和B抗原發(fā)育尚不完全,與抗A和抗B試劑血清反應(yīng)比成人弱
c.2~4歲: A和B抗原充分表現(xiàn)出抗原性
D.ABO血型的遺傳:ABO血型遺傳為常染色體復(fù)等位基因顯性遺傳。ABO基因位于第9號(hào)染色體上,Rh基因位于第1號(hào)染色體。
ABO血型抗原的化學(xué)結(jié)構(gòu)屬于糖蛋白。H抗原是A、B抗原的前身物質(zhì)。
E.ABO血型的遺傳規(guī)律:
孩子不可能帶有雙親均無的血型基因;
孩子必定得到雙親每方一對(duì)等位基因中的一個(gè);
除雙親帶有相同基因外,孩子不可能帶有兩個(gè)相同基因;
某基因在雙親一方或雙方為純合子,必在孩子中表現(xiàn)
2.ABO血型的臨床意義。
A.輸血方面:血清中含有免疫性抗A、抗B的O型血液輸給A型、 B型或AB型受血者,免疫性抗體可以致敏受血者紅細(xì)胞。
ABO血型不相配合的輸血可以引起急性溶血性輸血反應(yīng)(IgG性質(zhì)的抗-A或抗-B抗體可以通過胎盤,ABO血型不配合的妊娠可能導(dǎo)致ABO新生兒溶血病;由IgM性質(zhì)的抗-A或抗-B引起的溶血是血管內(nèi)溶血,可發(fā)生DIC、休克和腎衰竭,嚴(yán)重者甚至死亡)。
B.妊娠方面:免疫性抗A、抗B可以通過胎盤,破壞母嬰ABO血型不合的胎兒紅細(xì)胞。
IgG性質(zhì)的抗-A或抗-B抗體可以通過胎盤,ABO血型不配合的妊娠可能導(dǎo)致ABO新生兒溶血病。
C.移植方面
3.ABO血型抗原和抗體的特點(diǎn)。
ABO血型抗原的特點(diǎn)見上
A.天然抗-A、抗-B抗體的發(fā)育:在ABO血型系統(tǒng)中,血清中規(guī)律性地存在著與紅細(xì)胞上缺少的抗原相對(duì)應(yīng)抗-A、抗-B抗體。其中A型人血清中的抗-B抗體或B型人血清中的抗-A抗體多為IgM性質(zhì)抗體;而O型人血清中的抗-A和抗-B抗體則多為IgM和IgG兩種性質(zhì)抗體同時(shí)存在。
出生時(shí) 通???/span>A、抗B沒有產(chǎn)生或較弱
出生三個(gè)月 反應(yīng)基本上與成年人的一樣
5~10歲時(shí) 達(dá)到高峰,具有較高效價(jià)
B.不規(guī)則抗-A、抗-B抗體的發(fā)育:在一些ABO亞型人的血清中,存在以IgM性質(zhì)為主的ABO血型抗體,如A亞型中的抗-A抗體;B亞型中的抗-B抗體;AB亞型中的不規(guī)則抗-A或抗-B抗體;抗-AB抗體;抗-A1抗體等,常為冷反應(yīng)性抗體,4℃反應(yīng)最強(qiáng),沒有臨床意義。但若存在37℃反應(yīng)性的此類抗體,同樣可能造成嚴(yán)重的輸血反應(yīng)。
三、了解
1.ABO血型的亞型。
A. ABO亞型(subgroups):紅細(xì)胞同屬于一種血型抗原。在結(jié)構(gòu)上有一定差異;性能也不完全相同;抗原弱性,正反定型不符合ABO血型系統(tǒng)特點(diǎn)。
B.分類:
A亞型:主要有A1和A2,其他A亞型不多見(A1亞型紅細(xì)胞上含有A和A1抗原,而A2型紅細(xì)胞上僅含有A抗原。相應(yīng)的在A1型血清中只有抗B凝集素,而A2型血清中除抗B凝集素之外,還含有抗A1凝集素。A1與A2的區(qū)分常用B型人血清和雙花扁豆種子提取液)。
B亞型:比A亞型更少,中國人中有B3、Bm 、B(A)、Bx等。
C.ABO亞型的血清學(xué)鑒定:紅細(xì)胞與抗A、抗A1、抗B及抗A,B的凝集反應(yīng)強(qiáng)度
紅細(xì)胞上H物質(zhì)活性的強(qiáng)弱;血清中是否存在不規(guī)則抗A1;分泌型個(gè)體唾液中的A、B和H物質(zhì);紅細(xì)胞對(duì)抗-A、抗-A1及抗-AB等相應(yīng)抗體的吸收放散能力
表達(dá)弱A或弱B抗原的亞型,大多數(shù)由于ABO位點(diǎn)稀有等位基因遺傳造成。
2.特殊ABO血型。
A. 孟買型(Bombay phenotype):細(xì)胞上無ABH抗原,血清中有抗-A、抗-B和抗-H抗體
表型標(biāo)記: OhO、OhA 、OhB、OhAB
B.類孟買型(Bombay-like phenotype):細(xì)胞上有少量的A或B抗原
表型標(biāo)記:Amh、Bmh、ABmh、Omh
C. B(A)型和 A(B)型
D.順式AB型(cis-AB型):A與B基因均在同側(cè)染色體上遺傳
E.獲得性B(acquired B)
3.其他重要的紅細(xì)胞血型系統(tǒng)。
A.MNSs血型系統(tǒng)的特點(diǎn):MN血型系統(tǒng)是人類紅細(xì)胞上第二大血型系統(tǒng);抗M抗體在人血清中常自然存在,多為IgM類,但也有部分或全部是IgG類;紅細(xì)胞上M抗原密度充足,即使抗M抗體全部為IgG類,鹽水介質(zhì)中也能發(fā)生凝集反應(yīng)。
B.MNSs血型的遺傳:M、N基因位于第4號(hào)染色體上,是一對(duì)等位基因;M、N基因表現(xiàn)為等顯性遺傳性狀;M、N兩個(gè)基因都具有劑量效應(yīng);
C.MNSs血型的臨床意義:輸血反應(yīng)、新生兒溶血病、親子鑒定
Rh血型系統(tǒng)
一、掌握
1.Rh血型抗原、抗體的特點(diǎn)。
A.Rh血型抗原的特點(diǎn):胎兒早期Rh抗原充分發(fā)育并維持整個(gè)一生,臍帶血或新生兒紅細(xì)胞Rh抗原與成人一樣強(qiáng)。Rh血型抗原的抗原性強(qiáng)度僅次于A、B抗原。Rh抗原顯示劑量效應(yīng)(劑量效應(yīng)最明顯的是e抗原,D沒有)。
B.Rh抗體的一般特性:絕大多數(shù)為免疫性抗體(多為IgG1和IgG3);極少數(shù)是天然抗體(如抗-Cw,抗-Cx,抗-E);D抗原存在最強(qiáng)免疫原性;常有聯(lián)合抗體(如抗-cE);一般不結(jié)合補(bǔ)體,引起延時(shí)性的血管外溶血;IgG 易通過胎盤,引起HDN。
C.Rh抗體的產(chǎn)生:
a.人體Rh抗體產(chǎn)生的主要途徑:輸血免疫、妊娠免疫
b.人體Rh抗體產(chǎn)生的時(shí)間(IgG):初次免疫后2~6個(gè)月內(nèi)(D抗原初次免疫,在外周血中檢出抗體的最短時(shí)間是6-8周,因此未被免疫的Rh陰性患者首次大量輸入陽性血,不會(huì)發(fā)生嚴(yán)重的輸血反應(yīng));再次免疫后,3周內(nèi)抗體濃度可達(dá)到高峰;約1/3Rh 陰性的人,經(jīng)Rh陽性抗原免疫后,不產(chǎn)生抗D。
D.人體抗D抗體免疫球蛋白性質(zhì):
a.RhD抗體半衰期:IgG1為21-22天;IgG3為10天
b.加熱對(duì)抗-D的破壞:56℃、3小時(shí)對(duì)IgG型抗-D影響很??;63℃、3小時(shí)IgG型抗-D效價(jià)約減少1/3。
c.抗-D持續(xù)的時(shí)間:
IgM型:刺激后濃度迅速減少,免疫后可能1-2年仍能檢出
IgG型:降解緩慢,最高在最后一次免疫刺激后的30年仍然可以檢測(cè)出IgG型抗體
d.頻率:妊娠產(chǎn)生的免疫刺激<輸血;獻(xiàn)血者產(chǎn)生同種抗體的頻率比病人小
e.D抗原雖然是免疫性最強(qiáng)的抗原,但目前抗-D檢出頻率并不高通常低于抗-E抗體。由于對(duì)Rh陰性個(gè)體輸注Rh陰性血液,同時(shí)對(duì)可能懷有Rh陽性胎兒的Rh陰性孕婦給予抗-D免疫球蛋白治療。
2.Rh血型和D抗原變異型的鑒定方法。
A.Rh血型的定義:人體紅細(xì)胞上含有Rh血型系統(tǒng)的五種主要抗原為 D、d;E、e;C、c。根據(jù)紅細(xì)胞上D抗原的有無,可將人類紅細(xì)胞分為Rh陽性和Rh陰性。即紅細(xì)胞上缺乏D抗原的人是Rh陰性;紅細(xì)胞上存在D抗原的人是Rh陽性。
B. RhD血型包括:正常D;弱D(weak D,抗原數(shù)量多寡,抗原表位正常)、Del(帶有非常弱的D抗原,每個(gè)細(xì)胞少于50個(gè)D抗原。普通血清學(xué)無法檢出,只能通過吸收放散確認(rèn)。臨床中將其等同于Rh陰性。獻(xiàn)血或受血者Del當(dāng)作陰性都不會(huì)有問題)、不完全D(partial D,抗原表位減少);超強(qiáng)D (-D-,紅細(xì)胞CE基因被D基因取代,每個(gè)紅細(xì)胞上D抗原位點(diǎn)數(shù)遠(yuǎn)多于正常Rh陽性紅細(xì)胞,能與IgG抗-D在鹽水中發(fā)生弱凝集);RhD陰性(存在有RhD基因缺失、RhD基因改變和RhD-CE-D融合基因三種機(jī)理)、Rhnulll。
C.D抗原變異型的鑒定方法:RhD變異型紅細(xì)胞與部分抗D血清發(fā)生凝集反應(yīng),而變異型與另一部分抗D血清不發(fā)生凝集反應(yīng),因此RhD變異型需用間接抗球蛋白試驗(yàn)證實(shí)。
D.Rh血型的常用鑒定方法(Rh分型試驗(yàn)):5種抗血清(抗-D、抗-C、抗-c、抗-E、抗-e)區(qū)分18種表型。一般僅鑒定D抗原(Rh陽性和Rh陰性)。方法分鹽水法和抗人球蛋白、聚凝胺等。
3.Rh抗體的臨床意義。
A.輸血方面:受血者血漿中存在抗Rh抗體,輸入Rh 陽性的紅細(xì)胞血液成分,將引起嚴(yán)重的溶血性輸血反應(yīng)
B.妊娠方面:血漿中存在抗Rh抗體的孕婦,妊娠 Rh陽性胎兒時(shí),IgG類抗Rh抗體可以通過胎盤進(jìn)入胎兒體內(nèi),破壞胎兒紅細(xì)胞,引起新生兒溶血病(多發(fā)生在第二胎,比ABO溶血嚴(yán)重:ABO出生時(shí)發(fā)育不完全,且依賴補(bǔ)體,而新生兒補(bǔ)體量少。Rh抗體對(duì)補(bǔ)體依賴差,并同時(shí)引起血管內(nèi)和外溶血)。
C.自身免疫性溶血性貧血:常見抗-e,其次是抗-c, -E , -D, -C。自身抗體會(huì)干擾同種抗體。
二、熟悉
1.D抗原變異型的臨床意義。
A. D變異型的定義(D variants):紅細(xì)胞上所含D抗原缺乏或被其他基因錯(cuò)代了一種或一種以上組成D 抗原嵌合體的因子時(shí),統(tǒng)稱為D變異型。變異型D在初篩試驗(yàn)中,常被定為Rh陰性,需進(jìn)一步做確認(rèn)試驗(yàn)。
B.D變異型的分類:不完全D,弱D,Del。D變異型理論上仍然屬于Rh陽性。
a.弱D:曾用名Du。紅細(xì)胞上D抗原數(shù)量明顯減少,約為200~1萬(正常約1萬~3萬)。與IgM類抗-D試劑反應(yīng)陰性,IAT法檢測(cè)為陽性。D抗原減弱,理論上任何抗D試劑都能檢出。漢族人中,其檢出率為Rh陰性的3-5%。最常見的弱D是弱D15型。
產(chǎn)生原因:?jiǎn)蝹€(gè)核苷酸突變,影響D抗原插入細(xì)胞膜,使RBC的D抗原數(shù)量減少。
b. Del:吸收放散型。< 200 copy/cell,占中國Rh陰性的10-33%。
c.不完全D:產(chǎn)生原因是D抗原表位的部分缺失。RHD基因部分被RHCE基因替代,產(chǎn)生雜合基因,氨基酸改變位于細(xì)胞膜外。存在D抗原質(zhì)的變化,能產(chǎn)生針對(duì)缺乏表位的抗-D抗體。IgM-D陰性或弱陽性,多克隆IgG-D抗人球介質(zhì),可能陽性反應(yīng)。
C.RhD變異型血清學(xué)特點(diǎn):RhD變異型紅細(xì)胞與部分抗D血清發(fā)生凝集反應(yīng),而變異型與另一部分抗D血清不發(fā)生凝集反應(yīng),RhD變異型需用間接抗球蛋白試驗(yàn)證實(shí)。
D.RhD變異型的臨床意義:
a.輸血方面:RhD變異型供血者免疫原性不強(qiáng),反應(yīng)原性強(qiáng);RhD變異型受血者接受Rh陽性紅細(xì)胞刺激,可以產(chǎn)生某種形式的抗D抗體。作為受血者,D變異型個(gè)體視作Rh陰性;作為供血者,除外Del, D變異型視作Rh陽性。
b.妊娠方面:RhD變異型孕婦妊娠Rh陽性胎兒可以產(chǎn)生抗D;RhD陰性孕婦妊娠RhD 變異型胎兒,也可以產(chǎn)生抗D。
2.臨床輸血中Rh陰性血的合理應(yīng)用。這段我回去看書確認(rèn)一下,有點(diǎn)不確定,先不寫
三、了解
1.Rh血型系統(tǒng)的命名和抗原遺傳。
A.Rh血型的遺傳學(xué)說:
a. Wiener學(xué)說(Rh--Hr命名法):認(rèn)為每個(gè)Rh抗原是幾個(gè)抗原因子組合而成,每個(gè)因子都能用相應(yīng)抗血清所識(shí)別
b. Fisher--Race學(xué)說(CDE命名法三基因連鎖理論):每條染色體的3個(gè)基因座相互連鎖,每一基因座有一對(duì)等位基因,3個(gè)位點(diǎn)的基因以復(fù)合體的形式遺傳。d抗原不存在,為書寫方便保留。
B.Rh血型系統(tǒng)的命名(二基因座模式):Rh血型抗原的表達(dá)是由RHD和RHCE基因所控制,RHD和RHCE基因分別有10個(gè)外顯因子,基因產(chǎn)物分別是RHD多肽和RHCE多肽,用字母表示抗原,如D、E、C、e和c等;用RHD和RHCE表示基因,根據(jù)所編碼的抗原進(jìn)行命名,如RHCE*Ce等,部分D或變異D用RHD*DⅥ等表示。
C.Rh血型系統(tǒng)的遺傳:Rh血型為共顯性單倍體基因連鎖遺傳。每個(gè)個(gè)體Rh血型基因型由分別來自父母的兩條單倍體構(gòu)成,每條染色體上可有8種不同組合單倍型,可形成36種基因型。表型推斷其基因型不準(zhǔn)確,例如表型為CcDEe,基因型可以是CDE/cde、CDE/cDe、CDe/cdE、CdE/cDe、Cde/cDE、cDE/CDe 6種。
HLA血型
*組織相容性:指在不同個(gè)體間進(jìn)行組織或器官移植時(shí), 受者與供者雙方相互接受的程度。
*組織相容性抗原:代表個(gè)體特異性的同種抗原, 包括主要組織相容性抗原和次要組織相容性抗原。
*主要組織相容性抗原MHA:指能引起強(qiáng)而迅速排斥反應(yīng)的抗原,在移植排斥反應(yīng)中起主要作用。
*主要組織相容性復(fù)合物MHC:指編碼主要組織相容性抗原的基因群,它是一組緊密連鎖于某條染色體上的基因群。
一、掌握
1、白細(xì)胞上抗原的種類。
白細(xì)胞表面的重要血型系統(tǒng):人類白細(xì)胞抗原系統(tǒng)(HLA)、人類中性粒細(xì)胞特異性抗原系統(tǒng)(HNA)。
A.HLA-Ⅰ類的基因、抗原與分布
a.基因:有31個(gè)基因座,其中HLA-A、HLA-B和HLA-C為經(jīng)典的HLA-Ⅰ類基因,編碼HLA-A、-B、-C分子;其它基因的產(chǎn)物分布有限,且其功能不明,另外還有許多偽基因。
b.抗原:在同種異基因刺激誘導(dǎo)下,能產(chǎn)生強(qiáng)烈的細(xì)胞和抗體應(yīng)答,控制了抗原遞呈細(xì)胞活性。
c.分布:HLA-I類基因廣泛分布于有核細(xì)胞、血小板、網(wǎng)織紅細(xì)胞表面,但成熟的紅細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞和滋養(yǎng)層細(xì)胞不表達(dá)HLA-Ⅰ類抗原。
B.HLA-II類的基因、抗原與分布:又被稱為HLA-D區(qū),包含至少5個(gè)亞位點(diǎn)
a.基因:有30個(gè)基因座,其中經(jīng)典的Ⅱ類基因一般指DR、DP和DQ。近年來,陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了一些位于Ⅱ類基因區(qū)的新基因座,其中某些基因產(chǎn)物與內(nèi)源性抗原的處理與呈遞有關(guān)。
b.抗原:能誘導(dǎo)體液免疫應(yīng)答,導(dǎo)致產(chǎn)生HLA抗體,并刺激細(xì)胞免疫應(yīng)答;DR、DP、DQ最易產(chǎn)生免疫性,是移植中最重要的位點(diǎn)。
c.分布:僅表達(dá)在部分類型的組織上和部分具有免疫活性的細(xì)胞上,如B淋巴細(xì)胞、活化T淋巴細(xì)胞、抗原提呈細(xì)胞(APC)如單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、樹突細(xì)胞等和一些腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞膜上。
C.HLA-III類的基因、抗原與分布:HLA-Ⅲ基因區(qū)有36個(gè)基因座,其中C2、C4、Bf座編碼相應(yīng)的補(bǔ)體成分,另外還有21羧化酶基因,腫瘤壞死因子基因,熱休克蛋白70基因。是人類基因組中密度最大的區(qū)域,但與移植關(guān)系不大。
2、HLA的概念。
人類白細(xì)胞抗原系統(tǒng)HLA:是人類的主要組織相容性抗原(MHA),表達(dá)于有核細(xì)胞表面。編碼HLA的基因群稱為HLA復(fù)合體,位于6號(hào)染色體短臂,共顯性復(fù)等位基因遺傳。
3、HLA的遺傳、特點(diǎn)和連鎖不平衡。
A.單倍體遺傳:HLA復(fù)合體是一組緊密連鎖的基因群。HLA基因在一條染色體上的組合稱為單倍型。在遺傳過程中,HLA復(fù)合體是以單倍型作為一個(gè)完整的遺傳單位由親代傳給子代的,稱單倍型遺傳。每個(gè)父親或母親貢獻(xiàn)出一組單體型,兩個(gè)單體型組成一個(gè)基因型。
B.高度多態(tài)性:指MHC存在多個(gè)基因座,每個(gè)基因座位上存在多個(gè)等位基因,編碼多種基因產(chǎn)物。
a.多態(tài)性的產(chǎn)生: HLA基因區(qū)臨近,且同源性高,易產(chǎn)生互換;新產(chǎn)生的等位基因有可能更有效地提呈病原體多態(tài)。眾多等位基因多態(tài)性有利于雜合子的產(chǎn)生。
*位于同一基因座的不同基因系列為復(fù)等位基因。一對(duì)等位基因均顯性表達(dá),稱為共顯性表達(dá)。
b.多態(tài)性的意義:賦于種群適應(yīng)多變環(huán)境的能力(抵御各種病原體的侵襲)、調(diào)控機(jī)體免疫應(yīng)答的能力(MHC控制機(jī)體對(duì)特定抗原是否應(yīng)答以及應(yīng)答的強(qiáng)度)、個(gè)體的終身遺傳標(biāo)志(無親緣個(gè)體間出現(xiàn)MHC型別完全相同的機(jī)率極低)、尋找同種器官移植供體的依據(jù)(根據(jù)HLA配型結(jié)果篩選適宜供體,是尋找器官移植供體的唯一方法)。
**雜合子優(yōu)勢(shì):指一對(duì)等位基因在異型合子(Heterozygote)中的表現(xiàn)型或生理功能超出其任一同型合子的現(xiàn)象。即假設(shè)A與a是一對(duì)等位基因,若基因型為Aa的個(gè)體的表現(xiàn)型比基因型為AA或aa更突出,則稱基因型Aa具有雜合子優(yōu)勢(shì)
HLA-Ⅰ、Ⅱ類基因產(chǎn)物參與提呈抗原肽;不同的HLA等位基因產(chǎn)物提呈結(jié)構(gòu)不同的抗原肽,并誘發(fā)出特異性和強(qiáng)度不同的免疫應(yīng)答。HLA多態(tài)性從基因的儲(chǔ)備上,造就了對(duì)抗原(病原體)入侵反應(yīng)性和易感性不同的個(gè)體,兩個(gè)等位基因各自編碼一種蛋白質(zhì),這兩種蛋白質(zhì)的相互作用的結(jié)果,比各自獨(dú)立存在更有利于個(gè)體的生存。
C.連鎖不平衡:兩個(gè)基因座位上的某些等位基因,同時(shí)出現(xiàn)在一條染色體上的實(shí)際頻率與隨機(jī)出現(xiàn)的頻率之間的差異。(一些HLA等位基因同時(shí)出現(xiàn)在同一條染色體上的頻率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于在HLA位點(diǎn)平衡情況下的預(yù)計(jì)值)
原因:某些單倍體具有選擇優(yōu)勢(shì);群體遷移與混雜;基因隨機(jī)漂移;近親繁殖。
二、熟悉
1、HLA的實(shí)際應(yīng)用。
A.HLA與母胎的關(guān)系:
a.胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞不表達(dá)HLA-I 類抗原:保護(hù)攜帶父方HLA單體型的胎兒不被排斥
b.原因不明的習(xí)慣性流產(chǎn):可能是由于父母雙方HLA不相容性過弱,不能產(chǎn)生胎兒保護(hù)性抗體而使胎兒流產(chǎn)??赏ㄟ^輸入第三者或丈夫的淋巴細(xì)胞以激發(fā)孕婦同種異體反應(yīng)的方法治療習(xí)慣性流產(chǎn)。
B.器官移植:
e.g.腎移植:首要匹配HLA-DR,其次HLA-A、B(低分)。早期要求供受者間高度匹配?,F(xiàn)在HLA匹配程度要求已有所下降(可適當(dāng)選用免疫抑制劑)。但要求ABO血型匹合,避免急性排斥(檢查受者是否存在針對(duì)供者的HLA抗體)。
C.骨髓移植:
a.骨髓移植(BMT):存在有免疫系統(tǒng)的排斥反應(yīng),包括受者免疫系統(tǒng)對(duì)供者的排斥與供者植入成功后對(duì)受者的排斥(GVHD)。要求供受者之間的HLA-A、B、C、DR匹配。
b.臍帶血移植:可選擇殘留于胎盤中的胎兒血液50~150ml對(duì)臍血進(jìn)行HLA定型。臍血T細(xì)胞上HLA-II類不表達(dá),I-類表達(dá)較弱,可降低GVHD的發(fā)生。對(duì)兒童與小個(gè)子適用,對(duì)再障和慢性髓細(xì)胞性貧血的結(jié)局不太好。
**移植物抗宿主病(GVHD):具有免疫潛能的移植物被植入了免疫受損或免疫清除的宿主體內(nèi)。移植物可識(shí)別宿主的組織,認(rèn)為是外來物而啟動(dòng)免疫反應(yīng)
D.親子鑒定
E.相關(guān)疾?。簭?qiáng)直性脊柱炎(AS)患者的HLA-B27的陽性率為90%左右;HLA-DQ2和發(fā)作性睡眠癥相關(guān);HLA-B*5701個(gè)體對(duì)HIV治療藥物Abacavir過敏,但體內(nèi)的T細(xì)胞更有可能識(shí)別出代表艾滋病毒蛋白的細(xì)胞。
三、了解
1、HLA抗原的命名原則。
每個(gè)特定的人類白細(xì)胞抗原的名字分三個(gè)部分:縮寫HLA;亞型的字母(比如HLA-B);特定分子的號(hào)碼(比如HLA-B27)。WHO HLA系統(tǒng)命名委員會(huì)從2010年4月開始,可允許容納新測(cè)序確定的等位基因。
2、粒細(xì)胞抗原的種類以及粒細(xì)胞抗體的意義。 0w0完全沒找到。。
3、HLA抗原在骨髓移植和實(shí)體器官移植配型中的意義。
HLA 是人類的主要組織相容性抗原,故器官移植的成敗主要取決于供、受者之間 HLA 等位基因匹配的程度。進(jìn)行組織器官移植時(shí),往往因供受者之間的HLA型別不同而發(fā)生移植排斥反應(yīng),其排斥反應(yīng)的強(qiáng)弱依次為:無親緣關(guān)系者,親屬、同胞、同卵孿生兒
隨著大量器官移植臨床隨訪資料的積累分析,有關(guān)HLA配型在器官移植中的臨床意義已得到公認(rèn):HLA配型在器官移植中是必要的。 HLA的相容性程度仍然是CsA時(shí)代影響移植物長(zhǎng)期存活的主要因素之一。
4、HLA的檢測(cè)技術(shù)
A.血清學(xué)技術(shù):微量淋巴細(xì)胞毒實(shí)驗(yàn)(LCT)、混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)(MLC)、致敏淋巴細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(PLT)
B.分子生物學(xué)技術(shù):直接核苷酸測(cè)序、序列特異性引物擴(kuò)增(SSP)、序列特異性寡核苷酸探針雜交(SSO)
血小板血型
一、掌握
1. 血小板表面抗原的組成及定義。
A.共有抗原(血小板相關(guān)抗原):又稱血小板非特異性抗原或血小板共有抗原。包括主要組織相容性抗原(HLA)和紅細(xì)胞血型系統(tǒng)相關(guān)抗原,如ABO, Le, Ii, P系統(tǒng);HLA class I; PAIG等。
B.特異性抗原:血小板特異性抗原(HPA)。是位于血小板膜糖蛋白GP上的抗原表位。雙等位基因共顯性遺傳。以HPA-加數(shù)字表示,如HPA-1。
a表示基因頻率大于50%的等位基因,b表示基因頻率小于50%的等位基因。各系統(tǒng)等位基因之間的差異,主要由單核苷酸多態(tài)性(SNP,密碼子最后一位不同,編碼的氨基酸相同)引起。
2. 血小板抗原、抗體的臨床意義。
血小板減少癥:由假性減少(抗體介導(dǎo)的PLT聚集、衛(wèi)星現(xiàn)象、拮抗劑)、生成障礙、捕獲過份、破壞加速、其它自免疾病(SLE)、妊娠-新生兒胎母免疫(NAIT)或存在異常分布和儲(chǔ)存(脾腫大、功能抗進(jìn)、大量輸RBC/血漿、低溫)引起。
主要包括免疫性血小板減少癥:自身免疫性血小板減少癥(AITP) 、藥物誘導(dǎo)免疫性血小板減少癥 (DIIT)和同種免疫性血小板減少癥
A.自身免疫性血小板減少癥(AITP):AITP比自身免疫性溶血性貧血(AIHA)更常見。PAIgG檢測(cè)是其最有價(jià)值的試驗(yàn)。但是PAIgG并非特異,其陽性診斷價(jià)值僅為46%,陰性診斷價(jià)值為82%。
B.藥物誘導(dǎo)免疫性血小板減少癥(DIIT):以肝素誘導(dǎo)的血小板減少癥為常見。肝素與血小板因子4(PF4)結(jié)合→新表位暴露→抗體識(shí)別→血小板激活。
C.同種免疫性血小板減少癥:包括新生兒同種免疫性血小板減少性紫癜(NAITP)、輸血后血小板減少性紫癜(PTP)、血小板輸注無效(PTR)。
產(chǎn)生原因包括:
①HPA抗體(在輸注去白細(xì)胞紅細(xì)胞和血小板的病人中,HPA抗體產(chǎn)生概率僅為1.5%。HPA抗體多與HLA抗體同時(shí)存在);
②HLA抗體(是引起免疫性PTR的主要原因。血小板上的HLA-I類抗原不足以引發(fā)抗體產(chǎn)生,白細(xì)胞的污染是輸注血小板后產(chǎn)生HLA抗體的主要原因。因人群差異,在輸注未去除白細(xì)胞的血液的病人中,30~100%可產(chǎn)生HLA抗體)。
二、熟悉
1. 血小板輸注無效后應(yīng)如何分析和處理。
A.血小板輸注無效定義:血小板輸注后血小板計(jì)數(shù)比預(yù)期增加的少。
B.確定公式:
a.1小時(shí)增加量< 5,000-7,500
b.糾正計(jì)數(shù)增加量(CCI)=(血小板增加量X BSA)/血小板輸注劑量
其預(yù)期值應(yīng)在10-60分鐘內(nèi)>7500或在18-24小時(shí)內(nèi)>4500。
c.在ABO血型相合或輸注新鮮血小板<72h內(nèi)血小板增加量小于預(yù)期值
C.相關(guān)并發(fā)癥:
a.污染白細(xì)胞引起:HLA -I類抗原同種免疫、細(xì)胞因子的產(chǎn)生、巨細(xì)胞病毒、GVHD
b.污染紅細(xì)胞引起:Rh同種免疫;瘧疾、巴貝西蟲病等寄生蟲病
c.血漿及其內(nèi)含物引起:微生物污染、血漿蛋白、輕微和嚴(yán)重的過敏反應(yīng)、ABO抗體介導(dǎo)的溶血、輸血相關(guān)急性肺損傷(TRALI)
**TRALI:是一種輸血后急性呼吸迫綜合癥,一般發(fā)生在輸血后6小時(shí)之內(nèi),患者立即發(fā)生呼吸因難和呼吸急促,有肺裂紋但無充血性心衰和循環(huán)過載跡象。胸片可見雙側(cè)肺水腫但無心衰(非心源性肺水腫)。SD滅活的血漿被認(rèn)為不會(huì)引起TRALI。輕度患者給予輸氧;嚴(yán)重患者應(yīng)給予呼吸機(jī)和ICU治療。利尿和皮質(zhì)類固醇的使用并無特殊規(guī)定。大多數(shù)患者72-96小時(shí)后肺功能恢復(fù)正常,但仍有5-10%的病例仍搶救無效。
d.血小板自身引起:非溶血性發(fā)熱性輸血反應(yīng)(FNHTR)、血小板輸注無效、輸血后紫癜
D.分析與處理:見下圖
E.預(yù)防:
a.胎兒/新生兒同種免疫性血小板減少 (FNAIT):胎兒血小板通過胎盤進(jìn)入母體,母親產(chǎn)生針對(duì)胎兒血小板抗原的同種抗體,抗體通過胎盤,引起胎兒的血小板減少。
診斷與治療:快速識(shí)別疾?。惠斎肽赣H血小板或是單采、洗滌(避免輸入其他抗體)或血小板配型輸注。
b.同種免疫性血小板減少癥的診斷:抗原測(cè)定(表型:PIFT、 MAIPA;基因分型:PCR-RFLP、PCR-SSP、TaqMan)與抗體測(cè)定(結(jié)合測(cè)定:PIFT、ELISA、流式細(xì)胞術(shù);糖蛋白特異免疫測(cè)定法:MAIPA)。
三、了解
1. 血小板特異性抗原多態(tài)性特點(diǎn)。 0w0并沒有發(fā)現(xiàn)這個(gè)- -
2. 血小板血型血清學(xué)鑒定方法。
a.血小板抗原單克隆抗體固定法(MAIPA)
b.抗原捕獲
c.凝膠抗原特異測(cè)定(GASA)
d.與SNP檢測(cè)方法類似。PCR-SSP、PCR-RFLP、PCR-SBT
3. 血小板抗體常用檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。
重組血小板抗原在ELISA中的運(yùn)用;純化血小板抗原或者重組血小板抗原在表面等離子體激元共振(SPR)中的應(yīng)用
影響因素:血小板抗原(三維結(jié)構(gòu)、密度、表位);血小板抗體(濃度、親和力、異質(zhì)性);其他因素(比如說:配體)
輸血前免疫血清學(xué)檢查
一、掌握
1、輸血前檢查的主要程序。
A.輸血前檢查的目的:為受血者選擇適合的血液或血液成分,即使輸入的紅細(xì)胞在受血者體內(nèi)有正常的存活時(shí)間;使受血者本身紅細(xì)胞沒有臨床上的明顯破壞。
B.輸血前檢查的要求:見了解-1
C.主要程序:
a.受血者病史和血標(biāo)本等的檢查、核對(duì)及處理:
①輸血申請(qǐng)單:注意申請(qǐng)日期、患者住院號(hào)、申請(qǐng)醫(yī)生簽名、所需血液數(shù)量和類型、輸血目的和患者姓名等。
②血標(biāo)本要求:血液標(biāo)本鑒定和標(biāo)記,并與申請(qǐng)單上內(nèi)容核對(duì)、確定;標(biāo)本必須能代表患者當(dāng)前免疫狀況(血液標(biāo)本必須是輸血前3天內(nèi)采集的。再次輸注紅細(xì)胞,應(yīng)盡量重新采集一份標(biāo)本進(jìn)行交叉配血試驗(yàn),避免回憶反應(yīng)而產(chǎn)生抗體漏檢;根據(jù)患者的治療情況可選擇洗滌被檢紅細(xì)胞);防止血液標(biāo)本的稀釋和溶血;抗體檢查最好使用血清;每次輸血后標(biāo)本至少保存7天。
*為什么抗體檢查最好用血清?血漿中可形成小的纖維蛋白凝塊使認(rèn)讀困難;通過補(bǔ)體激活才能反應(yīng)的抗體,用血漿檢不出(抗凝劑EDTA或枸櫞酸鹽能螯和鈣并阻止補(bǔ)體激活)。
b.ABO和Rh血型定型:
①ABO血型定型:受血者ABO血型正反定型;供血者做ABO血型確認(rèn);4個(gè)月內(nèi)嬰兒只做正定型
②Rh血型定型:主要鑒定RhD抗原;按試劑說明操作,嚴(yán)格對(duì)照試驗(yàn):抗原陰性對(duì)照試驗(yàn)、抗原陽性對(duì)照試驗(yàn)、試劑對(duì)照試驗(yàn)。
*為何檢測(cè)RhD抗原而非RhE抗原:抗E的檢出率遠(yuǎn)高于抗D(高6-7倍),但E抗原的免疫原性遠(yuǎn)低于D抗原;同時(shí)幾乎一半的血液為E陰性,而D陰性幾乎不可能臨時(shí)得到。
c.抗體篩選和鑒定:
①抗體篩選的目的:發(fā)現(xiàn)有臨床意義的抗體;為帶有抗體的患者提供相配合的血液。
*“有臨床意義”的抗體:某種特異性抗體曾引起新生兒溶血病、明顯溶血性輸血反應(yīng)、使輸入紅細(xì)胞存活時(shí)間縮短。
②抗體篩選的原則:
i使用包含臨床主要血型抗原的篩選紅細(xì)胞(2~3人份O型紅細(xì)胞組成;具有臨床主要抗原D、C、E、M、N、P1、S、K、Fya等等;抗原盡可能是純合子);
ii試驗(yàn)包括完全抗體和不完全抗體的檢測(cè);
iii抗體篩選陽性標(biāo)本用相同試驗(yàn)方法進(jìn)行抗體鑒定;
iv確定抗體特異性后,應(yīng)該確定受檢者的相應(yīng)抗原。
③抗體篩選的局限性:與低頻抗原起反應(yīng)的抗體可能被漏掉;只能與一種特殊抗原的純合子細(xì)胞起反應(yīng)的抗體可能漏檢。
④抗體鑒定:
i抗體鑒定配組紅細(xì)胞由8~16人份O型紅細(xì)胞組成
ii每個(gè)紅細(xì)胞具有各自不同的抗原成分
iii每套紅細(xì)胞均附有相應(yīng)的紅細(xì)胞抗原譜
iv根據(jù)譜紅細(xì)胞反應(yīng)格局鑒定抗體特異性
v抗體鑒定試驗(yàn)內(nèi)容:使用譜紅細(xì)胞檢測(cè)患者的血清;自身紅細(xì)胞檢查
⑤確定抗體特異性:
i受檢血清與每一個(gè)譜細(xì)胞、自身紅細(xì)胞、酶處理紅細(xì)胞反應(yīng)結(jié)果;
ii檢查各個(gè)反應(yīng)相結(jié)果,觀察反應(yīng)格局及是否有溶血現(xiàn)象;
iii陽性反應(yīng)細(xì)胞中,是否出現(xiàn)劑量效應(yīng);
iv自身紅細(xì)胞缺少的抗原,提示可能存在相應(yīng)抗體
d.交叉配血試驗(yàn)
①交叉配血試驗(yàn):也稱配合性試驗(yàn),實(shí)際上只是檢查不配合性,使受血者和供血者血液間沒有可檢測(cè)出的不相配合的抗原抗體成分。
②交叉配血試驗(yàn)主要目的:確保為患者選擇合適的血液,檢測(cè)受血者和供血者血液間是否有不相配合的抗原抗體成分,以防止輸血后產(chǎn)生溶血性輸血反應(yīng)。
③交叉配血試驗(yàn)的內(nèi)容:(下示意圖)
i受血者血清對(duì)供血者紅細(xì)胞,稱“主側(cè)”配血:檢測(cè)受血者血清中是否有與供血者紅細(xì)胞抗原相對(duì)應(yīng)的抗體;
ii受血者紅細(xì)胞對(duì)供血者血清,稱“次測(cè)”配血:檢測(cè)供血者血清中是否有與受血者紅細(xì)胞抗原相對(duì)應(yīng)的抗體;
iii受血者血清對(duì)受血者紅細(xì)胞,稱為自身對(duì)照:檢測(cè)受血者是否有自身抗體。
④交叉配血試驗(yàn)的要求:
i必須包括檢測(cè)IgM抗體和IgG抗體兩種試驗(yàn)方法:鹽水介質(zhì)法(IgM)、凝聚胺試驗(yàn)法(IgG)、抗人球蛋白試驗(yàn)等;
ii主側(cè)試驗(yàn)結(jié)果,不可以有凝集和溶血;
iii次側(cè)試驗(yàn)結(jié)果,允許條件可以有凝集,不可以溶血。
⑤交叉配血試驗(yàn)反應(yīng)結(jié)果與解釋:見下圖
⑥交叉配血與抗體篩選結(jié)果不符原因:在A1和A1B型人血清中的抗H;抗Leb;在A2人血清中的抗A1;與低頻率抗原反應(yīng)的抗體;與相應(yīng)抗原純合子起反應(yīng)的抗體。
e.標(biāo)簽和發(fā)血:血液或血液成分發(fā)出之前,血庫人員必須再次核對(duì)
①輸血申請(qǐng)單和血袋上的標(biāo)簽是否一致
②核對(duì)血液失效日期,避免發(fā)出過期血
③檢查血液是否有異常顏色和外觀
④正確無誤后,將血液或血液制品及時(shí)發(fā)出
*緊急情況時(shí)的發(fā)血:標(biāo)簽標(biāo)明此血尚未完成配血試驗(yàn);盡快完成配血試驗(yàn)。
2、交叉配血試驗(yàn)的目的、要求與內(nèi)容。見上
3、抗體篩選的目的。見上
二、熟悉
1、臨床輸血的常規(guī)程序。見上
三、了解
1、輸血前檢查的要求。
A.輸入的紅細(xì)胞:在受血者體內(nèi)必須不凝集、不溶血
B.輸入的血漿成份:不導(dǎo)致受血者紅細(xì)胞臨床明顯破壞
(未完待續(xù)= =)
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